低值陈米作为丝孢类真菌孢子粉主要原料的固相发酵方法技术

本发明专利技术公开了一种低值陈米作为丝孢类真菌孢子粉主要原料的固相发酵方法。它的步骤如下：将粮库中库存较久的低值陈米浸泡后，经蒸汽灭菌和熟化至５～６成熟，冷却后，按重量体积百分比为：１０－２０％的液相发酵的菌丝液，加入添加剂，或者直接用上一轮生产的孢子粉配成孢子悬浮液体，加入添加剂，与适度熟化的大米混合接种；然后，将上述混合料装入透明或半透明塑料发酵箱的内箱后加盖，或者摊于平底盘中覆以保鲜膜保湿及防止杂菌污染，上架培养；再将上述发酵料加温烘干或风干、过筛即可。本发明专利技术的优点：１）创新性强；２）工艺流程简化、杂菌污染杜绝、生产周期缩短并可控；３）孢子粉纯度高、生产过程无废水废气产生；３）投资省、管理方便；４）原料易得：５）效益高、成本低。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种。
技术介绍
研究开发以有效侵染体为活性成份的微生物制剂控制作物害虫，杀虫真菌是可资利用的重要资源，因为只有真菌能够在自然条件下通过体壁接触感染并杀死害虫，不仅对刺吸式口器害虫有效，而且对咀嚼式口器害虫也有效。目前已知的丝孢类杀虫真菌(Entomopathogenic hyphomycetes)有数十种，但国内外重点研究和开发应用的菌种主要集中在白僵菌、绿僵菌及拟青霉等少数种类。根据现有研究报道，杀虫真菌的分生孢子(有效侵染体)可通过各种方式附着到虫体表面，在适宜条件下萌发并产生芽管，穿透寄主体壁进入血腔，继而利用寄主的营养在血腔中繁殖，当血腔中充满菌丝体时寄主死亡变僵，若遇适合的环境条件菌丝便从体壁长出分生孢子梗并产生分生孢子，开始新的侵染。以此种方式产生的分生孢子是气生性的，称为气生分生孢子，对昆虫寄主而言是最有效的自然侵染体。在真菌杀虫剂的研究开发中，气生分生孢子粉是配制孢子油剂、孢子乳悬剂及孢子可湿性粉剂等各类孢子制剂的有效成份，其纯度和质量直接关系到孢子制剂的质量、寿命及田间应用效果。气生分生孢子的工业生产一般采用两相发酵原理，即液相发酵生产菌丝液，再转入固体基质上发酵(即固相发酵)生产孢子。将孢子从固体发酵基质上分离并以适当方式收集起来，便获得孢子粉。基于两相发酵生产气生分生孢子粉的一般原理，国内外已经开发出了一系列专利或非专利生产工艺技术，经查新检索，主要包括以下专利技术1)中国专利技术专利CN1014427B(公开日87-10-07)公开了一种白僵菌的固体培养方法。该方法除了培养原料中有部分麦麸或者细米糠或者面粉以外，其特点是在培养原料中以土为主并加少量尿素和钙镁磷肥，其中土的比例为50～85％，未涉及以大米作为基质的固相发酵，亦未见描述孢子粉的收获技术和产品的孢子含量及纯度。2)中国专利技术专利CN1149394A(公开日97-05-14)公开了一种用糖厂废料液相发酵生产淡紫拟青霉菌丝制剂防治作物线虫病的方法，未涉及固相发酵和气生分生孢子。3)中国专利技术专利CN1149393A(公开日97-05-14)公开了一种用啤酒厂废料生产淡紫拟青霉菌丝制剂防治作物线虫病的方法，未涉及利用大米的固相发酵和气生分生孢子。4)中国专利技术专利CN1127592A，(公开日96-07-31)公开了一种通过液相发相生产毒力虫霉(非丝孢类真菌)作为灭蚜制剂的工艺，未涉及固相发酵和气生分生孢子。5)中国专利技术专利CN1138096A，(公开日96-12-18)公开了一种用于防治大豆胞囊线虫病的淡紫拟青霉的液体发酵制剂，未涉及固相发酵和气生分生孢子。6)中国专利技术专利CN1093524A(公开日94-10-19)公开了一种聚合凝胶生物菌杀虫剂的制备工艺，未涉及固相发酵和气生分生孢子。7)中国专利技术专利CN1225236A(公开日99-08-11)公开了一种从自然土壤中分离出来的厚垣轮枝菌为主效成份、用于生物防治植物寄生线虫病害的颗粒状制剂及其生产过程，产品每克含厚垣孢子500～5000个，未涉及气生分生孢子。8)美国专利USP5968808(公开日99-10-19)公开了一种高效生产大批耐干旱真菌孢子(如玫烟色拟青霉)的技术和一种富氮、富碳的液体培养基，未涉及固相发酵和气生分生孢子。9)美国专利USP4925663(公开日90-05-15)公开了一种防治火蚁的含白僵菌农用组合物制剂。公开的白僵菌生产方法是将大米盛入塑料袋(750克/袋)灭菌，然后接种并在控温(25～27℃)控湿(70％RH)控光(日照16小时)的培养室中培养2～3天，再转入托盘发酵12～15天，共发酵14～18天；大米发酵产物缓慢碾碎后备用。