一种杨树花口服液的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种杨树花口服液的制备方法，属于兽药技术领域。其包括下述步骤：（1）将杨树花放入提取罐中，加入杨树花质量4-6倍的水，搅拌并升温至45-50℃；（2）在提取罐中加入杨树花质量3-7%的纤维素酶，调节pH值至5.0-5.5，45-50℃下酶解90-120min；（3）将酶解液过滤，收集滤液，即得杨树花口服液。本发明专利技术利用纤维素酶解技术提取杨树花，开发了一种提取杨树花的新工艺，大大缩短了提取时间、降低了热能耗、减小了工艺用水量，达到了节能减排、提高工作效率和提取率的目的，具有良好的社会和经济效益。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及兽药
，尤其是。
技术介绍
杨树花系杨柳科植物加拿大杨柳populus canadensis Mench.花序,富含黄酮、生物碱、有机酸、维生素、酚类等成分，具有健脾养胃、化湿止痢、涩肠止泻、清热解毒之功效。杨树花口服液被收载于2010版《中国兽药典》二部，临床多用于猪、羊、禽下痢。现代药理学研究表明杨树花具有抗菌、解热抗炎、止痢止泻等作用。传统杨树花口服液是通过浸泡、力口热煮沸、煎煮、浓缩等方法制备而成，工艺时间长，热能消耗高、工艺用水消耗大、提取率低。每生产I吨口服液从浸泡、煎煮、浓缩、沉淀、过滤到分装前需要十几个多小时；煎煮、浓缩需要消耗热蒸汽3-5吨；药材煎煮2次，需要消耗纯化水8吨(按饮用水标准需要40吨)，浓缩需要用水10吨；有效成分黄酮含量最高为0.132%。中药的有效成分大多储存在于细胞壁纤维素构成的框架中，被纤维素包裹在内，提取其有效成分，必须先打破其细胞壁的纤维素框架使有效成分充分溶解出来。用于中药提取研究较多的是纤维素酶，纤维素则是由P-D-葡萄糖以1，4-0葡萄糖苷键连接，用纤维素酶酶解可以破坏3-D-葡萄糖键，使植物细胞壁破坏，有利于对有效成分的提取。近年来，国内采用纤维素酶提取中药有效成分的报道不断出现。吕卫明等介绍采用酶水解法从黄芩中提取分离黄芩素达75.67%，收率为2.46%。有人在纤维素酶的作用下，从葛根中提取总黄酮，收率提高了 13%。在三七提取过程中，用纤维素酶酶解作用破坏细胞壁，三七总皂昔提取率提高23.5%。此外，上海中药一厂首先应用酶法成功地制备了生脉饮口服液。与传统提取方法比较纤维素酶解法具有提高收率、节约能源，减少溶剂使用量的等优势，但至今未见采用纤维素酶解提取杨树花的报道。
技术实现思路
本专利技术提供，利用纤维素酶解技术提取杨树花，开发了一种提取杨树花的新工艺，大大缩短了提取时间、降低了热能耗、减小了工艺用水量，达到了节能减排、提高工作效率和提取率的目的，具有良好的社会和经济效益。，包括下述步骤:(1)将杨树花放入提取罐中，加入杨树花质量4-6倍的水，搅拌并升温至45-50°C； (2)在提取罐中加入杨树花质量3-7%的纤维素酶，调节pH值至5.0-5.5，45_50°C下酶解 90-120min ； (3)将酶解液过滤，收集滤液，即得杨树花口服液。步骤(2)中用10-50%的乳酸溶液或10-50%的氢氧化钠溶液调节pH值。步骤(2)中纤维素酶的质量为杨树花质量的4%。步骤(2)中酶解时间为120min。其用法用量为:马、牛50 IOOml ;羊、猪10 20ml ;兔、禽I 2ml。酶添加量、酶解温度、酶解时间、溶剂pH值等单因素对黄酮提取率影响试验: 1.纤维素酶活性检测 纤维素酶是一种重要的生物复合酶，主要由外切￠-葡聚糖酶、内切￠-葡聚糖酶和^ -葡萄糖苷酶等组成，还有很高活力的木聚糖酶。纤维素和半纤维素构成了植物细胞壁构架，杨树花有效成分存在于有纤维素和半纤维素构成的框架内。纤维素酶具有专一性，纤维素酶分解纤维素，木聚糖酶分解半纤维素，葡聚糖酶将纤维素和半纤维素分解产物继续分解成葡萄糖。杨树花在纤维素酶和木聚糖酶作用下细胞壁充分分解释放出杨树花有效成分。采用分光光度法测定纤维素酶和木聚糖酶活力。检测纤维素酶中纤维素酶> 30000U/g，木聚糖酶> 100000U/g，P -葡聚糖酶≥120000U/g。2、标准溶液配制和标准曲线绘制 2.1芦丁对照品溶液的制备: 资料显示黄酮检测以芦丁为标准对照品。准确称取芦丁对照品10mg，置于50ml容量瓶中，加30%的乙醇30ml，超声震荡使之溶解，冷却至室温，并稀释至刻度，摇匀得浓度为200i! g/ml的芦丁对照品溶液，冷藏，备用。2.2吸收波长的选择: 对照品测定波长的确定:取对照品溶液1ml，按标准曲线项下的方法进行，在400 700nm波长范围内扫描，结果在500nm波长处为最大吸收。