一种新型扣囊复膜酵母的发酵生产方法技术

本发明专利技术公开了一种扣囊复膜酵母的发酵方法，包括如下步骤：（1）液体种子培养基制备：通过培养基优化实验，得出培养反硝化细菌的最优的液体种子培养基；（2）种子制备：先进行常规的菌种筛选及活化，再在液体种子培养基中培养得到处于对数期的液体种子；（3）固体平板的制备：制备含液体培养基成份的固体平板培养基；（4）放大发酵：将步骤（2）中得到的液体种子喷到固体平板表面于发酵室封闭发酵培养；（5）收集菌泥；（6）菌粉制备。所述生产方法可以大批量生产扣囊复膜酵母，扣囊复膜酵母菌粉活菌数多，生产过程操作难度低，原料整体利用率高，生产成本低、生产效率高。

Fermentation production method of novel button sac coated yeast

The invention discloses a fermentation method of Saccharomycopsis fibuligera, which comprises the following steps: (1) the seed medium was prepared by medium optimization experiment, the optimal culture medium liquid seed denitrifying bacteria; (2) seed preparation: first conventional bacteria screening and activation. To get training in liquid medium in the logarithmic phase of seed liquid seed; (3) solid plate preparation: solid plate preparation containing liquid medium composition medium; (4) amplifying the step (2) fermentation liquid spraying seed obtained in the solid surface to body plate in the fermentation chamber closed fermentation; (5) collecting bacteria mud; (6) bacterial powder preparation. The production method can be used for large quantity production of button bladder and laminating yeast, and has the advantages of multiple bags, yeast powder and live bacteria, and the production process has the advantages of low operation difficulty, high utilization ratio of raw materials, low production cost and high production efficiency.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物发酵
，具体的，本专利技术涉及一种新型扣囊复膜酵母的发酵生产方法。
技术介绍
工业生物技术克服了传统的化学加工方式所造成的能源和环境危机，正日益引起人们的重视。淀粉是工业生物技术的主要原料，其来源丰富、价格低廉，是可再生的天然资源。扣囊复膜酵母(Saccharomycopsisfibuligera)，又称扣囊拟内孢霉(Endomycopsisfibuligera)，能够表达生淀粉液化酶和糖化酶，被认为是产生淀粉分解酶类的最好的子囊酵母菌之一，利用扣囊复膜酵母进行生物发酵，可直接将淀粉加工成人们所需要的各种产品而无需液化、糖化，可节约能源、降低成本，对于淀粉的加工具有重要意义，且扣囊复膜酵母较传统的酿酒酵母来说，具有更丰富的次生代谢。然而，关于扣囊复膜孢酵母菌的研究大多只在在酿酒工业的辅助优化上，并无针对其大规模生产方面的研究，随着扣囊复膜酵母生理特性研究的深入化，扣囊复膜酵母的作用逐渐被人们知道，扣囊复膜酵母的需求量越来越大，因此需寻求一种可批量化进行扣囊复膜酵母的发酵的生产方法。
