与调控蛋白PhaR相关物质的新用途制造技术

本发明专利技术公开了与调控蛋白PhaR相关物质的新用途。该新用途为与调控蛋白PhaR相关物质在制备油水乳状液中的应用，所述与调控蛋白PhaR相关物质为A1-A6中的任一种：所述A1为由调控蛋白PhaR包涵体、PHA合成酶PhaC包涵体和PHA降解酶PhaZ包涵体组成的产品；所述A2为由所述调控蛋白PhaR包涵体和所述PHA合成酶PhaC包涵体组成的产品；所述A3为所述调控蛋白PhaR包涵体和所述PHA降解酶PhaZ包涵体组成的产品；所述A4为由所述调控蛋白PhaR包涵体；所述A5为由调控蛋白PhaR和PHA合成酶PhaC组成的产品；所述A6为所述调控蛋白PhaR。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及与调控蛋白PhaR相关物质的新用途。
技术介绍
生物表面活性剂是一大类通过微生物得到两亲性小分子物质(Mulligan等，Environ Pollut, 133 (2005), 183-98 ；Khire 等，Adv Exp Med Biol，672 (2010)，146-57 ；Morita 等，Biotechnol Appl Biochem, 53 (2009)，39-49)，一般包括低分子量的糖脂、脂肽、磷脂、中性类脂等和高分子量的含脂聚合物，如脂多糖(glycolipids)、脂蛋白(Iipopeptides或lipoproteins)、多糖-蛋白-脂肪酸复合物等(Syldatk等，ZNaturforsch G,40(1985) , 61-7 ；0gawa 等，Biosci Biotechnol Biochem,64(2000),2466-8 ;Morita 等，J Biosci Bioeng，104 (2007)，78-81 ;Wicke 等，J Nat Prod, 63 (2000),621-6)。它们的分子结构由两部分组成，一部分是疏油亲水的极性基团，如单糖、聚糖、氨基酸和磷酸基等，另一部分是由疏水亲油的碳氢链组成的非极性基团，如饱和或非饱和的脂肪醇及脂肪酸等。正是由于具有这种既亲油又亲水的两亲性分子结构，生物表面活性剂才能显著降低界面张力，或吸附在界面上形成紧密的定向排列来改变界面的亲水/亲油性能，使油/水两相得以很好的分散。其中最为代表的是糖脂类(Mata-Sandoval等，Microbiol Res,155(2001),249-56 ；Guilmanov 等，Biotechnol Bioeng,77(2002),489-94 ；)。聚轻基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoic acids,简称PHA)是许多微生物在非平衡生长条件下合成的一种细胞内碳源和能源的忙藏性聚合物(Anderson等，MicrobialRev.，54 (1990) 4 50-472 ；Lee 等，Biotech.Bioeng.，49 (1996) 1-14)。研究发现，自然条件下的PHA在细菌体内是以不溶性脂肪颗粒(granule)的形式存在。PHA分子形成疏水核心，颗粒表面包裹着一层特殊的单层膜结构，由颗粒结合蛋白(PhaP/Phasin)、调控蛋白(PhaR)、PHA合成酶(PhaC)、PHA降解酶(PhaZ)和单层磷脂膜等组成(Steinbuchel等，Can.J.Microbiol.41 (1995) 94-105 ；York 等，J.Bacteriol.183 (2001) 2394-2397)。PHA降解酶，PhaZ起着将PHA大分子降解成小分子寡聚体的作用(Jendrossek等，Appl.Microbiol.Biotechnol., 46 (1996) 451-463 ；Briese 等，J.Environ.Polym.Degrad.,2(1994)75-87)。调控蛋白，PhaR存在两种结合区域，DNA结合区域和颗粒结合区域(Maehara 等，J.Bacteriol.184(2002)3992-4002)。