一种基于油脂废渣的灰树花培养基以及灰树花液体菌种制备方法技术

技术编号:14114144 阅读:132 留言:0更新日期:2016-12-07 12:11
本发明专利技术公开了一种基于油脂废渣的灰树花培养基,包括以下重量份组分:油脂废渣、石灰、海藻酸、啤酒酵母粉、纳米级电气石粉、细菌纳米纤维素5等。本发明专利技术采用主料油脂废渣、石灰、啤酒酵母粉等作为培养基制备灰树花液体菌种,材料来源广泛,实现了油脂废渣在灰树花液体菌种培养的利用了推广,针对油脂废渣溶解性差的不足,通过石灰以及海藻酸对油脂废渣表面进行了接枝改性,增加了液体培养基的稳定性;同时,培养基中加入了纳米细菌纤维素,为灰树花提供营养原料的同时,也改善了液体培养基的稳定性、均匀性,为灰树花液体菌种菌丝球的生长发育提供了良好的空间,本发明专利技术制备的灰树花液体菌种的菌丝球分布均匀,大小稳定,质量好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及液体菌种
,尤其涉及一种基于油脂废渣的灰树花培养基以及灰树花液体菌种制备方法
技术介绍
灰树花生产过程中,液体菌种具有固体菌种所不可比拟的优势,液体菌种具有生产周期短,菌龄短而一致,纯度高、活力强,接种简便快捷,易实行工厂化、规模化、标准化生产等优点。现在,越来越多的人都在研究和使用液体菌种,而液体菌种的推广和使用也是实现食用菌工厂化、规模化、标准化的必然趋势。但是液体菌种也存在着自身的缺陷和不足:1、液体菌种萌发点多生长速度快,但是穿透力不强,培养料过粗菌丝不易吃透培养料,菌丝将沿着培养料表面快速生长,培养料内部菌丝量很少,严重影响了菌种产量和质量的问题;2、常规的液体菌种虽然解决了固体菌种存在的一些问题,能明显缩短栽培周期、增强菌种活力和抗逆性、降低菌种污染率、使得菌种质量整齐度提高,但仍存在例如发酵得到的液体菌种中菌球的密度、大小、均匀度等物理特性不是很理想等不足,如果用搅拌剪切的方法将菌球打碎,得到的菌种均匀度会更理想,但是,高速搅拌粉碎和打浆的剪切力对菌种伤害极大,对菌种整体的质量影响较为严重。开发分布均匀且具有更小粒径菌丝球的高质量的液体菌种具有重要意义。公开号CN105309194A《食用菌微粒液体菌种生产新技术》提供了一种菌丝球粒径在0.5㎜的食用菌微粒液体菌种,采用的增加食用菌液体菌种培养液通气量,使通气量在1:0.6—0.9V/V•min为适宜,同时在通气发酵罐内装置搅拌器使培养液涡流运动延长气泡的运动路线的技术操作方法,该生产微粒液体菌种的方法是从生产工艺上进行改进,并没有液体菌种培养基方面进行改进,实施起来技术难度要求高;公开号CN105130516A《分子级生物培养基制作方法》提到了分子级生物培养基营养成分可以快速全面的被吸收,促进液体菌种的生长,但是并没有提到分子级生物培养基对液体菌种菌丝球直径大小的影响。发展一种基于液体菌种培养基原材料成分改进液体菌种菌丝球直径改善食用菌菌种产量和质量的技术,具有重要的意义。细菌纳米纤维素是自然界的丰富的可再生产物之一,细菌纳米纤维素是纤维素的物理最小结构单元,是指直径1-100nm之间的纤维,细菌纳米纤维素质轻,生物相容性好,可降解、可再生,反应活性高,且具有杨氏模量高,聚合度高,洁净度高,强度高,比表面积大等优势。将细菌纳米纤维素作作为食用菌液体菌种培养基原材料,对食用菌液体菌种的菌丝球分布以及直径具有一定的影响,进而起到改善食用菌菌种质量的作用。
技术实现思路
