一种同时检测血浆中复方丹蒌片主要成分的方法技术

本发明专利技术提供了一种液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时检测血浆样本中复方丹蒌片主要成分葛根素、芒柄花黄素、芍药苷、丹参酮ⅡA和隐丹参酮的方法。所述液相色谱中，流动相由乙腈和体积分数为0.1％的甲酸水溶液组成，采用梯度洗脱。所述质谱采用正负离子快速切换分析模式，MRM扫描方式。同时测定给药丹蒌片后，大鼠血浆中这几种主要成分的血药浓度变化情况。方法学考察结果表明所建立的方法符合体内生物样品测定要求，方法灵敏度好，专属性强，稳定、可靠，适宜含量较低物质的检测。

【技术实现步骤摘要】
—种同时检测血浆中复方丹蒌片主要成分的方法
本专利技术属于医药领域，具体涉及一种同时检测血浆中复方丹萎片主要成分的分析方法及其在药代动力学中的应用。
技术介绍
复方丹萎片是由瓜萎皮、薤白、葛根、川芎、丹参、赤芍、泽泻、黄芪、骨碎补、郁金，十味中药组成的上市中成药。临床主要用于宽胸通阳、化痰散结、活血化瘀，用于痰瘀互结所致的胸痹心痛，症见胸闷胸痛、憋气、舌质紫暗、苔白腻；冠心病心绞痛见上述证候者。文献报道其主要成分为黄酮类、酚酸类、丹参酮类、三萜烷类、内酯类和芍药苷等，并且葛根素、芍药苷、丹参酮类成分在片剂中的含量较高。葛根素、芍药苷、芒柄花黄素、丹参酮II A、隐丹参酮分别是葛根、赤芍、葛根和黄芪、丹参中的主要成分，大量文献对其药理活性进行了报道。但还没有文献同时对这几种成分的药代动力学进行报道，对复方丹萎片药效物质基础研究的文章也未见有报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种液相色谱串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时检测血浆样本中复方丹萎片主要成分葛根素、芒柄花黄素、芍药苷、丹参酮II A和隐丹参酮的方法。并采用该方法对复方丹萎片中这几种成分的药代动力学特点进行本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种液相色谱串联质谱法同时检测血浆样本中葛根素、芒柄花黄素、芍药苷、丹参酮ⅡA和隐丹参酮的方法，包括：步骤(1)样品的制备和步骤(2)采用液相色谱串联质谱法进行检测；所述步骤(1)样品的制备采用包括以下步骤的方法：a)向待测血浆样品中加入混合内标溶液、甲酸，并混匀；所述混合内标溶液中内标为大黄素和栀子苷；其中，大黄素作为葛根素、芒柄花黄素、丹参酮ⅡA和隐丹参酮的内标，栀子苷作为芍药苷的内标；b)加入乙酸乙酯提取剂，混匀后静置；c)离心，收集上清液，氮气吹干，收集干燥物；d)将得到的干燥物用甲醇复溶，混匀、离心，取上清液；所述步骤(2)检测所用液相色谱条件如下：色谱柱为C18柱；流动相由乙腈和体...

【技术特征摘要】
1.一种液相色谱串联质谱法同时检测血浆样本中葛根素、芒柄花黄素、芍药苷、丹参酮II A和隐丹参酮的方法，包括:步骤⑴样品的制备和步骤(2)采用液相色谱串联质谱法进行检测； 所述步骤(1)样品的制备采用包括以下步骤的方法: a)向待测血浆样品中加入混合内标溶液、甲酸，并混匀；所述混合内标溶液中内标为大黄素和桅子苷；其中，大黄素作为葛根素、芒柄花黄素、丹参酮II A和隐丹参酮的内标,桅子苷作为芍药苷的内标； b)加入乙酸乙酯提取剂，混匀后静置； c)离心，收集上清液，氮气吹干，收集干燥物； d)将得到的干燥物用甲醇复溶，混匀、离心，取上清液； 所述步骤(2)检测所用液相色谱条件如下: 色谱柱为C18柱； 流动相由乙腈和体积分数为0.1 %甲酸水溶液组成； 洗脱方式为梯度洗脱； 所述梯度洗脱的程序如下: O-1Omin:乙腈的体积分数由10%增加至30% ； 10-15min:乙腈的体积分数由30%增加至90% ； 15-24min:乙腈的体积分数维持90%不变。2.一种液相色谱串联质谱法同时检测血浆样本中葛根素、芒柄花黄素、芍药苷、丹参酮II A和隐丹参酮的含量的方法，包括下述步骤: .1、标准曲线的制备: 取一系列浓度的葛根素、芒柄花黄素、芍药苷、丹参酮II A和隐丹参酮的混合标准品溶液加入空白血浆样品中，按照权利要求1所述的样品制备方法进行制备，然后对得到的上清液按照权利要求1所述的液相色谱串联质谱法进行检测，并分别记录每个浓度的葛根素、芒柄花黄素、芍药苷、丹参酮II A和隐丹参酮对应的峰面积； 以葛根素与内标峰面积比值Y为纵坐标，以葛根素浓度X为横坐标，制备葛根素的线性回归方程； 以芒柄花黄素与内标峰面积比值Y为纵坐标，以芒柄花黄素浓度X为横坐标，制备芒柄花黄素的线性回归方程； 以芍药苷与内标峰面积比值Y为纵坐标，以芍药苷浓度X为横坐标，制备芍药苷的线性回归方程； 以丹参酮II A与内标峰面积比值Y为纵坐标，以丹参酮II A浓度X为横坐标，制备丹参酮II A的线性回归方程； 以隐丹参酮与内标峰面积比值Y为纵坐标，以隐丹参酮浓度X为横坐标，制备隐丹参酮的线性回归方程； .2、待测血浆样品中葛根素、芒柄花黄素、芍药苷、丹参酮IIA和隐丹参酮的含量测定: 将待测血浆样品按照权利要求1所述的样品制备方法进行制备，然后对得到的上清液按照权利要求1所述的液相色谱串联质谱法进行检测，并分别记录葛根素、芒柄花黄素、芍药苷、丹参酮II A和隐丹参酮对应的峰面积；计算葛根素与内标峰面积比值Y，将Y值代入所述葛根素的线性回归方程中，计算得到所述待测血浆样品中葛根素的浓度； 计算芒柄花黄素与内标峰面积比值Y，将Y值代入所述芒柄花黄素的线性回归方程中，计算得到所述待测血浆样品中芒柄花黄素的浓度； 计算芍药苷与内标峰面积比值Y，将Y值代入所述芍药苷的线性回归方程中，计算得到所述待测血浆样品中芍药苷的浓度； 计算丹参酮II A与内标峰面积比值Y，将Y值代入所述丹参酮II A的线性回归方程中，计算得到所述待测血浆样品中丹参酮II A的浓度； 计算隐丹参酮与内标峰面积比值Y，将Y值代入所述隐丹参酮的线性回归方程中，计算得到所述待测血浆样品中隐丹参酮的浓度。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于:步骤a)中，所述待测血浆样品与甲酸的体积比为100:20 ； 步骤b)中，所述静置的时...

【专利技术属性】
技术研发人员：常艳旭，吴思丹，庞玉华，张鹏，高秀梅，李晋，马文芳，
申请(专利权)人：吉林康乃尔药业有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林;22