DNA 结合区域可以特异性的结合到 phaR基因和phaP基因上游富含TGC的区域，从而调控PhaP蛋白和其自身的表达。而疏水的颗粒结合区域能通过疏水作用结合在PHA颗粒表面。和PhaP —样，通过PhaR和其他疏水材料的体外结合试验表明PhaR的疏水性结合是非特异性的(Yamashita等，Biomacromolecules,7 (2006) 2449-2454)。PHA合成酶，PhaC是PHA生物合成过程中的关键酶。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供与调控蛋白PhaR相关物质的新用途。本专利技术所提供的与调控蛋白PhaR相关物质的新用途为1)-4)中的任一种:I)与调控蛋白PhaR相关物质在制备油水乳状液中的应用，所述与调控蛋白PhaR相关物质为A1-A6中的任一种:所述Al为由调控蛋白PhaR包涵体、PHA合成酶PhaC包涵体和PHA降解酶PhaZ包涵体组成的产品；所述A2为由所述调控蛋白PhaR包涵体和所述PHA合成酶PhaC包涵体组成的产品;所述A3为所述调控 蛋白PhaR包涵体和所述PHA降解酶PhaZ包涵体组成的产品；所述A4为由所述调控蛋白PhaR包涵体；所述A5为由调控蛋白PhaR和PHA合成酶PhaC组成的产品；所述A6为所述调控蛋白PhaR。2)与调控蛋白PhaR相关物质在制备乳化剂中的应用，所述与调控蛋白PhaR相关物质为A1-A6中的任一种:所述Al为由调控蛋白PhaR包涵体、PHA合成酶PhaC包涵体和PHA降解酶PhaZ包涵体组成的产品；所述A2为由所述调控蛋白PhaR包涵体和所述PHA合成酶PhaC包涵体组成的产品;所述A3为所述调控蛋白PhaR包涵体和所述PHA降解酶PhaZ包涵体组成的产品；所述A4为由所述调控蛋白PhaR包涵体；所述A5为由调控蛋白PhaR和PHA合成酶PhaC组成的产品；所述A6为所述调控蛋白PhaR。3)制备油水乳状液的方法，包括将水相和油相等体积混合进行乳化制备油水乳状液的步骤，所述水相是与调控蛋白PhaR相关物质的水溶液；所述与调控蛋白PhaR相关物质为A1-A6中的任一种:所述Al为由调控蛋白PhaR包涵体、PHA合成酶PhaC包涵体和PHA降解酶PhaZ包涵体组成的产品；所述A2为由所述调控蛋白PhaR包涵体和所述PHA合成酶PhaC包涵体组成的产品;所述A3为所述调控蛋白PhaR包涵体和所述PHA降解酶PhaZ包涵体组成的产品；所述A4为由所述调控蛋白PhaR包涵体；所述A5为由调控蛋白PhaR和PHA合成酶PhaC组成的产品；所述A6为所述调控蛋白PhaR ；所述水相满足I)-6)的条件:I)所述水相为所述Al的水溶液，所述Al的水溶液的蛋白质总浓度为3000 μ g/ml ；2)所述水相为所述A2的水溶液，所述A2的水溶液的蛋白质总浓度为3000 μ g/ml ；3)所述水相为所述A3的水溶液，所述A3的水溶液的蛋白质总浓度为3000 μ g/ml ；4)所述水相为所述A4的水溶液，所述A4的水溶液的蛋白质浓度为3000 μ g/ml ；5)所述水相为所述A5的水溶液，所述A5的水溶液的蛋白质总浓度为500 μ g/ml ；6)所述水相为所述A6的水溶液，所述A6的水溶液的蛋白质浓度为500 μ g/ml。4)乳化剂，为A1-A3、A5中的任一种产品:所述Al为由调控蛋白PhaR包涵体、PHA合成酶PhaC包涵体和PHA降解酶PhaZ包涵体组成的产品；所述A2为由所述调控蛋白PhaR包涵体和所述PHA合成酶PhaC包涵体组成的产品;所述A3为所述调控蛋白PhaR包涵体和所述PHA降解酶PhaZ包涵体组成的产品；所述A5为由调控蛋白PhaR和PHA合成酶PhaC组成的产品。上述新用途中，所述Al、所述A2、所述A3和所述A5的各组分可单独包装，也可混合在一起。上述新用途中，所述乳化剂是使油和水形成乳状液的物质。所述调控蛋白PhaR包涵体、PHA合成酶PhaC包涵体或PHA降解酶本文档来自技高网...

