一种复合酶反应液制造技术

本发明专利技术是一种复合酶反应液，其特点是由复合酶、原生质液、酶促进剂、含微量元素的无机盐、蒸馏水以及辅料所组成。本发明专利技术的复合酶反应液无毒，生物降解性能好，可广泛用于中草药、保健品、食品、饮料，通过对其原料的酶解发酵，提高酶解反应速度，提高有效成份的提取率，用于中药工业无废水、废气、废渣，对环境保护有着重要意义。（*该技术在2021年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于酶
，更具体地说，是一种含多种复合酶的反应液的组合物。本专利技术的主要技术方案将复合酶、原生质液、酶促进剂、含微量元素的无机盐、蒸馏水以及辅料混合成复合酶反应液。本专利技术的复合酶反应液组成成分及其含量(按组分重量之和为100计)复合酶2～5％、原生质液4.5～60％、酶促进剂5～10％、蒸馏水10～70％、无机盐0.5～16％、辅料3～24％。本专利技术所述的复合酶为纤维素酶、果胶酶、葡萄糖异构酶、淀粉酶、脂肪酶以2∶2∶3∶3∶3重量比的混合酶。所述的纤维素酶、果胶酶、葡萄糖异构酶、淀粉酶、脂肪酶都是按已知方法生产(张树政主编，《酶制剂工业》，科学出版社，1989年版)，而且除纤维素酶外，其它四种酶均可在市场上购得。所述的纤维素酶采用生物工程方式生产，在常温常压下培养。具体工艺流程(1)菌种绿色木霉菌株；(2)菌株的稀释及诱变按1/2倍数的纯净矿泉水在烧杯中稀释绿色木霉菌株，用乳酸调节至PH值4-4.5，浸泡24小时，并置于紫外灯下交叉处理7次，温度28℃左右；(3)培养加入米糠1％、麦皮0.5％、硫酸铵0.2％、磷酸二氢钾0.1％、碳酸钙0.1％、葡萄糖1％，培养24小时，PH4.0-4.5，温度23-27℃；(4)再加培养基麦皮0.5％、葡萄糖1％、硫酸铵0.2％、硫酸二氢钾0.1％，培养时间24小时，PH4.0-4.5，温度27-30℃；(5)在培养基中继续培养加入蛋白胨0.075％、吐温0.2％、硫酸铵0.03％、硫酸二氢钾0.2％、尿素0.03％、氯化钙0.03％、硫酸镁0.03％、硫酸铁0.005％、硫酸锰0.016％、硫酸锌0.014％、氯化钴0.02％，培养48小时，PH4.0-5.0，温度26-29℃；(6)第一次过滤取上清液，加入硫酸镁0.5％，放置24小时；(7)第二次过滤取上清液；(8)离心取沉淀物(时间15分钟，转速1500转)；(9)收集沉淀物、干燥、研磨成粉，干燥温度低于60℃、粉未细度100目。组成复合酶的五种酶均是＂水解酶＂，对不同的酶有不同的催化机制所述的纤维素酶，C1组分和Cx组分对溶解纤维素有交互协同作用，最后将其转化成葡萄糖。所述的果胶酶主要的来源是腐败的苹果、香蕉、葡萄、桔子等霉菌为微生物菌种，因此它所含的组分是PE(果胶酯酶)。PE能使中草药材中的果胶甲酯水解，生成果胶酸，形成保健药物中的营养成份。所述的葡萄糖异构酶又称木糖异构酶(EC5，3，1，5)，它能将D-木糖、D-葡萄糖、D-核糖等醛糖可逆地转化为相应的酮糖。葡萄糖异构酶是酸性蛋白质，分子中酸性氨基酸残基比碱性氨基酸多。所述的淀粉酶作用于淀粉时，可从分子内部切开α-1，4键而生成糊精和还原糖。所述的脂肪酶是分鲜脂肪的酶，这里的脂肪是指生物产生的天然油脂，水解发生的部分是油脂的酯键。复合酶的具体制方法五种酶按比例混合，用摇床将其混合均匀即可。本专利技术所述的原生质液通常是从水果、蔬菜等榨取、提取出来的原生质液，包括玉米浆、玉米粉、胡萝卜汁、蛋清、苹果汁、大豆粉、梨汁、萝卜汁、青菜汁、苦瓜汁、豆油、麦芽汁、白菜汁、莲子汁、豆芽汁、牛乳在内的一种、两种或两种以上的混合物。原生质液在应用过程中主要做为生长素。生长素对酶活性是必需的，这些与酵母酵解活性有关的生长素中的成分称为辅酶，它本身不是酶，也不是蛋白质，通常为菸酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)和菸酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)。NAD、NADP以及其它与氧化还原酶有关的辅酶起着氢供体或氧受体的作用。它是一种中间体，没有这些中间体，酶解无法进行下去，这就是为什么有些酶活性很高但酶解效果不好的主要原因。本专利技术所述的酶促进剂包括酵母膏、吐温80、红曲粉在内的一种、两种或两种以上的混合物。酶促进剂属于酶的诱导物或表面活性剂，能增加产酶速度，提高酶解反应速度。本专利技术所述的含微量元素的无机盐包括KH2PO4、K2HPO4、(NH4)2HPO4、KNO3、NaNO3、MgSO4、Na2SO4、ZnSO4、CaCL2、CaSO4、(NH4)2SO4、NH4NO3、KCl、FeSO4在内的一种、两种或两种以上的混合物。