本发明专利技术涉及一种具有标记位点且能显著提高鲤鱼体重的杂交方法。本发明专利技术提供一种能显著提高鲤鱼体重的杂交方法，具体方案为选用黄河鲤父本与建鲤母本进行杂交。根据分析多态位点与体重和组合的关联，发现鲤IGF2R9#126号位点存在G到A的突变，这种突变是杂合子，且只在Hj和Jj组合中发现（n=30/每个组合），并且这种突变只在Hj组合显示出体重的提高，由此可知选用黄河鲤父本与建鲤母本进行杂交得到的鲤鱼新苗体重显著增加。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及。
技术介绍
2008年，中国淡水鱼养殖产量达到1836.9万吨，其中，鲤235.1万吨，占12.8%。鲤鱼2010年产量253.85万吨，可以看出，鲤鱼产业在我国，乃至世界上占有举足轻重的地位。因此，鲤鱼生产性能的提高对产业的发展有重要的意义。建鲤和黄河鲤杂交具有杂种优势，并发现它们的正交后代具有较高的特殊配合力。分子育种，分子设计育种已应用于良种选育，包括基于分子标记的配对繁殖技术、遗传参数评估等。而通过分子标记来研究杂种优势，并加以利用成为可行的手段。2012年已成功获得鲤IGF2a基因序列，并发现IGF2a3#引物检测到的多态性与种质特异性有关(Shengyan Su, Zaijie Dong, Zhengyuan Liang, Junchao Ming, Jiangqi QuPao Xu, Xinhua Yuan.Molecular cloning and single nucleotide polymorphismanalysis of IGF2a genes in the common carp (Cyprinus carpio).Genetic molecularresearch, 2012, 11 (2):1327-1340.)。因此，通过研究IGF2aDNA序列的多态性来分析建鲤和黄河鲤的杂种优势，由此研究出能显著提高鲤鱼体重的杂交方法。
技术实现思路
本专利技术提供。具体方案如下:选用黄河鲤父本与建鲤母本进行杂交，见专利申请文件(201110285312.8);待后代长至 体重为75g左右时，进行PIT标记，同时测量每条鱼的体重，并剪尾鳍，放置于已装酒精的离心管中，每个组合30条鱼。然后根据TaKaRa的DNA提取试剂盒3.0提取采集样本的DNA。通过克隆鲤鱼IGF2a9#引物进行PCR扩增，PCR产物直接送测序公司进行测序，根据测序结果，分析每条鱼的IGF2a9#引物所扩增区域的单核苷酸多态性，根据得到的多态位点分析其与不同组合体重之间的关联。有益效果根据分析多态位点与体重和组合的关联，发现鲤IGF2R9#126号位点存在G到A的突变，并且这种突变是杂合子，且只在Hj和Jj组合中发现(n=30/每个组合)，并且这种突变只在Hj组合显示出体重的提高，由此可知选用黄河鲤父本与建鲤母本进行杂交得到的鲤鱼新苗体重显著增加。附图说明图1 IGF2a9#引物检测到的建鲤和黄河鲤纯繁和杂交组合的126号位点的多态性A此位点多态性与体重的关联分析BI此位点的野生型测序图B2此位点的杂合型测序字母不同表示差异显著，体重单位为g。具体实施例方式下面结合实施例对本专利技术作进一步说明。本专利技术中的亲本来源为中国水产科学研究院淡水渔业研究中心的黄河鲤(Cyprinus carpio haematopterus Temminck et Schlegel)父本与建鲤(C.carpio var.jan)母本。实施例1 鲤鱼杂交优势种群的筛选(I)生产建鲤(J或j)、黄河鲤(H或h)自交和正反交后代(其中大写字母表示父本，小写字母表示母本)，共计4个组合:Jj，Jh，Hh，Hj。通过人工繁殖方式控制繁殖时间在一天之内，通过网箱保证·每个家系的隔离。养殖一周后，控制每个网箱的数量为100条左右，养殖一个月后，换40目的网箱养殖；(2)当鲤鱼养殖到体重达75 g左右时，每个组合随机选取50条鱼，使用丁香油麻醉，然后进行PIT标记(具体方法同专利文件ZL200710191251)，测量体重，并记录。同时剪尾鳍放置于已装入酒精的2mL离心管中进行离心去杂，记录好离心管的标号，并与PIT标记对应；(3)将在酒精中保存的鱼尾鳍，采用TaRaKa DNA提取试剂盒3.0抽提DNA，并通过检测0D260/0D280的方法测定提取浓度和内参基因GAPDH扩增PCR的方法检测质量。待质量合格后，用表I中引物扩增PCR，并送到Introgen公司测序。PCR 反应体系:cDNA 模板 2 μ L，上下游引物各 2 μ L，dNTP Mixture (IOmMeach) 5 μ L，MgCl2 (25mM) 6 μ L，10 X PCR buffer 8 μ L, rTaq 酶(5U/ μ L) 0.5 μ L，加水至总体积 50yL。PCR 反应参数:94°C 5min ；94°C 30S, 56/60° C 30S，72°C 30S，35 个循环；72°C7min, 4°C保存。PCR产物经2%的琼脂糖凝胶电泳检测。实验用到的引物及其相关信息见表I。表1 PCR引物及其特征本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种具有标记位点且能显著提高鲤鱼体重的杂交方法，其特征在于：选用黄河鲤父本与建鲤母本进行杂交。
【技术特征摘要】
1.一种具有标记位点且能显著提高鲤鱼体重的杂交方法，其特征在于:选用黄河鲤父本与建鲤母本进行杂交。2.如权利要求1所述的具有标记位点且...
【专利技术属性】
技术研发人员：张成锋，苏胜彦，董在杰，朱文彬，袁新华，徐跑，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院淡水渔业研究中心，
类型：发明
国别省市：
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