一种从酵母中提取RNA的方法技术

本发明专利技术公开了一种从酵母中提取RNA的方法，包括以下步骤：取13g活性干酵母，置250ml锥形瓶中，加入130ml蒸馏水，混匀，再加入1mg/ml的溶菌酶5ml，混匀，37℃水浴10-20min；倒入13gNaCl，溶解后，沸水浴1h；3500r/min离心8min，将上清倒入50ml烧杯中，调节pH，至2.0～2.5；将烧杯冰浴10min；将烧杯中物质移入离心管中，3500r/min离心8min，弃上清，将沉淀移入10ml烧杯中，95%乙醇5～10ml洗涤；用布氏漏斗真空抽滤；干燥。采用本发明专利技术提供的RNA的提取方法，可快速、简单、高效的从酵母中提取出RNA。

【技术实现步骤摘要】
一种从酵母中提取RNA的方法
本专利技术属于生物
，尤其涉及一种从酵母中提取RNA的方法。
技术介绍
酵母是单细胞微生物。它属于高等微生物的真菌类。它和高等植物的细胞一样，有细胞核、细胞膜、细胞壁、线粒体、相同的酵素和代谢途经。酵母无害，容易生长，空气中、土壤中、水中、动物体内都存在酵母。有氧气或者无氧气都能生存。酵母营专性或兼性厌氧生活，未知专性厌氧的酵母，在缺乏氧气时，发酵型的酵母通过将糖类转化成为二氧化碳和乙醇(俗称酒精)来获取能量。在酿酒酵母测序计划开始之前，人们通过传统的遗传学方法已确定了酵母中编码RNA或蛋白质的大约2600个基因。通过对酿酒酵母的完整基因组测序，发现在12068kb的全基因组序列中有5885个编码专一性蛋白质的开放阅读框。这意味着在酵母基因组中平均每隔2kb就存在一个编码蛋白质的基因，即整个基因组有72%的核苷酸顺序由开放阅读框组成。这说明酵母基因比其它高等真核生物基因排列紧密。如在线虫基因组中，平均每隔6kb存在一个编码蛋白质的基因；在人类基因组中，平均每隔30kb或更多的碱基才能发现一个编码蛋白质的基因。酵母基因组的紧密性是因为基因间隔区较短与基因中内含子稀少。酵母基因组的开放阅读框平均长度为1450bp即483个密码子，最长的是位于ΧΠ号染色体上的一个功能未知的开放阅读框(4910个密码子)，还有极少数的开放阅读框长度超过1500个密码子。在酵母基因组中，也有编码短蛋白的基因，例如，编码由40个氨基酸组成的细胞质膜蛋白脂质的PMPl基因。此外，酵母基因组中还包含:约140个编码RNA的基因，排列在XD号染色体的长末端；40个编码SnRNA的基因，散布于16条染色体；属于43个家族的275个tRNA基因也广泛分布于基因组中。表1提供了酵母基因在各染色体上分布的大致情况。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供了一种从酵母中提取RNA的方法，已解决现有技术中的问题。为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案: 一种从酵母中提取RNA的方法，其特征包括以下步骤: ①取13g活性干酵母,置250ml锥形瓶中，加入130 ml蒸懼水,混匀，再加入I mg/ml的溶菌酶5 ml，混匀，37 °C水浴10-20 min ； ②倒入13g NaCl，溶解后，沸水浴I h ； ③3500r/min离心8 min,将上清倒入50 ml烧杯中， ④调节pH，至2.0~2.5 ； ⑤将烧杯冰浴10min ；⑥将烧杯中物质移入离心管中，3500r/min离心8 min，弃上清，将沉淀移入10 ml烧杯中，95%乙醇5~10 ml洗漆； ⑦用布氏漏斗真空抽滤； ⑧干燥。为了达到更好的效果，进一步改进:所述调节pH采用HC1。进一步，所述乙醇洗涤，采用95%的乙醇。本专利技术的有益效果:采用本专利技术提供的RNA的提取方法，可快速、简单、高效的从酵母中提取出RNA。【具体实施方式】为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。