样品测定波长的确定:取样品的乙醇提取液1ml，按标准曲线项下的方法进行，在400 700nm波长范围内扫描，结果在500nm波长处为最大吸收。2.3标准曲线绘制: 精密称取芦丁对照品溶液0，1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml分别至25ml容量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.3ml，摇匀，放置6min，加入10%硝酸铝溶液0.3ml，放置6min，加入Imol氢氧化钠溶液4ml，分别用30%的乙醇定容，摇匀，放置15min，置比色皿中，在500nm波长处测定吸光度。以吸光度A为纵坐标，浓度C为横坐标，绘制标准曲线(见附图说明图1)。经回归统计，得标准曲线方程:A=0.0486+0.0002 R2=0.9996。浓度在0-400 u g/ml范围内R的平方达到0.9996，线性关系良好。3、单因素影响试验 3.1纤维素酶添加量对杨树花口服液中黄酮提取率的影响(A因素) 取杨树花7份，每份IOOg,纤维素酶添加量分别为2g、3g、4g、5g、6g、7 g、8 g,酶解温度控制在45°C、酶解pH值控制在5.0条件下，酶解时间控制在90 min,收集酶解液，依照检测杨树花口服液中总黄酮含量的测定方法检测总黄酮含量，纤维素酶添加量对杨树花口服液中黄酮提取率的影响见图2。由图2可知，酶添加量单因素影响试验结果显示，取IOOg杨树花制备杨树花口服液，随着酶添加量增加，口服液中黄酮提取率升高，当酶添加到3g时样品中黄酮提取率，比添加2g的提取率大幅度升高，添加到4-8g时黄酮提取率一直提高，添加到7g以上时黄酮提取率提高的幅度变小，综合生产成本与杨树花中黄酮提取率等多方面因素，取IOOg杨树花制备口服液，添加3-7g纤维素酶比较适宜，优选为4g。3.2酶解温度对杨树花口服液中黄酮提取率的影响(B因素) 取杨树花5份，每份100g，纤维素酶添加量为4g，酶解温度分别为35°C、40°C、45°C、50°C >55°C，酶解pH值控制在5.0等条件下，酶解时间控制在90 min,收集酶解液，依照检测杨树花口服液中总黄酮含量的测定方法检测总黄酮含量，酶解温度对杨树花口服液中黄酮提取率的影响见图3。由图3可知，在相同酶添加量、酶解时间和酶解pH条件下，酶解温度单因素影响试验结果显示，酶解温度从35°C到45°C，随温度升高杨树花口服液中黄酮提取率由0.102%升高到0.154%，酶解温度升高50°C时提取率0.144%，当酶解温度达到55°C时提取率下降到0.016%，由此看来，酶解温度在纤维素酶法提取中影响较大，适宜提取的温度在45°C到50°C之间。酶解时间对杨树花口服液中黄酮提取率的影响(C因素) 取杨树花500g，分成5份，每份100g，纤维素酶添加量为4g，酶解温度45°C，酶解时间分别为30min、60 min,90 min、120 min、150 min，酶解pH值控制在5.0，酶解时间到，收集酶解液，依照检测杨树花口服液中总黄酮含量的测定方法检测总黄酮含量，酶解时间对杨树花口服液中黄酮提取率的影响见图4。由图4可知，在相同酶添加量、酶解温度和酶解pH条件下，酶解时间单因素影响试验结果显示:从酶解30min时间开始取样，随酶解时间延长提取本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种杨树花口服液的制备方法，其特征在于包括下述步骤：（1）将杨树花放入提取罐中，加入杨树花质量4?6倍的水，搅拌并升温至45?50℃；（2）在提取罐中加入杨树花质量3?7%的纤维素酶，调节pH值至5.0?5.5,?45?50℃下酶解90?120min；（3）将酶解液过滤，收集滤液，即得杨树花口服液。

【技术特征摘要】
1.一种杨树花口服液的制备方法，其特征在于包括下述步骤:(1)将杨树花放入提取罐中，加入杨树花质量4-6倍的水，搅拌并升温至45-50°C； (2)在提取罐中加入杨树花质量3-7%的纤维素酶，调节pH值至5.0-5.5，45_50°C下酶解 90-120min ； (3)将酶解液过滤，收集滤液，即得杨树花口服液。2.根据权利要求1所述的杨树花口服液的制备方法，其特征在于所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：惠孝鑫，赵凤玲，冯继宗，
申请(专利权)人：河北康利动物药业有限公司，
类型：发明
国别省市：