技术实现思路
基于此，本专利技术在于克服现有技术的缺陷，提供一种新型扣囊复膜酵母的发酵生产方法，所述生产方法可以大批量生产扣囊复膜酵母，扣囊复膜酵母菌粉活菌数多，生产过程操作难度低，原料整体利用率高，生产成本低、生产效率高。本专利技术的另一目的在于提供所述扣囊复膜酵母的发酵生产方法制备的菌粉，所述菌粉便于储藏，可在淀粉加工时直接添加使用。其技术方案如下：一种扣囊复膜酵母的发酵方法，包括如下步骤：（1）液体种子培养基制备：通过培养基优化实验，得出培养反硝化细菌的最优的液体种子培养基，培养基配比为：酵母膏8～12g，细菌学蛋白胨18～22g，麦芽粉18～22g，可溶性淀粉18～22g，水1L；（2）种子制备：先进行常规的菌种筛选及活化，然后接种于优化后的液体种子培养基中，在培养箱中培养36～48h，得到处于对数期的液体种子；（3）固体平板的制备：在每1L扣囊复膜酵母液体种子培养基中，加入18～32g琼脂，灭菌后倒入平板中，冷却后即可制成含液体培养基成份的固体平板培养基；（4）放大发酵：将步骤（2）中得到的液体种子均匀喷在固体平板培养基表面，然后放置于35℃恒温发酵室内封闭发酵培养，培养24～36小时；（5）收集菌泥：发酵结束后，将平板取出发酵室，然后用灭菌后的薄片，将平板培养基上的菌泥刮下来，收集，得到超高浓度菌泥；（6）菌粉制备：将超高浓度菌泥制成菌粉。本专利技术先通过培养基优化实验确定出最优的液体种子培养基，菌种经筛选及活化后在液体种子培养基中培养得到对数期液体种子，再使对数期液体种子在固体平板培养基上放大发酵，收集到超高浓度菌泥并制成菌粉。相比于液态发酵工艺，本专利技术所述发酵方法无需对菌液浓缩干燥，减少了菌液浓缩干燥导致的活菌失活。本专利技术所述发酵方法生产过程操作难度低，原料整体利用率高，产生的废物废水少，扣囊复膜酵母菌粉活菌数多、生产成本低、生产效率高。在其中一个实施例中，所述培养基配比为：酵母膏10g，细菌学蛋白胨20g，麦芽粉20g，可溶性淀粉20g，水1L。在其中一个实施例中，所述超高浓度菌泥的菌密度不低于1.0×1013cfu/g。在其中一个实施例中，所述菌粉制备为：将超高浓度菌泥与无菌水混合，得到高浓度扣囊复膜酵母菌液，添加二氧化硅，进行吸附干燥，过60目筛，将筛上物进行粉碎后再次过60目筛，得到菌粉。在其中一个实施例中，所述菌粉制备为：将超高浓度菌泥直接与牛奶混合后辅以保护剂，经喷雾干燥或冷冻干燥制成菌粉。在其中一个实施例中，所述保护剂为甘油和/或蔗糖。所述扣囊复膜酵母的发酵方法制备得到的扣囊复膜酵母菌粉。在其中一个实施例中，所述菌粉活菌数不低于4.0×1012cfu/g。本专利技术还提供了所述扣囊复膜酵母菌粉在淀粉加工中的应用。将所述扣囊复膜酵母菌粉添加到淀粉中时，扣囊复膜酵母菌粉能够表达生淀粉液化酶和糖化酶，可使淀粉无需液化、糖化即可直接加工成所需产品。本专利技术的有益效果在于：本专利技术公开了一种新型的扣囊复膜酵母发酵方法，先通过培养基优化实验确定出最优的液体种子培养基，菌种经筛选及活化后在液体种子培养基中培养得到对数期液体种子，再使对数期液体种子在固体平板培养基中放大发酵，收集到超高浓度菌泥并制成菌粉，所述发酵方法生产过程操作难度低，原料整体利用率高，生产效率高，产生的废物废水少，菌粉活菌数多。具体实施方式为使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施方式，对本专利技术进行进一步的详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用以解释本专利技术，并不限定本专利技术的保护范围。实施例1（1）液体种子培养基制备：通过培养基优化实验，得出培养反硝化细菌的最优的液体种子培养基，培养基配比为：酵母膏10g，细菌学蛋白胨20g，麦芽粉20g，可溶性淀粉20g，水1L；（2）种子制备：先进行常规的菌种筛选及活化，然后接种于优化后的液体种子培养基中，在培养箱中培养40h，得到处于对数期的液体种子；（3）固体平板的制备：在每1L扣囊复膜酵母液体种子培养基中，加入24g琼脂，灭菌后倒入平板中，冷却后即可制成含液体培养基成份的固体平板培养基；（4）放大发酵：将步骤（2）中得到的液体种子均匀喷在固体平板培养基表面，然后放置于35℃恒温发酵室内封闭发酵培养，培养30小时；（5）收集菌泥：发酵结束后，将平板取出发酵室，然后用灭菌后的薄片，将平板培养基上的菌泥刮下来，收集，得到超高浓度菌泥；（6）菌粉制备：将超高浓度菌泥与无菌水混合，得到高浓度扣囊复膜酵母菌液，添加二氧化硅，进行吸附干燥，过60目筛，将筛上物进行粉碎后再次过60目筛，制成1500g菌粉。