本发明专利技术涉及一种采用根际有益细菌促进党参子种子萌发的处理方法。本发明专利技术利用根际促生微生物枯草芽孢杆菌(Bacillus?subtilis)一种菌株菌液浸泡党参种子，显著提高了党参种子发芽势和发芽率，从而提高党参种子活力和出苗率，克服了生产上党参种子小，发芽势和发芽率低，出苗不整齐的问题，以减少党参补苗及反复发芽造成的人力、物力等经济损失。同时，枯草芽孢杆菌具有对人畜无毒无害、不污染环境、非致病性和抗逆性强等特点，能够产生多种生长激素类物质和丰富的抗菌物质，促进植物生长，改善植株生长发育。本发明专利技术种子处理方法简单，可广泛应用于党参的栽培，具有重要的社会、经济和生态经济价值。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及一种采用根际有益细菌促进党参子种子萌发的处理方法。本专利技术利用根际促生微生物枯草芽孢杆菌(Bacillus?subtilis)一种菌株菌液浸泡党参种子，显著提高了党参种子发芽势和发芽率，从而提高党参种子活力和出苗率，克服了生产上党参种子小，发芽势和发芽率低，出苗不整齐的问题，以减少党参补苗及反复发芽造成的人力、物力等经济损失。同时，枯草芽孢杆菌具有对人畜无毒无害、不污染环境、非致病性和抗逆性强等特点，能够产生多种生长激素类物质和丰富的抗菌物质，促进植物生长，改善植株生长发育。本专利技术种子处理方法简单，可广泛应用于党参的栽培，具有重要的社会、经济和生态经济价值。【专利说明】
本专利技术属于微生物学和植物生理学领域，涉及利用根际有益细菌枯草芽孢杆菌 GB03菌株提高党参种子发芽势和发芽率，从而促进党参种子萌发的方法，保证种子播种后田间出苗健壮、整体一致。
技术介绍
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)具有对人畜无毒无害、不污染环境、非致病性和抗逆性强等特点，它能够产生多种生长激素类物质和丰富的抗菌物质，促进植物生长，改善植株生长发育，增加植物对盐胁迫等逆境的抵御能力，从而提高植物的抗病性。近年来，党参在治疗冠心病、高血脂症、低血压病等面取得了新的进展，使其用量速增(马雪梅和吴朝峰2009)，但因党参种子小，寿命短，直播育苗时发芽率低，栽培时播种量大，成本高，达不到生产要求。据调查，国内每年党参的需求量远远超过生产，从党参作为商品在市场上交易以来，党参的生产和销售就经常出现大起大落的现象，价格波动也很大。目前，全国党参野生资源蕴藏量约为1.58万吨，但是资源分散、产量呈现逐年下降的趋势，所能提供的商品数量极其有限，党参市场供求矛盾极为突出(刘德军等2001)。从中药党参资源调查结果表明，目前市场上的党参主产于山西、甘肃、陕西、四川和湖北等省，主要为栽培品，少量为野生，甘肃除了原产地外，近几十年大面积发展党参种植，同时扩大了素花党参的生产规模，成为中药党参最大的产区(张向东等2013)。目前，随着中药现代化的实施以及中国在世界经济中的地位越来越高，中药材的生产和出口均稳步的增长，据估计2007年我国党参的出口已经超过了 0.3万吨，作为中药制药原料，党参的用量也显著增长。近年来，党参的市场价格多次抬升，而且由于全国党参总产量明显下降，使其价格大幅度上调。党参药材供不应求已经成为中药生产中的一大难题，因此，改善党参生产土壤质量，调控活性成分及代谢产物积累，提高党参质量已经成为中药材种植业的首选，也是党参生产中亟待解决的问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足，提供一种。是利用根际有益细菌枯草芽孢杆菌GB03促进党参种子的萌发，该方法操作简单，成本低，高效，无毒并对环境友好无害。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为:一种，其主要特点在于步骤为:(1)党参种子消毒处理:籽粒饱满无缺损、均匀一致的党参种子，用75%的酒精浸泡8-lOs后，使用5%次氯酸钠浸泡10-12min，用灭菌的蒸馏水冲洗7_8次，于2_4°C冰箱过夜；(2)枯草芽孢杆菌GB03菌液制备:先配制溶菌肉汤LB液体培养基:按照氯化钠、 胰蛋白胨和酵母粉的比例为1:2:1配制，溶剂为蒸馏水；调pH到7.2，高温为115-132°C灭菌，待冷却温度为20-35°C后，每IOOmL的LB液体培养基加入50-100 μ L的枯草芽孢杆菌GB03菌液，在转速为180-250r/min下，温度为25_30°C的恒温培养摇床上培养过夜后，测定菌液浓度为OD6tltl为0.8-1.0时，取出备用；(3)种子菌液处理:将步骤(1)处理完成种子浸泡于枯草芽孢杆菌GB03菌液中5min-20min，然后将菌液倒出，处理完成的种子进行播种。