本专利技术目的就是为了弥补已有技术的缺陷,提供一种基于油脂废渣的灰树花培养基以及灰树花液体菌种制备方法。本专利技术是通过以下技术方案实现的:一种基于油脂废渣的灰树花培养基,包括以下重量份组分:油脂废渣23-25、石灰3-4、海藻酸5-6、啤酒酵母粉19-20、蛋白胨9-10、葡萄糖11-12、枸橼酸镁2-2.2、丙酮酸钠1.2-1.3、亚硒酸钾1.1-1.2、柠檬酸三铵1.3-1.4、维生素B10.3-0.4、吲哚乙酸0.2-0.3、干酪素0.3-0.4、反丁烯二酸0.3-0.4、七水硫酸镁1.1-1.2、石膏0.7-0.8、磷酸二氢钾0.6-0.7、过磷酸钙0.4-0.5、纳米级电气石粉5.8-6、细菌纳米纤维素6.4-6.5、适量的水。一种采用上述的培养基制备灰树花液体菌种的方法,包括以下步骤:(1)、将一半纳米级电气石粉和水按照0.1g/L混合,通电激发制备无菌水备用;将七水硫酸镁、石膏、磷酸二氢钾、过磷酸钙的总量和无菌水按1g/L混合在30℃搅拌溶解得溶液一;将蛋白胨、葡萄糖、枸橼酸镁、丙酮酸钠、亚硒酸钾、柠檬酸三铵、维生素B1、吲哚乙酸、干酪素、反丁烯二酸的总量和无菌水按20g/L混合搅拌溶解得溶液二;将油脂废渣放入超微粉碎机中粉碎处理30min,之后和石灰、海藻酸一起放入锅中加入总重量4倍的水小火文煮3h,之后冷却,再次放入超微粉碎机中超微粉碎1h,得可溶超微粉,将该可溶超微粉、啤酒酵母粉的总量和无菌水按300g/L混合搅拌,并在进行98℃进行巴氏灭菌灭酶10min,得溶液三;将另一半纳米电气石粉和细菌纳米纤维素以及总重量3-4倍的水混合搅拌均匀并采用高温蒸汽灭菌,得溶液四备用;(2)、将溶液三保持20℃、溶液二保持25℃、溶液一保持30℃,先将溶液一加入到溶液二中混合搅拌均匀得复合液,在将该复合液加入到溶液三中混合搅拌均匀得营养液,并调整pH,此后对该营养液进行通电激发处理30min得液体培养基备用;(3)、将灰树花母种在无菌环境中先接种到一半的液体培养基上进行液体发酵,发酵条件为pH5.4-5.5、接种量14%、温度27-28℃、摇床转速190r/min、培养24-25h,得灰树花液体菌种一;(4)、将剩余一半的液体培养基、溶液四无菌混合均匀,之后加入改性麦冬药渣膨化粉以及总重量2倍的无菌水,高压均质之后,通电激化配合高温再次灭菌,并放置到无菌培养瓶中,得复合培养基,将步骤(3)得到的灰树花液体菌种一按58%的接种量在无菌环境中接种到该培养瓶中,温度25-26℃,摇床转速190r/min、并鼓入无菌氧气,培养39-40h即得。本专利技术的优点是:本专利技术采用主料油脂废渣、石灰、啤酒酵母粉、葡萄糖、蛋白胨配合枸橼酸镁、丙酮酸钠、亚碲酸钾、柠檬酸三铵、维生素B1、吲哚乙酸、干酪素、反丁烯二酸等营养物质作为培养基制备灰树花液体菌种,材料来源广泛,实现了油脂废渣在灰树花液体菌种培养的利用了推广,针对油脂废渣溶解性差的不足,通过石灰以及海藻酸对油脂废渣表面进行了接枝改性,增加了液体培养基的稳定性;同时,培养基中加入了纳米细菌纤维素,为灰树花提供营养原料的同时,也改善了液体培养基的稳定性、均匀性,为灰树花液体菌种菌丝球的生长发育提供了良好的空间,克服了传统的液体液体菌种菌丝球生长时不易吃透培养料,只在培养料表面生长的缺陷和不足,本专利技术制备的灰树花液体菌种的菌丝球分布均匀,大小稳定,质量好。