实施例1: 一种动物细胞融合的方法， 其特征包括以下步骤: ①取13g活性干酵母,置250ml锥形瓶中，加入130 ml蒸懼水,混匀，再加入I mg/ml的溶菌酶5 ml，混匀，37 °C水浴10 min ； ②倒入13g NaCl，溶解后，沸水浴I h ； ③3500r/min离心8 min,将上清倒入50 ml烧杯中， ④调节pH,至2.0 ; ⑤将烧杯冰浴10min ； ⑥将烧杯中物质移入离心管中，3500r/min离心8 min，弃上清，将沉淀移入10 ml烧杯中，95%乙醇5 ml洗涤； ⑦用布氏漏斗真空抽滤； ⑧干燥。进一步,调节pH采用HCl。进一步，乙醇洗涤，采用95%的乙醇。实施例2: 一种动物细胞融合的方法，其特征包括以下步骤: ①取13g活性干酵母,置250ml锥形瓶中，加入130 ml蒸懼水,混匀，再加入I mg/ml的溶菌酶5 ml，混匀，37 °C水浴15 min ； ②倒入13g NaCl，溶解后，沸水浴I h ； ③3500r/min离心8 min,将上清倒入50 ml烧杯中， ④调节pH,至2.3 ; ⑤将烧杯冰浴10min ； ⑥将烧杯中物质移入离心管中，3500r/min离心8 min，弃上清，将沉淀移入10 ml烧杯中，95%乙醇8ml洗涤； ⑦用布氏漏斗真空抽滤； ⑧干燥。进一步,调节pH采用HCl。进一步，乙醇洗涤，采用95%的乙醇。实施例3: 一种动物细胞融合的方法，其特征包括以下步骤: ①取13g活性干酵母,置250ml锥形瓶中，加入130 ml蒸懼水,混匀，再加入I mg/ml的溶菌酶5 ml，混匀，37 °C水浴20 min ； ②倒入13g NaCl，溶解后，沸水浴I h ； ③3500r/min离心8 min,将上清倒入50 ml烧杯中， ④调节pH,至2.5 ; ⑤将烧杯冰浴10min ； ⑥将烧杯中物质移入离心管中，3500r/min离心8 min，弃上清，将沉淀移入10 ml烧杯中，95%乙醇10 ml洗涤； ⑦用布氏漏斗真空抽滤； ⑧干燥。进一步,调节pH采用HCl。进一步，乙醇洗涤，采用95%的乙醇。实施例4: 一种动物细胞融合的方法，其特征包括以下步骤: 取6克Nacl放入250ml锥形瓶中加入50ml的蒸懼水,加热直至沸腾往其中加入干酵母粉12g，搅拌均匀，然后于沸水浴中提取60分钟。再用自来水冷却，把所得溶液分装到8支离心管内，以3500r/min离心12min，使提取液与菌体残渣等分离。将离心得到的上清液倾于小烧杯内，并置于放有冰块烧杯中冷却。待溶液冷至10°C以下时，在搅拌下小心地用6mol/L HCL溶液调节pH至2.0~2.5。随着pH值的下降，溶液中白色沉淀逐渐增加，到等电点时沉淀量最多(注意严格控制PH值)。以后再把所得溶液分装到4支离心管中离心10分钟。得到RNA沉淀。小心弃去上清液，取其沉淀再在真空干燥箱内烘干。上述虽然结合实施例对本专利技术的【具体实施方式】进行了描述，但并非对本专利技术保护范围的限制，所属领域技术人员应该明白，在本专利技术的技术方案的基础上，本领域技术人员不需要付出创造性的劳动即可做出的各种修改或变形仍在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从酵母中提取RNA的方法，其特征包括以下步骤：①?取13g活性干酵母，置250?ml锥形瓶中，加入130?ml蒸馏水，混匀，再加入1?mg/ml的溶菌酶5?ml，混匀，37?℃水浴10?20?min；?②?倒入13?g?NaCl，溶解后，沸水浴1?h；③?3500?r/min离心8?min，将上清倒入50?ml烧杯中，④?调节pH，至2.0～2.5；?⑤?将烧杯冰浴10?min；⑥?将烧杯中物质移入离心管中，3500?r/min离心8?min，弃上清，将沉淀移入10?ml烧杯中，95%乙醇5～10?ml洗涤；⑦?用布氏漏斗真空抽滤；⑧?干燥。

【技术特征摘要】
1.一种从酵母中提取RNA的方法，其特征包括以下步骤: ①取13g活性干酵母,置250ml锥形瓶中，加入130 ml蒸懼水,混匀，再加入I mg/ml的溶菌酶5 ml，混匀，37 °C水浴10-20 min ； ②倒入13g NaCl，溶解后，沸水浴I h ； ③3500r/min离心8 min,将上清倒入50 ml烧杯中， ④调节pH，至2.0~2.5 ； ⑤将...

【专利技术属性】
技术研发人员：简玉君，
申请(专利权)人：简玉君，
类型：发明
国别省市：