实施例2（1）液体种子培养基制备：通过培养基优化实验，得出培养反硝化细菌的最优的液体种子培养基，培养基配比为：酵母膏8g，细菌学蛋白胨22g，麦芽粉22g，可溶性淀粉18g，水1L；（2）种子制备：先进行常规的菌种筛选及活化，然后接种于优化后的液体种子培养基中，在培养箱中培养36h，得到处于对数期的液体种子；（3）固体平板的制备：在每1L扣囊复膜酵母液体种子培养基中，加入18g琼脂，灭菌后倒入平板中，冷却后即可制成含液体培养基成份的固体平板培养基；（4）放大发酵：将步骤（2）中得到的液体种子均匀喷在固体平板培养基表面，然后放置于35℃恒温发酵室内封闭发酵培养，培养36小时；（5）收集菌泥：发酵结束后，将平板取出发酵室，然后用灭菌后的薄片，将平板培养基上的菌泥刮下来，收集，得到超高浓度菌泥；（6）菌粉制备：将超高浓度菌泥与无菌水混合，得到高浓度扣囊复膜酵母菌液，添加二氧化硅，进行吸附干燥，过60目筛，将筛上物进行粉碎后再次过60目筛，制成1500g菌粉。实施例3（1）液体种子培养基制备：通过培养基优化实验，得出培养反硝化细菌的最优的液体种子培养基，培养基配比为：酵母膏12g，细菌学蛋白胨18g，麦芽粉18g，可溶性淀粉22g，水1L；（2）种子制备：先进行常规的菌种筛选及活化，然后接种于优化后的液体种子培养基中，在培养箱中培养48h，得到处于对数期的液体种子；（3）固体平板的制备：在每1L扣囊复膜酵母液体种子培养基中，加入32g琼脂，灭菌后倒入平板中，冷却后即可制成本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种扣囊复膜酵母的发酵方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）液体种子培养基制备：通过培养基优化实验，得出培养反硝化细菌的最优的液体种子培养基，培养基配比为：酵母膏8～12g，细菌学蛋白胨18～22g，麦芽粉18～22g，可溶性淀粉18～22g，水1L；（2）种子制备：先进行常规的菌种筛选及活化，然后接种于优化后的液体种子培养基中，在培养箱中培养36～48h，得到处于对数期的液体种子；（3）固体平板的制备：在每1L扣囊复膜酵母液体种子培养基中，加入18～32g琼脂，灭菌后倒入平板中，冷却后即可制成含液体培养基成份的固体平板培养基；（4）放大发酵：将步骤（2）中得到的液体种子均匀喷在固体平板培养基表面，然后放置于35℃恒温发酵室内封闭发酵培养，培养24～36小时；（5）收集菌泥：发酵结束后，将平板取出发酵室，然后用灭菌后的薄片，将平板培养基上的菌泥刮下来，收集，得到超高浓度菌泥；（6）菌粉制备：将超高浓度菌泥制成菌粉。

【技术特征摘要】
1.一种扣囊复膜酵母的发酵方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）液体种子培养基制备：通过培养基优化实验，得出培养反硝化细菌的最优的液体种子培养基，培养基配比为：酵母膏8～12g，细菌学蛋白胨18～22g，麦芽粉18～22g，可溶性淀粉18～22g，水1L；（2）种子制备：先进行常规的菌种筛选及活化，然后接种于优化后的液体种子培养基中，在培养箱中培养36～48h，得到处于对数期的液体种子；（3）固体平板的制备：在每1L扣囊复膜酵母液体种子培养基中，加入18～32g琼脂，灭菌后倒入平板中，冷却后即可制成含液体培养基成份的固体平板培养基；（4）放大发酵：将步骤（2）中得到的液体种子均匀喷在固体平板培养基表面，然后放置于35℃恒温发酵室内封闭发酵培养，培养24～36小时；（5）收集菌泥：发酵结束后，将平板取出发酵室，然后用灭菌后的薄片，将平板培养基上的菌泥刮下来，收集，得到超高浓...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱爱军，张子曦，洪嘉琦，陈秋雄，
申请(专利权)人：广东瑞丰生态环境科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44