本专利技术的有益效果:本专利技术可显著提高党参种子发芽势和发芽率，从而提高党参种子活力和出苗率，保持较整齐的发芽率，克服了生产上党参种子小，发芽势和发芽率低，出苗不整齐的问题，以减少生产上党参补苗及反复发芽造成的人力、物力等经济损失。同时，枯草芽孢杆菌具有对人畜无毒无害、不污染环境、非致病性和抗逆性强等特点，能够产生多种生长激素类物质和丰富的抗菌物质，促进植物生长，改善植株生长发育。本专利技术种子处理方法简单，可广泛应用于党参的栽培，具有重要的社会、经济和生态经济价值。【专利附图】【附图说明】图1:萌发3天后党参种子发芽情况比较。图中四个小图分别表示对照、有益细菌菌液浸泡党参种子5分钟、10分钟和20分钟；图2:萌发3天后党参种子萌发幼苗根系发育情况比较。左上图为有益细菌菌液浸泡党参种子5分钟，左右图为对照；下图为放大的党参萌发种子；图3:GB03菌液浸泡对党参种子发芽势的影响。图中四个柱子分别表示对照、有益细菌菌液浸泡党参种子5分钟、10分钟和20分钟的党参种子发芽势；图4:GB03菌液浸泡对党参种子发芽率的影响。图中四个柱子分别表示对照、有益细菌菌液浸泡党参种子5分钟、10分钟和20分钟的党参种子发芽率。`【具体实施方式】以下对本专利技术的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本专利技术，并非用于限定本专利技术的范围。所述
的普通技术人员依据以上本专利技术公开的内容和各参数所取范围，均可实现本专利技术的目的。实施例1:一种，其主要特点在于步骤为:(I)党参种子消毒处理:籽粒饱满无缺损、均匀一致的党参种子，用75%的酒精浸泡8s后,使用5%次氯酸钠浸泡IOmin,用灭菌的蒸懼水冲洗7_8次,于4°C冰箱过夜；(2)枯草芽孢杆菌GB03菌液制备:先配制LB液体培养基:按照氯化钠5g/L、胰蛋白胨10g/L和酵母粉5g/L的比例配制，用标准型PH计(PB-10，北京赛多利斯)调pH到6.8，使用立式压力蒸汽灭菌锅(LDZX-50KBS,上海申安)高温118-125°C灭菌待冷却后，每IOOmL的LB液体培养基加入50μ L的GB03菌液，在转速为180r/min下，温度为28°C的恒温培养摇床(THZ-300，上海一恒科技)上培养过夜后，使用核酸检测仪(NanoDix)P 1000，德国)测定菌液浓度为0D600 =0.9时取出备用，菌液为现配现用。(3)种子菌液处理:将步骤(1)处理完成种子浸泡于枯草芽孢杆菌GB03菌液中5min，然后将菌液倒出，处理完成的种子进行播种。实施例2: —种，其主要特点在于步骤为:(1)党参种子消毒处理:籽粒饱满无缺损、均匀一致的党参种子，用75%的酒精浸泡9s后,使用5%次氯酸钠浸泡Ilmin,用灭菌的蒸懼水冲洗7_8次,于2°C冰箱过夜；(2)枯草芽孢杆菌GB03菌液制备:先配制溶菌肉汤LB液体培养基:按照氯化钠、胰蛋白胨和酵母粉的比例为1:2:1 配制，溶剂为蒸馏水JMpH到7.2，高温为115-118°c灭菌，待冷却温度为20°C后，每IOOmL 的LB液体培养基加入80 ii L的枯草芽孢杆菌GB03菌液，在转速为180_250r/min下，温度为25°C的恒温培养摇床上培养过夜后，测定菌液浓度为OD6tltl为0.8-1.0时，取出备用。(3)种子菌液处理:将步骤(1)处理完成种子浸泡于枯草芽孢杆菌GB03菌液中 lOmin，然后将菌液倒出，处理完成的本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种根际有益细菌促进党参种子萌发的方法，其特征包括以下步骤：（1）党参种子消毒处理：籽粒饱满无缺损、均匀一致的党参种子，用75%的酒精浸泡8?10s后，使用5%次氯酸钠浸泡10?12min，用灭菌的蒸馏水冲洗7?8次，于2?4℃冰箱过夜；（2）枯草芽孢杆菌GB03菌液制备：配制溶菌肉汤LB液体培养基：按照氯化钠、胰蛋白胨和酵母粉的比例为1:2:1配制，溶剂为蒸馏水；调pH到7.2，高温为115?132℃灭菌，待冷却温度为20?35℃后，每100mL的LB液体培养基加入50?100μL的枯草芽孢杆菌GB03菌液，在转速为180?250r/min下，温度为25?30℃的恒温培养摇床上培养过夜后，测定菌液浓度为OD600为0.8?1.0时，取出备用；（3）种子菌液处理：将步骤（1）处理完成种子浸泡于枯草芽孢杆菌GB03菌液中5min?20min，然后将菌液倒出，处理完成的种子进行播种。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张金林，吴永娜，王锁民，吕昕培，李静，韩庆庆，包爱科，
申请(专利权)人：兰州大学，
类型：发明
国别省市：
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