在昆虫害虫中下调基因表达制造技术

本发明专利技术涉及使用干扰核糖核酸(RNA)分子对昆虫害虫物种的侵扰进行的遗传控制，特别是对植物的害虫侵扰的预防和/或控制。本发明专利技术还涉及用于在供局部应用中使用的，例如呈杀虫剂形式的含有本发明专利技术的干扰RNA分子的组合物和组合。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利摘要】本专利技术涉及使用干扰核糖核酸(RNA)分子对昆虫害虫物种的侵扰进行的遗传控制，特别是对植物的害虫侵扰的预防和/或控制。本专利技术还涉及用于在供局部应用中使用的，例如呈杀虫剂形式的含有本专利技术的干扰RNA分子的组合物和组合。【专利说明】在昆虫害虫中下调基因表达专利
本专利技术总体上涉及对昆虫害虫物种的侵扰的遗传控制，特别是对植物的害虫侵扰的预防和/或控制。更具体地说，本专利技术涉及通过干扰核糖核酸(RNA)分子下调昆虫害虫物种中靶基因的表达。还提供了包含本专利技术的干扰RNA分子的组合物和组合，它们适用于局部应用，例如呈杀虫剂形式。 专利技术背景存在大量能够侵染或侵扰多种环境和宿主生物体的昆虫害虫物种。昆虫害虫包括以下昆虫目中的多个物种:半翅目(Hemiptera)(蝽类昆虫)、鞘翅目(Coleoptera)(甲虫)、蚤目(Siphonaptera)(跳蚤)、网翅目(Dichyoptera)(蟑螂和虫堂螂)、鳞翅目(Lepidoptera)(蛾和蝴蝶)、直翅目(Orthoptera)(例如蚱由孟)以及双翅目(Diptera)(苍蝇)。害虫侵扰会导致严重的损害。侵扰植物物种的昆虫害虫在农业上特别成问题，因为它们会对作物造成严重损 害并且显著降低植物产量。多种不同类型的植物都对害虫侵扰敏感，包括经济作物，如水稻、棉花、大豆、马铃薯以及玉米。传统上，通过使用化学杀虫剂来预防或控制昆虫害虫的侵扰。然而，这些化学品不总是适用于处理作物，因为它们可能对其他物种有毒并且会造成显著的环境损害。在最近几十年中，研究者已经开发出控制害虫侵扰的更环境友好的方法。举例来说，已经使用了天然地表达对昆虫害虫有毒的蛋白质的微生物，如苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)细菌。科学家还分离出编码这些杀虫蛋白的基因并使用它们来产生对昆虫害虫具有抗性的转基因作物，例如基因工程化为产生Cry家族蛋白质的玉米和棉花植物。虽然细菌毒素在控制某些类型的害虫方面一直非常成功，但是它们并非对所有的害虫物种都有效。因此，研究者们已经寻找到其他更有针对性的害虫控制方法，特别是将RNA干扰或‘基因沉默’作为在遗传水平上控制害虫的手段的方法。RNA干扰或‘RNAi’是用以在细胞或整个生物体环境下以序列特异性方式下调基因表达的一种方法。RNAi是目前本领域中用于抑制或下调多种生物体(包括害虫生物体，如真菌、线虫以及昆虫)中的基因表达的一种成熟的技术。此外，之前的研究已经显示，下调昆虫害虫物种中的靶基因可以被用作控制害虫侵扰的一种手段。W02007/074405描述了抑制无脊椎动物害虫(包括科罗拉多马铃薯甲虫)中靶基因的表达的方法。另外，W02009/091864描述了用于抑制昆虫害虫物种(包括来自草盲蝽(Lygus)属的害虫)中的靶基因的组合物和方法。虽然使用RNAi来下调害虫物种中的基因表达在本领域中是已知的，但是将这种技术用作害虫控制措施的成功取决于选择最适当的靶基因，即功能缺失导致必需生物过程严重破坏和/或生物体死亡的那些基因。因此，本专利技术针对将下调害虫中的特定靶基因作为一种手段来实现昆虫害虫侵扰，特别是植物的昆虫害虫侵扰的更有效预防和/或控制。
技术实现思路
本专利技术人试图使用遗传方法来鉴定用于预防和/或控制昆虫害虫侵扰的改良的手段。具体来说，他们研究了使用RNAi按以下方式来下调基因:削弱昆虫害虫存活、生长、定殖特定环境和/或侵扰宿主生物体的能力并且由此限制由该害虫造成的损害。因此，根据本专利技术的一个方面，提供了一种干扰核糖核酸(RNA或双链RNA)，它在被一种昆虫害虫物种摄入后起到下调所述昆虫害虫中的一种靶基因的表达的作用，其中该RNA包含至少一个沉默元件，其中该沉默元件是包含退火的互补链的一个双链RNA区域，其中一条链包含与该靶基因内的一个靶核苷酸序列至少部分地互补的一个核苷酸序列或由其组成，并且其中该靶基因⑴选自以下基因的组，这些基因具有包含SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294 到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58、322 到 325、17、18、59 到 62、19、20、63 到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206 到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到 293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226 到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234到 237、302 至Ij 305、129、138、238 到 241、150、151、242 到 245、152、153、246 到 249、154、155、250 到 253、156、157、254到257、158、159、258 到 261、160、161、262 到 265、163、162、164、266到 269、165、167、166、270 到 273、168、170、169、274 到 277、172、173、278 到 281、200、201、314 到 317、186、202、187、203、306 到 309,318 到 321、386、387、388、389 或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列，或具有一种核苷酸序列，当最佳地比对并且比较两种序列时，该核苷酸序列与 SEQ ID N01、174、404、180、188、2、175、181、189、27 到 30,282 到 285,294到 297,310 到 