一种贞芪扶正制剂中芒柄花素的含量测定方法技术

本发明专利技术公开了一种贞芪扶正制剂中芒柄花素的含量测定方法，它是以芒柄花素对照品为对照，以甲醇:水/0.01%～5%磷酸水溶液/0.01%～5%冰醋酸/0.01%～0.5%甲酸水溶液=50～70：50～30或者乙腈:水/0.01%～5%磷酸水溶液/0.01%～5%冰醋酸/0.01%～0.5%甲酸水溶液=20～50:80～50为流动相的高效液相色谱法。本发明专利技术方法的专属性强、精密度高、重复性好、回收率高、稳定性高、测量结果准确，达到了有效控制药物质量的目的，确保了产品质量的稳定以及临床用药的安全、有效。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，属于中药质量检测
。
技术介绍
贞芪制剂有补气养阴、扶正固本之功效。现代药理实验证明能提高人体免疫功能，保护骨髓和肾上腺皮质功能，促进干扰素产生；配合肿瘤患者放、化疗，减轻病人放、化疗期间的毒副作用，促进正常功能的恢复的作用。其处方由黄芪、女贞子组成。目前，贞芪制剂供临床选择的剂型有片剂、胶囊剂、颗粒剂及滴丸剂等。而黄芪中的主要有效成分为皂苷和黄酮类化合物，研究证实黄芪中的黄酮类成分具有多种药理活性、可以清除氧自由基、抑制脂质过氧化和维持血中NO浓度，保护缺血再灌注损伤。因此，黄芪黄酮类成分是贞芪扶正制剂的主要药物有效成分之一，而芒柄花素是黄芪黄酮类成分中重要的一种，对芒柄花素的含量进行测定也显得尤为重要。但是，现有的贞芪扶正制剂的质量检测方法并没有对芒柄花素成分的含量进行测定，为进一步完善贞芪扶正制剂的质量检测标准，以确保其药品质量，建立贞芪扶正制剂中芒柄花素的含量测定项目非常必要。
技术实现思路
本专利技术的目的在于，提供，该方法专属性强、精密度高、重复性好、回收率高、稳定性高、测量结果准确，达到了有效控制药物质量的目的，确保了产品质量的稳定以及临床用药的安全、有效。本专利技术所述的贞芪扶正制剂包括现有技术中的任意贞芪扶正制剂产品(颗粒、胶囊、片剂等)，例如按照专利技术专利200310122216.7,200610051146.4所述的方法制备得到的制剂。为解决上述技术问题，本专利技术采用如下的技术方案:，它是以芒柄花素对照品为对照，以甲醇:水/0.01%~5%磷酸水溶液/0.01%~5%冰醋酸/0.01%~0.5%甲酸水溶液=50~70:50~30或者乙腈:水/0.01%~5%磷酸水溶液/0.01%~5%冰醋酸/0.01%~0.5%甲酸水溶液=20~50:80~50为流动相的高效液相色谱法。具体的含量测定方法为:照高效液相色谱法、按下述步骤进行测定:(I)色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇:水/0.01%~5%磷酸水溶液/0.01%~5%冰醋酸/0.01%~0.5%甲酸水溶液=50~70:50~30或者乙腈:水/0.01%~5%磷酸水溶液/0.01%~5%冰醋酸/0.01%~0.5%甲酸水溶液=20~50:80~50为流动相(乙腈较甲醇的优点更明显，如产生鬼峰少，压力小等)；柱温为20~40°C ;检测波长为230~270nm ;流速为0.5~1.5mL ? mirT1 ;理论板数按芒柄花素峰计算应不低于5000 ；(2)对照品溶液的制备:取芒柄花素对照品适量，精密称定，加甲醇制成ImL含0.1mg的溶液，备用；(3)供试品溶液的制备:采用下述方法①-⑤中的任一种:①精密称取贞芪扶正制剂或其内容物2.0g，精密加入甲醇IOOmL,称定重量，超声或回流提取30?60min，待冷却后，用甲醇补足重量，过滤，取续滤液即得；②精密称取贞芪扶正制剂或其内容物2.0g，用适量石油醚索氏提取30min，残渣挥干后，精密加入甲醇IOOmL,称定重量，超声或回流提取30?60min，待冷却后，用甲醇补足重量，过滤，取续滤液即得；③精密称取贞芪扶正制剂或其内容物2.0g，精密加入70%?80%的乙醇IOOmL,称定重量，超声提取lh，用乙醇补足重量，滤过；精密量取续滤液50mL，减压浓缩至干，残渣加适量水使溶解，上大孔吸附树脂柱，静置吸附30min，依次用水、40%乙醇、70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱液，浓缩至干，用甲醇溶解并转移至50mL的量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得;④精密称取贞芪扶正制剂或其内容物2.0g，精密加入甲醇IOOmL,称定重量，超声或回流提取lh，用甲醇补足重量，滤过；精密量取续滤液50mL，浓缩至干，残留物用0.3%氢氧化钠溶液溶解后，加稀盐酸调至PH5?6，然后用乙酸乙酯或水饱和的正丁醇萃取四次，合并有机层，减压蒸干，残渣用甲醇定容至50mL，摇匀，即得；⑤精密称取贞芪扶正制剂或其内容物2.0g，精密加入甲醇IOOmL,称定重量，超声或回流提取lh，用甲醇补足重量，滤过；精密量取续滤液50mL，浓缩至干，残渣加适量温水溶解，用水饱和的正丁醇提取4次，充分提取后，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣加水IOmL使溶解，通过大孔吸附树脂柱，以水50mL洗脱，弃去水液，再用40%乙醇洗脱，弃去洗脱液，继用70%乙醇洗脱，收集洗脱液，蒸干,残渣用甲醇溶解并转移至50mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得；(4)测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ L，注入高效液相色谱仪，测定，即得。前述的贞芪扶正制剂中芒柄花素的含量测定方法中，所述的流动相为乙腈:0.5%磷酸水溶液=40:60。前述的贞芪扶正制剂中芒柄花素的含量测定方法中，步骤(I)中的检测波长为254nm,流速为 0.8 ?1.0mL/min,柱温为 35°C。为确保本专利技术含量测定方法科学、合理、可行， 申请人:进行了一系列试验研究和考察。一、仪器与试药(见表I)表I本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种贞芪扶正制剂中芒柄花素的含量测定方法，其特征在于：它是以芒柄花素对照品为对照，以甲醇:水/0.01%～5%磷酸水溶液/0.01%～5%冰醋酸/0.01%～0.5%甲酸水溶液=50～70：50～30或者乙腈:水/0.01%～5%磷酸水溶液/0.01%～5%冰醋酸/0.01%～0.5%甲酸水溶液=20～50:80～50为流动相的高效液相色谱法。

