一种碱性果胶酶PelN及其编码基因与应用制造技术

本发明专利技术公开了一种碱性果胶酶PelN及其编码基因与应用。所述PelN为序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质，具有碱性果胶酶活性，含有该蛋白编码基因的重组菌大肠埃希氏菌(Escherichia?coli)BL21（DE3）PelN，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为CGMCC?No.7166。实验证明，本发明专利技术所提供的蛋白质PelN，降解多聚半乳糖醛酸的酶活为4590—4950U/mg；热稳定性较好，在45℃保温120min的相对酶活仍在90%以上；作为碱性果胶酶的最适pH为9.8，最适温度为65℃。本发明专利技术所提供的蛋白质PelN、重组菌及碱性果胶酶生产方法为工业化大规模生产碱性果胶酶提供了有效途径。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种碱性果胶酶PelN及其编码基因与应用。
技术介绍
果胶是植物细胞壁的重要组成成分，包括原果胶，果胶酸和果胶酯酸。果胶物质的存在可以增加植物细胞壁的坚硬度，有利于维持植物的特定外形结构，但增加了对植物进行深加工的工业操作的难度。果胶酶是指能够分解果胶质的一类酶，普遍存在于自然界的高等植物和微生物中，是重要的工业酶制剂。碱性果胶酶(EC:4.2.2.2)是一类在碱性条件下，以反式消去作用断开果胶质主链，产生不饱和的寡聚半乳糖醛酸的酶，在纺织工业的麻类脱胶、棉织品精炼等领域内有着广泛的应用。相比于传统的高碱、高温处理手段，使用碱性果胶酶不仅对果胶质有较好的去除作用，对天然纤维素纤维损伤较小，而且可以减少材料消耗和环境负担，为纺织工业开辟了一条绿色清洁之路。目前，碱性果胶酶的广泛应用已受到生产成本和酶稳定性等因素的制约。国内筛选得到的碱性果胶酶野生产酶菌株的生产水平参差不齐，且野生菌的生产能力距离工业应用的需求还很远。因此，筛选稳定性高的碱性果胶酶，并构建生产工艺简单、产量高的工程菌是提高碱性果胶酶工业化水平的重点。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种碱性果胶酶PelN本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蛋白质，是如下（a）或（b）的蛋白质：（a）由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（b）将序列表中序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有碱性果胶酶功能的由序列表序列1衍生的蛋白质。

【技术特征摘要】
1.一种蛋白质，是如下(a)或(b)的蛋白质: (a)由序列表中序列I所示的氨基酸序列组成的蛋白质； (b)将序列表中序列I的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有碱性果胶酶功能的由序列表序列I衍生的蛋白质。2.权利要求1所述蛋白质的编码基因； 所述基因可为如下I)或2)或3)的DNA分子: 1)序列表中序 列2的第7位至第1434位所示的DNA分子； 2)在严格条件下与I)限定的DNA序列杂交且编码具有碱性果胶酶活性蛋白的DNA分子; 3)与I)或2)限定的DNA序列具有90%以上同源性且编码具有碱性果胶酶活性蛋白的DNA分子。3.含有权利要求2所述基因的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。4.根据权利要求3所述的重组表达载体或重组菌，其特征在于: 所述重组表达载体是将所述基因插入载体pET22b的NcoI和XhoI位点间得到的；所述重组菌是将所述重组表达载体导入大肠埃希氏菌(Escherichia coli)得到的；具体可为大肠埃希氏菌(Escherichia coli)BL21 (DE3)PelN，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为CGMCC N0.7166。5.权利要求1所述蛋白质在降解果胶或制备具碱性果胶酶活性的产品中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于:所述果胶为多聚半乳糖醛酸。7.根据权利要求5或6所述的应用，其特征在于:所述降解的pH值为7.1— 11.0，或7.6—10.4，或 8.1—10.4，或 8.6—10.4，或 9.0—10.4，或 9.4—...

【专利技术属性】
技术研发人员：李小曼，王辉林，宋江宁，马延和，
申请(专利权)人：中国科学院天津工业生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：