一种复合微生物秸秆降解菌剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种复合微生物秸秆降解菌剂，其特征在于，包括：长柄木霉1.0×103-5.0×104cfu/mL，假单胞菌属菌株B6-155.0×108-1.0×1010cfu/mL。本发明专利技术所得复合微生物秸秆降解菌剂在20-25℃，15天左右就可使秸秆基本腐解，降解率可达58%。本发明专利技术微生物复合菌剂适应北方地区，能够在较低温度环境下，秸秆降解率高，并且具有菌体生长速率快，培养条件温和的特点。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及一种复合微生物秸秆降解菌剂，其特征在于，包括：长柄木霉1.0×103-5.0×104cfu/mL，假单胞菌属菌株B6-155.0×108-1.0×1010cfu/mL。本专利技术所得复合微生物秸秆降解菌剂在20-25℃，15天左右就可使秸秆基本腐解，降解率可达58%。本专利技术微生物复合菌剂适应北方地区，能够在较低温度环境下，秸秆降解率高，并且具有菌体生长速率快，培养条件温和的特点。【专利说明】一种复合微生物秸秆降解菌剂及其制备方法和应用
本专利技术涉及一种复合微生物秸杆降解菌剂，具体地说，涉及一种用于玉米等农作物秸杆的快速腐熟降解的菌剂。本专利技术还涉及所述复合微生物秸杆降解菌剂的制备方法以及应用。
技术介绍
我国是农业大国，每年产生的秸杆6亿吨以上，20世纪90年代后期以来，随着农作物单产提高，秸杆总量迅速增加，广大农民为赶农时、抢播种、图省事，多数地区就开始集中出现秸杆焚烧现象。大面积焚烧秸杆的现象不仅造成了极大的环境污染，而且浪费了宝贵的生物资源。环境中的微生物具有增殖速度快、功能丰富多样、适应性强等特点，应用微生物学方法腐解处理秸杆具有其他物理化学方法不可替代的优点，应用前景广阔。秸杆中纤维素结构及其复杂，单一微生物对纤维素的分解能力非常弱。由于分解秸杆的“三素酶”是多酶体系，酶组分之间存在着明显的协同作用，所以，要求多菌株的配合、相互补充，才能促进纤维素类物质的分解，尤其是细菌与真菌之间具有比较强的相互作用。纤维素分解菌与木质素分解菌对稻草和小麦的联合分解能力明显高于任何一个单一菌株。所以充分利用自然界多种微生物的协同关系，人工筛选构建能够产生多种纤维素酶的高效稳定菌株复合系，不仅能够解决环境污染问题，还能够为作物土壤提供大量的矿物质和有机质，改良土壤结构，促进农业生产。秸杆还田的作用归纳为:“当年增产，常年改土，灾年保苗，切实可行，简便有效”。国内现有的秸杆腐熟剂很多，但大都由于环境温度或菌体生长速度的限制而对秸杆的降解效果大打折扣，因此针对于北方低温环境而研发的复合菌剂非常必要。
技术实现思路
`本专利技术针对北方低温环境下玉米等农作物秸杆降解困难，降解时间长的问题，提供一种适合北方环境的复合微生物秸杆降解菌剂，促进秸杆的快速腐熟并起到改良土壤特性的目的。本专利技术从126株细菌、真菌中挑选的纤维素降解率、生长速度和酶活较高的菌株，长柄木霉(Trichoderma 1ngibrachiatum)和假单胞菌属(Pseudomonas sp.)菌株 B6-15,经过配比优化后组成微生物复合菌剂，用以促进低温环境下秸杆的快速降解。一种复合微生物秸杆降解菌剂，其组成为:长柄木霉1.0 X 103-5.0 X 104cfu/mL,假单胞菌属菌株B6-15 5.0XlO8-L OX 10lclcfu/mL。总菌数达到1.0X 108cfu/mL以上即可。优选地，所述复合微生物秸杆降解菌剂，其组成为:长柄木霉1.0 X 104-3.0 X 104cfu/mL,假单胞菌属菌株B6-15 L 0Χ109-8.0X109cfu/mL。更进一步优选，所述复合微生物秸杆降解菌剂，其组成为:长柄木霉2.0X104cfu/mL，假单胞菌属菌株B6-15 5.0X 109cfu/mL。本专利技术所述的长柄木霉(Trichoderma 1ngibrachiatum)为北京沃土天地生物科技有限公司所出售的产品；所述的假单胞菌属(Pseudomonassp.)菌株 B6-15,保藏号 CGMCC N0.5851。本专利技术还提供上述复合微生物秸杆降解菌剂的制备方法，包括如下步骤:I).