【技术特征摘要】
1.一种贞芪扶正制剂中芒柄花素的含量测定方法，其特征在于:它是以芒柄花素对照品为对照，以甲醇:水/0.01%?5%磷酸水溶液/0.01%?5%冰醋酸/0.01%?0.5%甲酸水溶液=50?70:50?30或者乙腈:水/0.01%?5%磷酸水溶液/0.01%?5%冰醋酸/0.01%?0.5%甲酸水溶液=20?50:80?50为流动相的高效液相色谱法。2.根据权利要求1所述的贞芪扶正制剂中芒柄花素的含量测定方法，其特征在于，照高效液相色谱法、按下述步骤进行测定: (1)色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇:水/0.01%?5%磷酸水溶液/0.01%?5%冰醋酸/0.01%?0.5%甲酸水溶液=50?70:50?30或者乙腈:水/0.01%?5%磷酸水溶液/0.01%?5%冰醋酸/0.01%?0.5%甲酸水溶液=20?50:80?50为流动相；柱温为20?40°C ;检测波长为230?270nm ;流速为0.5?1.5mL.miiT1 ;理论板数按芒柄花素峰计算应不低于5000 ； (2)对照品溶液的制备:取芒柄花素对照品适量，精密称定，加甲醇制成ImL含0.1mg的溶液，备用； (3)供试品溶液的制备:采用下述方法①-⑤中的任一种: ①精密称取贞芪扶正制剂或其内容物2.0g，精密加入甲醇IOOmL,称定重量，超声或回流提取30?60min，待冷却后，用甲醇补足重量，过滤，取续滤液即得； ②精密称取贞芪扶正制剂或其内容物2.0g，用适量石油醚索氏提取30min，残渣挥干后，精密加入甲醇IOOmL,称定重量，超声或回流提取30?60min，待冷却后，用甲醇补足重量，过滤，取续滤液即得； ③精密称取贞芪扶正制剂或其内容物2.0g，精密加入7...

【专利技术属性】
技术研发人员：张观福，
申请(专利权)人：贵州信邦制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：