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一种生产紫杉二烯的酵母菌及构建方法技术

技术编号:8797525 阅读:240 留言:0更新日期:2013-06-13 03:41
本发明专利技术公开了一种生产紫杉二烯的酵母菌及构建方法。一种生产紫杉二烯的酵母菌的构建方法的步骤为:(1)载体SyBE_001173的构建;(2)载体SyBE_001187的构建;(3)将所述载体SyBE_001173、SyBE_001187导入到酿酒酵母W303-1A或酿酒酵母BY4742中,得到生产紫杉二烯的酵母菌。本发明专利技术的生产紫杉二烯的酵母菌相对于现有技术更为环保、成本低廉,为紫杉二烯的生产提供了一种可行的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及。
技术介绍
紫杉醇是一种有效的抗癌药物,传统的获得方法包括为对红豆杉进行植物提取,但红豆杉中不仅含量极低,且大量砍伐红豆杉树木为环境不友好行为;植物细胞培养的方法虽然解决了大规模砍伐红豆杉的问题,却因植物细胞生长周期较长,故获得紫杉醇的效率也并不高;化学合成法不仅合成步骤复杂,且每一步收率不高,若应用此法进行大规模生产势必产生大量污染废物,且成本昂贵。人类 健康、能源、环境等领域的重大需求也牵引着合成生物学的迅猛发展。将基因元件(启动子、转录调控区域、核糖体结合位点、开放阅读框、终止子等)依据工程化目标需要,有机重构和连接起来,便形成了功能基因模块。通过对已有生物网络加以利用,同时引入新的功能基因模块,表达出天然细胞不能合成或含量极低的产物。美国Croteau R教授的实验室在紫杉醇生物合成的研究中作了大量的、卓有成效的工作,经过十几年的努力,紫杉醇大部分生物合成途径已经明确。紫杉二烯作为紫杉醇合成途径中的关键前体,其产量的提升具有十分重大的意义。华盛顿州立大学的Croteau教授是最早从事紫杉醇合成途径解析和相关基因克隆工作的,从上世纪90年代开始相继克隆了紫杉醇本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种紫杉二烯合酶基因,其特征是它是序列表SEQ?ID?NO:11所述的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种紫杉二烯合酶基因,其特征是它是序列表SEQ ID NO: 11所述的核苷酸序列。2.权利要求1的一种紫杉二烯合酶基因编码的蛋白质,其特征是它是序列表SEQIDNO: 12所述的氨基酸序列。3.—种生产紫杉二烯的酵母菌的构建方法,其特征是包括如下步骤: (1)载体SyBE_001173的构建: ①将启动子、GGPP合酶基因、终止子采用OE-PCR方法拼接起来,得到两端包含HindIII和Apa I位点的片段,连接入游离型载体PRS425 ; ②将启动子、序列表SEQID NO: 11所示的紫杉二烯合酶基因、终止子采用OE-PCR方法拼接起来,得到两端包含Sac I和HindIII位点的片段,连接入步骤①获得的载体,得到载体SyBE_001173 ; (2)载体SyBE_001187的构建: ①将酵母组成型启动...

【专利技术属性】
技术研发人员:元英进闫慧芳丁明珠贾云婧
申请(专利权)人:天津大学
类型:发明
国别省市:

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