该方法制作的产品是碾碎米粒与孢子、菌丝的混合物，与高纯度孢子粉无关，未涉及专用的固体发酵箱和气生分生孢子的收获。10)美国专利USP5413784(公开日95-05-09)公开了一种防治棉铃象鼻虫、甘薯粉虱、棉盲蝽的生物杀虫剂配方，由昆虫病原真菌如球孢白僵菌ATCC-74040、昆虫引诱剂和取食刺激物等组成，未涉及发酵工艺。11)美国专利USP5579562(公开日98-06-02)公开了一种以液体发酵生产的芽生孢子为基础的颗粒状真菌杀虫剂的配方及制备工艺，真菌可以是白僵菌、轮枝菌、绿僵菌、拟青霉等，未涉及固相发酵和气生分生孢子。12)美国专利USP5888989(公开日99-05-30)公开了有关Silafuofen的杀昆虫及螨类的组合配方，含至少一种昆虫病原真菌，可以是轮枝菌、绿僵菌、白僵菌或拟青霉，未涉及发酵工艺。13)美国专利USP6261553(公开日01-07-21)公开了一种基于两相发酵法生产白僵菌孢子粉用于蝗虫防治的方法。其固相发酵采用了大麦片(barley flakes)作为产孢基质，但未涉及使用大米作为固相发酵基质。14)美国专利USP5418164(公开日95-05-23)公开了一种有可能用于害虫防治的无载体微生物细胞颗粒的制作方法，未涉及固相发酵和气生分生孢子。15)美国专利USP5804208(公开日98-09-08)公开了一种由粗麦粉为载体吸附金龟子绿僵菌孢子粉而制作微生物颗粒剂用于害虫防治的方法，未涉及以大米作为基质的固相发酵和气生分生孢子。16)美国专利USP4942030(公开日90-07-17)公开了一株可用防治粉虱的高毒力玫烟色拟青霉菌株ATCC20874，未涉及发酵工艺。17)美国专利USP5360607(公开日94-11-01)公开了一种以玫烟色拟青霉菌株ATCC20874为基础的新型真菌杀虫剂的配方及使用方法，未涉及发酵工艺。18)美国专利USP5730973(公开日98-03-24)公开了一种水分散的球孢白僵菌孢子颗粒剂的配方和制作方法，未涉及发酵工艺。19)美国专利USP5512280(公开日96-04-30)公开了一种绿僵菌、白僵菌等杀虫真菌分生孢子的单分散水悬液的配方及长期贮存方法，关键在于所用高浓度表面活性剂与真菌孢子完全相容，未涉及发酵工艺。20)世界专利WO9525430(公开日95-09-28)公布了一种防治蟑螂、木工蚁和小家蚁的高致病力球孢白僵菌分离菌株的组合配方及独特制剂方法，该配方幅花生或玉米粉、硅藻土或硅土及孢子粉组成，未涉及发酵工艺。21)欧洲专利EP0570089(公开日93-11-18)公开了一种以白僵菌菌株ATCC74037为基础的菌剂配方及液相发酵用培养基配方，未涉及以大米作为基质的固相发酵和气生分生孢子。23)欧洲专利EP0406103(公开日91-01-02)公开了一种白僵菌与高岭土混合制备真菌杀虫剂粉剂的方法，未涉及用大米固相发酵的技术。24)世界专利WO9309672(公开日93-05-27)公开了一种利用金龟子绿僵菌防治白蚁的孢子制剂及其应用技术，未涉及发酵工艺。25)日本专利JP2000083471(公开日00-03-28)公开了一种用锯木粉、米糠、蝶蛹和水的混合基质培养拟青霉的方法，未涉及以大米为基质的固相发酵技术。26)俄罗斯专利RU2120756(公开日98-10-27)公开了一个蜡蚧轮枝菌菌株F-8的杀螨活性及其实验室琼脂平板培养方法，未涉及以大米作为基质的固相发酵和气生分生孢子。27)日本专本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种低值陈米作为丝孢类真菌孢子粉主要原料的固相发酵方法，其特征在于，它的步骤如下１）将粮库中库存较久的低值陈米浸泡后，经蒸汽灭菌和熟化至５～６成熟，冷却后，按重量体积百分比为：１０－２０％的液相发酵的菌丝液，加入添加剂，或者直接用上一轮 生产的孢子粉配成孢子悬浮液体，加入添加剂，与适度熟化的大米混合接种；２）然后，将上述混合料装入透明或半透明塑料发酵箱的内箱后加盖，或者摊于平底盘中覆以保鲜膜保湿及防止杂菌污染，在２０－３０℃的温度下上架培养６～７天；３）再将上述发酵 料在３０－３５℃下加温烘干或风干１２－２４小时后，采用过１００～２００目机械振动筛的方法过筛，即可。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：冯明光，张丽靖，应盛华，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]