本发明专利技术属于组培生产技术领域，具体涉及一种甜叶菊组培方法，包括以下步骤，1）抑菌液的配制，2）外植体的获取，3）培养基方瓶和外植体的消毒，4）外植体分化芽，5）芽生根成苗。本发明专利技术提供的甜叶菊组织培养方法，取材容易，可以迅速扩繁出大量种源，能降低繁殖的成本，生长周期短、繁殖率高、方便管理、有利于工业化生产和自动化监控，大大的节约了人力、物力和田间作物的土地。
Tissue culture method for Stevia
The invention belongs to the technical field of production of tissue culture, in particular to a Stevia tissue culture method comprises the following steps: 1) the preparation of antimicrobial liquid, 2) acquisition of explants, culture medium 3) disinfection square bottle and explants, 4) explants buds, rooting and seedling bud 5). Stevia tissue culture method, the invention provides easy, rapid propagation can a lot of provenance, can reduce the costs of reproduction, short growth period, high reproduction rate, convenient management, is conducive to industrial production and automation, greatly saves manpower, material resources and crop land.
【技术实现步骤摘要】
一种甜叶菊组培方法
本专利技术属于组培生产
，具体涉及一种甜叶菊组培方法。
技术介绍
甜叶菊，是原产于南美洲巴拉圭的菊科甜叶菊属多年生草本植物，由于甜叶菊所含的甜菊糖苷有制血糖、降低血压、促进新陈代谢以及治疗糖尿病、肥胖症、调节胃酸、恢复神经疲劳的功效，并且物理、化学性质稳定，无发酵性特点，其制品有比较长的保质期，特别适合作为糖尿病、高血压等病患者食品的甜味剂、保健品添加剂等，具有广阔的市场前景和应用范围。自我国于20世纪70年代年引种甜叶菊并成功扩大种植以来，已经有30余年的历史，但由于甜菊的繁育特性，传统的繁殖方式包括种子、扦插方式。但是用种子繁育的方法，成活率低；而扦插繁殖导致品质退化，并且这两种繁育方式时间长、需要大量以茎尖、带腋芽的茎段、种子等材料。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种甜叶菊组培方法，能降低繁殖的成本，生长周期短、繁殖率高、方便管理、有利于工业化生产和自动化监控，大大的节约了人力、物力和田间作物的土地。本专利技术提供了如下的技术方案：一种甜叶菊组培方法，包括以下步骤，1）抑菌液的配制，将福美锌400-600倍液与10%的维生素C水溶液混合，所述福美锌溶液400-600倍液与10%维生素C水溶液的体积比为2：1，得到抑菌液A；配制0.2%的HgCl2溶液，得到抑菌液B；2）外植体的获取，取甜叶菊顶端未老熟的叶片，使用解刨刀沿着甜叶菊叶片的茎干位置横切出长15-20mm，宽10-15mm的叶片条；3）培养基方瓶和外植体的消毒，将培养基方瓶放入所述抑菌液B中浸泡20-30分钟，用无菌水冲洗2-4次，每次3-5分钟，将所述叶片条放入抑菌液A中浸泡10-20分钟，用无菌水洗净，然后放入抑菌液B中浸泡20-30分钟，用无菌水洗净；4）外植体分化芽，将外植体接种到装有芽诱导培养基的培养基方瓶中，在28-30℃下，光暗培养15-20天，外植体分化出芽，所述芽诱导培养基为MS+萘乙酸0.1-0.3mg/L+6-苄基嘌呤0.4-1.0mg/L+琼脂8-10g/L；5）芽生根成苗，当步骤4）中的芽长至3-5cm，将其相互分开成单株，并转接至装有生根培养基的培养基方瓶中，在28-30℃下，光暗培养20-25天，长出多条根并出现白色根毛，所述生根培养基为1/2MS+吲哚乙酸0.1-0.2mg/L+萘乙酸0.1-0.2mg/L+琼脂5-7g/L+硫酸亚铁0.5-1.5mg/L；优选的，所述步骤3）中培养基方瓶的规格为500ml。优选的，所述步骤4）中光培养的光照强度为1300勒克斯，步骤5）中光培养的光照强度为1800勒克斯。本专利技术提供的甜叶菊组织培养方法，取材容易，可以迅速扩繁出大量种源，能降低繁殖的成本，生长周期短、繁殖率高、方便管理、有利于工业化生产和自动化监控，大大的节约了人力、物力和田间作物的土地。