313、3、4、31 到 34、139、5、6、35 到 38、140、7、8、39 到 42、9、10、43 到 46、141、11、12、47 到 50、13、14、51 到 54、15、204、16、205、55 到 58,322 到 325、17、18、59 到 62、19、20,63到 66、21、22、67 到 70、23、24、71 到 74、25、26、75 到 78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到 209,286 到 289,298 到 301、145、122、144、178、131、179、210 到 213,290 到293、123、132、214 到 217、124、133、218 到 221、146、125、134、222 到 225、147、126、135、226到 229、127、148、136、230 到 233、128、149、184、137、185、234 到 237,302 到 305、129本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种干扰核糖核酸(RNA)，该干扰核糖核酸在被一种昆虫害虫物种摄入后起到下调所述昆虫害虫中的一种靶基因的表达的作用，其中该RNA包含至少一个沉默元件，其中该沉默元件是包含退火的互补链的一个双链RNA区域，其中一条链包含与该靶基因内的一个靶核苷酸序列至少部分地互补的一个核苷酸序列或由其组成，并且其中该靶基因(i)选自以下基因的组，这些基因具有包含SEQ ID NO1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30、282到285、294到297、310到313、3、4、31到34、139、5、6、35到38、140、7、8、39到42、9、10、43到46、141、11、12、47到50、13、14、51到54、15、204、16、205、55到58、322到325、17、18、59到62、19、20、63到66、21、22、67到70、23、24、71到74、25、26、75到78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到209、286到289、298到301、145、122、144、178、131、179、210到213、290到293、123、132、214到217、124、133、218到221、146、125、134、222到225、147、126、135、226到229、127、148、136、230到233、128、149、184、137、185、234到237、302到305、129、138、238到241、150、151、242到245、152、153、246到249、154、155、250到253、156、157、254到257、158、159、258到261、160、161、262到265、163、162、164、266到269、165、167、166、270到273、168、170、169、274到277、172、173、278到281、200、201、314到317、186、202、187、203、306到309、318到321、386、 387、388、389或其互补序列中的任一个的一种核苷酸序列，或具有一种核苷酸序列以使得当最佳地比对并且比较两种序列时，该核苷酸序列与SEQ ID NO1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30、282到285、294到297、310到313、3、4、31到34、139、5、6、35到38、140、7、8、39到42、9、10、43到46、141、11、12、47到50、13、14、51到54、15、204、16、205、55到58、322到325、17、18、59到62、19、20、63到66、21、22、67到70、23、24、71到74、25、26、75到78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到209、286到289、298到301、145、122、144、178、131、179、210到213、290到293、123、132、214到217、124、133、218到221、146、125、134、222到225、147、126、135、226到229、127、148、136、230到233、128、149、184、137、185、234到237、302到305、129、138、238到241、150、151、242到245、152、153、246到249、154、155、250到253、156、157、254到257、158、159、258到261、160、161、262到265、163、162、164、266到269、165、167、166、270到273、168、170、169、274到277、172、173、278到281、200、201、314到317、186、202、187、203、306到309、318到321、386、387、388、389或其互补序列中的任一个至少75％一致，或(ii)选自以下基因的组，这些基因具有包含SEQ ID NO1、174、404、180、188、2、175、181、189、27到30、282到285、294到297、310到313、3、4、31到34、139、5、6、35到38、140、7、8、39到42、9、10、43到46、141、11、12、47到50、13、14、51到54、15、204、16、205、55到58、322到325、17、18、59到62、19、20、63到66、21、22、67到70、23、24、71到74、25、26、75到78、143、121、142、176、182、130、177、183、206到209、286到289、298到301、145、122、144、...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：米里昂·贝吉恩，蒂埃里·博盖尔特，帕斯卡莱·费尔德曼，罗曼·雷马克斯，
申请(专利权)人：德福根有限公司，
类型：发明
国别省市：比利时;BE