具体实施方式一种基于油脂废渣的灰树花培养基,包括以下重量份组分:油脂废渣23、石灰3、海藻酸5、啤酒酵母粉19、蛋白胨9、葡萄糖11、枸橼酸镁2、丙酮酸钠1.2、亚硒酸钾1.1、柠檬酸三铵1.3、维生素B10.3、吲哚乙酸0.2、干酪素0.3、反丁烯二酸0.3、七水硫酸镁1.1、石膏0.7、磷酸二氢钾0.6、过磷酸钙0.4、纳米级电气石粉5.8、细菌纳米纤维素6.4、适量的水。一种采用上述的培养基制备灰树花液体菌种的方法,包括以下步骤:(1)、将一半纳米级电气石粉和水按照0.1g/L混合,通电激发制备无菌水备用;将七水硫酸镁、石膏、磷酸二氢钾、过磷酸钙的总量和无菌水按1g/L混合在30℃搅拌溶解得溶液一;将蛋白胨、葡萄糖、枸橼酸镁、丙酮酸钠、亚硒酸钾、柠檬酸三铵、维生素B1、吲哚乙酸、干酪素、反丁烯二酸的总量和无菌水按20g/L混合搅拌溶解得溶液二;将油脂废渣放入超微粉碎机中粉碎处理30min,之后和石灰、海藻酸一起放入锅中加入总重量4倍的水小火文煮3h,之后冷却,再次放入超微粉碎机中超微粉碎1h,得可溶超微粉,将该可溶超微粉、啤酒酵母粉的总量和无菌水按300g/L混合搅拌,并在进行98℃进行巴氏灭菌灭酶10min,得溶液三;将另一半纳米电气石粉和细本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种基于油脂废渣的灰树花培养基,其特征在于,包括以下重量份组分:油脂废渣23‑25、石灰3‑4、海藻酸5‑6、啤酒酵母粉19‑20、蛋白胨9‑10、葡萄糖11‑12、枸橼酸镁2‑2.2、丙酮酸钠1.2‑1.3、亚硒酸钾1.1‑1.2、柠檬酸三铵1.3‑1.4、维生素B10.3‑0.4、吲哚乙酸0.2‑0.3、干酪素0.3‑0.4、反丁烯二酸0.3‑0.4、七水硫酸镁1.1‑1.2、石膏0.7‑0.8、磷酸二氢钾0.6‑0.7、过磷酸钙0.4‑0.5、纳米级电气石粉5.8‑6、细菌纳米纤维素6.4‑6.5、适量的水。

【技术特征摘要】
1.一种基于油脂废渣的灰树花培养基,其特征在于,包括以下重量份组分:油脂废渣23-25、石灰3-4、海藻酸5-6、啤酒酵母粉19-20、蛋白胨9-10、葡萄糖11-12、枸橼酸镁2-2.2、丙酮酸钠1.2-1.3、亚硒酸钾1.1-1.2、柠檬酸三铵1.3-1.4、维生素B10.3-0.4、吲哚乙酸0.2-0.3、干酪素0.3-0.4、反丁烯二酸0.3-0.4、七水硫酸镁1.1-1.2、石膏0.7-0.8、磷酸二氢钾0.6-0.7、过磷酸钙0.4-0.5、纳米级电气石粉5.8-6、细菌纳米纤维素6.4-6.5、适量的水。2.一种采用权利要求1所述的培养基制备灰树花液体菌种的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)、将一半纳米级电气石粉和水按照0.1g/L混合,通电激发制备无菌水备用;将七水硫酸镁、石膏、磷酸二氢钾、过磷酸钙的总量和无菌水按1g/L混合在30℃搅拌溶解得溶液一;将蛋白胨、葡萄糖、枸橼酸镁、丙酮酸钠、亚硒酸钾、柠檬酸三铵、维生素B1、吲哚乙酸、干酪素、反丁烯二酸的总量和无菌水按20g/L混合搅拌溶解得溶液二;将油脂废渣放入超微粉碎机中粉碎处理30min,之后和石灰、海藻酸一起放入锅中加入总重量4倍的水小火文煮3h,之...

【专利技术属性】
技术研发人员:储荣生
申请(专利权)人:安徽天明生态林农科技开发有限公司
类型:发明
国别省市:安徽;34

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