【技术保护点】
与调控蛋白PhaR相关物质在制备油水乳状液中的应用，所述与调控蛋白PhaR相关物质为A1?A6中的任一种：?所述A1为由调控蛋白PhaR包涵体、PHA合成酶PhaC包涵体和PHA降解酶PhaZ包涵体组成的产品；?所述A2为由所述调控蛋白PhaR包涵体和所述PHA合成酶PhaC包涵体组成的产品；?所述A3为所述调控蛋白PhaR包涵体和所述PHA降解酶PhaZ包涵体组成的产品；?所述A4为由所述调控蛋白PhaR包涵体；?所述A5为由调控蛋白PhaR和PHA合成酶PhaC组成的产品；?所述A6为所述调控蛋白PhaR。

【技术特征摘要】
1.与调控蛋白PhaR相关物质在制备油水乳状液中的应用，所述与调控蛋白PhaR相关物质为A1-A6中的任一种: 所述Al为由调控蛋白PhaR包涵体、PHA合成酶PhaC包涵体和PHA降解酶PhaZ包涵体组成的产品； 所述A2为由所述调控蛋白PhaR包涵体和所述PHA合成酶PhaC包涵体组成的产品； 所述A3为所述调控蛋白PhaR包涵体和所述PHA降解酶PhaZ包涵体组成的产品； 所述A4为由所述调控蛋白PhaR包涵体； 所述A5为由调控蛋白PhaR和PHA合成酶PhaC组成的产品； 所述A6为所述调控蛋白PhaR。2.与调控蛋白PhaR相关物质在制备乳化剂中的应用，所述与调控蛋白PhaR相关物质为A1-A6中的任一种: 所述Al为由调控蛋白PhaR包涵体、PHA合成酶PhaC包涵体和PHA降解酶PhaZ包涵体组成的产品； 所述A2为由所述调控蛋白PhaR包涵体和所述PHA合成酶PhaC包涵体组成的产品； 所述A3为所述调控蛋白PhaR包涵体和所述PHA降解酶PhaZ包涵体组成的产品； 所述A4为由所述调控蛋白PhaR包涵体； 所述A5为由调控蛋白PhaR和PHA合成酶PhaC组成的产品； 所述A6为所述调控蛋白PhaR。3.制备油水乳状 液的方法，包括将水相和油相等体积混合进行乳化制备油水乳状液的步骤，所述水相是与调控蛋白PhaR相关物质的水溶液； 所述与调控蛋白PhaR相关物质为A1-A6中的任一种: 所述Al为由调控蛋白PhaR包涵体、PHA合成酶PhaC包涵体和PHA降解酶PhaZ包涵体组成的产品； 所述A2为由所述调控蛋白PhaR包涵体和所述PHA合成酶PhaC包涵体组成的产品； 所述A3为所述调控蛋白PhaR包涵体和所述PHA降解酶PhaZ包涵体组成的产品； 所述A4为由所述调控蛋白PhaR包涵体； 所述A5为由调控蛋白PhaR和PHA合成酶PhaC组成的产品； 所述A6为所述调控蛋白PhaR ； 所述水相满足I)-6)的条件:1)所述水相为所述Al的水溶液，所述Al的水溶液的蛋白质总浓度为3000μg/ml ；2)所述水相为所述A2的水溶液，所述A2的水溶液的蛋白质总浓度为3000μg/ml ；3)所述水相为所述A3的水溶液，所述A3的水溶液的蛋白质总浓度为3000μg/ml ；4)所述水相为所述A4的水溶液，所述A4的水溶液的蛋白质浓度为3000μg/ml ；5)所述水相为所述A5的水溶液，所述A5的水溶液的蛋白质总浓度为500μg/ml ；6)所述水相为所述A6的水溶液，所述A6的水溶液的蛋白质浓度为500μg/ml。4.根据权利要求1或2所述的应用、权利要求3所述的方法，其特征在于:所述调控蛋白PhaR是如下al)、a2)或a3)的蛋白质: al)氨基酸序列如SEQ ID N0.2所示的蛋白质； a2)在SEQ ID N0.2的第I位前加入6个组氨酸得到的融合蛋白；a3)将SEQ ID N0.2经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基得到的具有氨基酸序列如SEQ ID N0.2所示的蛋白质相同活性的突变体蛋白； 所述PHA合成酶PhaC是如下bl)、b2)或b3...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈国强，刘明明，马红坤，
申请(专利权)人：清华大学，
类型：发明
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