无机盐中的金属离子对于酶解的影响是多方面的，磷是构成核酸、磷脂的成分，并参与腺三磷(ATP)和鸟三磷(GTP)在内的所有能量转移反应，用时也是许多酶的活性基团成分，因为有机发酵原料中的磷量往往不能满足酶解需要，必须添加；硫是菌体蛋白中含硫氨基酸如胱氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸等的组成部分，也是辅酶的组成部分；钾以离子状态存在于菌体中，其作用是控制细胞内原生质的胶体状态和细胞膜的透性作用；镁以离子状态存在菌体中，对多种酶的活性有促进作用；钙以离子状态可起到控制细胞透性和调酸度等作用，对淀粉酶、真菌蛋白酶等多种酶的活性起到稳定和活化作用；金属钠可促进酶的产量。本专利技术所述的辅料包括蛋白胨、蛋白粉、甘油、酵母膏、葡萄糖、蜂王浆、琼脂、乳酸、白糖、红糖、柠檬酸在内的一种、两种或两种以上的混合物。辅料的主要作用是调节碳和氮的比例，促进发酵，稳定PH值。本专利技术所述的蒸馏水可按常规方法制得。本专利技术的复合酶反应液按用途可分成10类，其成分和含量(以组分重量之和为100计)如下1.用于绿色植物提取物(1)原生质液4.8％，其中玉米浆1.8％、胡萝卜汁1％、蛋清2％；(2)酶促进剂6.5％，其中酵母膏3％、吐温801.5％、红曲粉2％；(3)无机盐7.4％，其中KH2PO40.1％、KH2PO40.1％、MgSO41.5％、Na2SO44.5％、(NH4)2SO40.7％、KCl0.5％；(4)复合酶2％；(5)辅料9.3％，其中蛋白胨2％、葡萄糖6％、蜂王浆1.3％；(6)蒸馏水70％。2.用于抗衰老药物系列(1)原生质液为苹果汁10％；(2)酶促进剂10％，其中吐温80 5％、红曲粉5％；(3)无机盐3.65％，其中KH2PO40.1％、MgSO40.25％、NH4NO32.5％、CuSO40.2％、ZnSO40.2％、FeSO40.2％、MnSO40.2％；(4)复合酶2％；(5)辅料9.35％，其中红糖3.6％、琼脂2％、柠檬酸3.75％；(6)蒸馏水65％。3.用于抗心脑病血管药物系列(1)原生质液32.6％，其中大豆粉5％、玉米粉5％、梨汁10％、苹果汁10％、蛋清2.6％；(2)酶促进剂为吐温80 5％；(3)无机盐0.6％，其中KH2PO40.2％、NaCl0.2％、(NH4)2SO40.2％；(4)复合酶2％；(5)辅料10.8％，其中琼脂2％、柠檬酸3.8％、蛋白胨5％；(6)蒸馏水49％； 4.用于抗癌药物系列(1)原生质液为胡萝卜汁10％；(2)酶促进剂10％，其中吐温80 5％、红曲粉5％；(3)复合酶4％；(4)辅料24％，其中柠檬酸20％、琼脂2％、蛋白胨2％；(5)无机盐7％，其中MgSO41％、KH2PO41％、(NH4)2HPO42％、KCl1％、NH4NO32％；(6)蒸馏水45％；5.用于疑难杂病药物系列(1)原生质液50％，其中梨汁20％、萝卜汁10％、青菜汁10％、苦瓜汁10％；(2)酶促进剂为吐温80 5％；(3)无机盐16％，其中ZnSO48％、MgSO42％、KH2PO46％；(4)复合酶4％；(5)辅料本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种复合酶反应液，其特征在于组成成分及其含量（以组分重量之和为１００计）：复合酶２－５％、原生质液４．５－６０％、酶促进剂５－１０％、蒸馏水１０－７０％、含微量元素的无机盐０．５－１６％、辅料３－２４％，所述的复合酶为纤维素酶、果胶 酶、葡萄糖异构酶、淀粉酶、脂肪酶以２∶２∶３∶３∶３重量比的混合酶，所述的原生质液包括玉米浆、玉米粉、胡萝卜汁、蛋清、苹果汁、大豆粉、梨汁、萝卜汁、青菜汁、苦瓜汁、豆油、牛乳、麦芽汁、白菜汁、莲子汁、豆芽汁在内的一种、两种或两种以上的混 合物，所述的酶促进剂包括酵母膏、吐温８０、红曲粉在内的一种、两种或两种以上的混合物，所述的无机盐包括ＫＨｚＰＯ↓［４］、（ＮＨ↓［４］）↓［ｚ］ＨＰＯ↓［４］、ＫＮＯ↓［３］、ＭｇＳＯ↓［４］、Ｎａ↓［２］ＳＯ↓［４］、ＺｎＳＯ↓［ ４］、ＣａＣＬ↓［２］、（ＮＨ↓［４］）↓［２］ＳＯ↓［４］、（ＮＨ↓［４］）↓［２］ＮＯ↓［３］、ＫＣｌ、ＦｅＳＯ↓［４］在内的一种、两种或两种以上的混合物，所述的辅料包括蛋白胨、蛋白粉、甘油、酵母膏、葡萄糖、蜂王浆、琼脂、乳酸、白糖 、红糖在内的一种、两种或两种以上的混合物。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：林陆山，汪奋生，
申请(专利权)人：郑振标，郑东，
类型：发明
国别省市：35[中国|福建]