斜面培养:将长柄木霉、假单胞菌属菌株B6-15两种原始菌种在无菌条件下分别接种于固体培养基表面，活化菌株；2).一级种子培养:将步骤I)活化的菌种在无菌条件下分别接种于液体培养基，150-180rpm摇床培养；3).混合发酵培养:将步骤2) —级种子接种于液体培养基中，进行复合菌剂摇床培养，得到复合微生物秸杆降解菌剂。上述制备方法中，在步骤I)中，将长柄木霉在15-38°C条件下接种于PDA固体培养基上培养3-5天；假单胞菌属菌株B6-15在15-30°C条件下接种于NA固体培养基上，培养2-3 天。在步骤2)中，长`柄木霉15_38°C条件下接种PDA液体培养基中摇床培养2_4天；假单胞菌属菌株B6-15在15-30°C条件下接种于NA液体培养基中摇床培养3_5天；在步骤3)中，接种量为液体培养基的体积的0.5-2%，优选1% ；在步骤3)中，所述混合发酵培养条件:温度15-25 °C ; 150_200rpm，优选160rpm ；培养3-5天。本专利技术所述PDA培养基成分表如下: 去皮马铃薯200g 葡萄糖20g蒸馏水1000mlpH6.0-6.5本专利技术所述NA培养基成分表如下:牛肉膏5g蛋白胨IOg NaCI5g蒸馏水1000mlpH7.0-7.2121.3 °C 灭菌 20min。本专利技术还提供了所述复合微生物秸杆降解菌剂在促进玉米等农作物秸杆腐熟、改良作物土壤特性方面的应用。具体方法是将复合微生物秸杆降解菌剂以2-3kg/亩洒于秸杆中，在环境温度20-25°C下进行快速腐熟。本专利技术所得复合微生物秸杆降解菌剂在20_25°C，15天左右就可使秸杆基本腐解，降解率可达58%。本专利技术微生物复合菌剂适应北方地区，能够在较低温度环境下，秸杆降解率高，并且具有菌体生长速率快，培养条件温和的特点。【具体实施方式】以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。实施例1复合微生物秸杆降解菌剂的组成:长柄木霉2.0X 1`04cfu/mL ；假单胞菌属菌株B6-15 5.0X 109cfu/mL。上述复合微生物秸杆降解菌剂的制备方法，包括如下步骤:I).斜面培养:将长柄木霉、假单胞菌属菌株B6-15两种原始菌种在无菌条件下分别接种于固体培养基表面，活化菌株；2).一级种子培养:将步骤I)活化的菌种在无菌条件下分别接种于液体培养基，160rpm摇床培养；3).混合发酵培养:将步骤2) —级种子接种于液体培养基中，进行复合菌剂摇床培养，得到复合微生物秸杆降解菌剂。上述制备方法中，在步骤I)中，将长柄木霉在30°C条件下接种于PDA固体培养基上培养4天；假单胞菌属菌株B6-15在30°C条件下接种于NA固体培养基上，培养3天。在步骤2)中，长柄木霉25°C条件下接种PDA液体培养基中摇床培养3天；假单胞菌属菌株B6-15在25°C条件下接种于NA液体培养基中摇床培养3天；在步骤3)中，接种量为液体培养基的体积的1% ；在步骤3)中，所述混合发酵培养条件:温度25°C ； 160rpm ;培养5天。实施例2复合微生物秸杆降解菌剂的组成:长柄木霉1.0X 104cfu/mL ；假单胞菌属菌株B6-15 1.0X 109cfu/mL。所述菌剂制备方法同实施例1。区别在于:在步骤I)中，将长柄木霉在15°C条件下接种于PDA固体培养基上培养5天；假单胞菌属菌株B6-15在15°C条件下接种于NA固体培养基上，培养3天。在步骤2)中，长柄木霉15°C条件下接种PDA液体培养基中摇床培养3天；假单胞菌属菌株B6-15在15°C条件下接种于NA液体本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种复合微生物秸秆降解菌剂，其特征在于，包括：长柄木霉?????????????????1.0×103?5.0×104cfu/mL，假单胞菌属菌株B6?15??????5.0×108?1.0×1010cfu/mL。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李少东，李季，彭生平，任莉，
申请(专利权)人：北京沃土天地生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：