具体实施方式实施例1一种甜叶菊组培方法，包括以下步骤，1）抑菌液的配制，将福美锌400倍液与10%的维生素C水溶液混合，所述福美锌溶液400倍液与10%维生素C水溶液的体积比为2：1，得到抑菌液A；配制0.2%的HgCl2溶液，得到抑菌液B；2）外植体的获取，取甜叶菊顶端未老熟的叶片，使用解刨刀沿着甜叶菊叶片的茎干位置横切出长15mm，宽10mm的叶片条；3）培养基方瓶和外植体的消毒，将培养基方瓶放入所述抑菌液B中浸泡20分钟，用无菌水冲洗2次，每次3分钟，将所述叶片条放入抑菌液A中浸泡10-分钟，用无菌水洗净，然后放入抑菌液B中浸泡20分钟，用无菌水洗净；4）外植体分化芽，将外植体接种到装有芽诱导培养基的培养基方瓶中，在28℃下，光暗培养15天，外植体分化出芽，所述芽诱导培养基为MS+萘乙酸0.1mg/L+6-苄基嘌呤0.4mg/L+琼脂8g/L；5）芽生根成苗，当步骤4）中的芽长至3cm，将其相互分开成单株，并转接至装有生根培养基的培养基方瓶中，在28℃下，光暗培养20天，长出多条根并出现白色根毛，所述生根培养基为1/2MS+吲哚乙酸0.1mg/L+萘乙酸0.1mg/L+琼脂5g/L+硫酸亚铁0.5mg/L；所述步骤3）中培养基方瓶的规格为500ml。所述步骤4）中光培养的光照强度为1300勒克斯，步骤5）中光培养的光照强度为1800勒克斯。实施例2一种甜叶菊组培方法，包括以下步骤，1）抑菌液的配制，将福美锌500倍液与10%的维生素C水溶液混合，所述福美锌溶液500倍液与10%维生素C水溶液的体积比为2：1，得到抑菌液A；配制0.2%的HgCl2溶液，得到抑菌液B；2）外植体的获取，取甜叶菊顶端未老熟的叶片，使用解刨刀沿着甜叶菊叶片的茎干位置横切出长18mm，宽13mm的叶片条；3）培养基方瓶和外植体的消毒，将培养基方瓶放入所述抑菌液B中浸泡25分钟，用无菌水冲洗3次，每次4分钟，将所述叶片条放入抑菌液A中浸泡15分钟，用无菌水洗净，然后放入抑菌液B中浸泡25分钟，用无菌水洗净；4）外植体分化芽，将外植体接种到装有芽诱导培养基的培养基方瓶中，在29℃下，光暗培养18天，外植体分化出芽，所述芽诱导培养基为MS+萘乙酸0.2mg/L+6-苄基嘌呤0.7mg/L+琼脂9g/L；5）芽生根成苗，当步骤4）中的芽长至4cm，将其相互分开成单株，并转接至装有生根培养基的培养基方瓶中，在29℃下，光暗培养23天，长出多条根并出现白色根毛，所述生根培养基为1/2MS+吲哚乙酸0.15mg/L+萘乙酸0.15mg/L+琼脂6g/L+硫酸亚铁1.0mg/L；所述步骤3）中培养基方瓶的规格为500ml。所述步骤4）中光培养的光照强度为1300勒克斯，步骤5）中光培养的光照强度为1800勒克斯。实施例3一种甜叶菊组培方法，包括以下步骤，1）抑菌液的配制，将福美锌600倍液与10%的维生素C水溶液混合，所述福美锌溶液600倍液与10%维生素C水溶液的体积比为2：1，得到抑菌液A；配制0.2%的HgCl2溶液，得到抑菌液B；2）外植体的获取，取甜叶菊顶端未老熟的叶片，使用解刨刀沿着甜叶菊叶片的茎干位置横切出长20mm，宽15mm的叶片条；3）培养基方瓶和外植体的消毒，将培养基方瓶放入所述抑菌液B中浸泡30分钟，用无菌水冲洗4次，每次5分钟，将所述叶片条放入抑菌液A中浸泡20分钟，用无菌水洗净，然后放入抑菌液B中浸泡30分钟，用无菌水洗净；4）外植体分化芽，将外植体接种到装有芽诱导培养基的培养基方瓶中，在30℃下，光暗培养20天，外植体分化出芽，所述芽诱导培养基为MS+萘乙酸0.3mg/L+6-苄基嘌呤1.0mg/L+琼脂10g/L；5）芽生根成苗，当步骤4）中的芽长至5cm，将其相互分开成单株，并转接至装有生根培养基的培养基方瓶中，在30℃下，光暗培养25天，长出多条根并出现白色根毛，所述生根培养基为1/2MS+吲哚乙酸0.2mg/L+萘乙酸0.2mg/L+琼脂7g/L+硫酸亚铁1.5mg/L；所述步骤3）中培养基方瓶的规格为500ml。所述步骤4）中光培养的光照强度为1300勒克斯，步骤5）中光培养的光照强度为1800勒克斯。以上所述仅为本专利技术的优选实施例而已，并不用于限制本专利技术，尽管参照前述实施例对本专利技术进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种甜叶菊组培方法，其特征在于，包括以下步骤，1）抑菌液的配制，将福美锌400‑600倍液与10%的维生素C水溶液混合，所述福美锌溶液400‑600倍液与10%维生素C水溶液的体积比为2：1，得到抑菌液A；配制0.2%的HgCl
【技术特征摘要】
1.一种甜叶菊组培方法，其特征在于，包括以下步骤，1）抑菌液的配制，将福美锌400-600倍液与10%的维生素C水溶液混合，所述福美锌溶液400-600倍液与10%维生素C水溶液的体积比为2：1，得到抑菌液A；配制0.2%的HgCl2溶液，得到抑菌液B；2）外植体的获取，取甜叶菊顶端未老熟的叶片，使用解刨刀沿着甜叶菊叶片的茎干位置横切出长15-20mm，宽10-15mm的叶片条；3）培养基方瓶和外植体的消毒，将培养基方瓶放入所述抑菌液B中浸泡20-30分钟，用无菌水冲洗2-4次，每次3-5分钟，将所述叶片条放入抑菌液A中浸泡10-20分钟，用无菌水洗净，然后放入抑菌液B中浸泡20-30分钟，用无菌水洗净；4）外植体分化芽，将外植体接种到装有芽诱导培养基的培养基方瓶中，在28-30℃下，光暗培...
【专利技术属性】
技术研发人员：贾德军，
申请(专利权)人：明光市大全甜叶菊专业合作社，
类型：发明
国别省市：安徽,34
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