一种非洲菊纯合体植株的选育方法技术

本发明专利技术提供一种非洲菊纯合体植株的选育方法，属于生物技术领域。该方法通过花蕾选择、低温处理和消毒，剥取胚珠接入同一种培养基中同步进行愈伤组织诱导、幼芽分化和继代培养，将初步选择的单倍体植株进行染色体加倍，并初步选择已加倍株系进行扩繁和生根培养，田间株系内杂交，再次选择得到优良纯合体植株。本发明专利技术只用一种培养基进行胚珠的愈伤组织诱导、幼芽分化和继代增殖培养，简化了组培流程；采用室内间接鉴定和田间直接鉴定相结合的方法，省略了染色体倍性鉴定步骤，避免了单倍体植株在获取和加倍过程中由于存在嵌合体问题，造成基因型不纯合的难题，能简便快速选育和繁殖出非洲菊纯合体植株，为新品种选育提供了性状优良、稳定的自交系。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及，属于生物

技术介绍
非洲菊(Gerbera jamesonil Bolus)又名扶郎花,菊科大丁草属多年生草本花丼，为世界五大鲜切花之一，可用作切花生产或盆栽观赏，全世界广泛分布。因其花色绚丽，花朵硕大，花姿优美以及其特有的文化内涵深受广大消费者青睐。目前，生产中迫切需要耐低温、耐弱光、抗病虫害的优质、高产非洲菊新品种。自交系间杂种的优势比品种间杂种优势大，而非洲菊为典型的异花授粉作物，由于长期无性繁殖，保存着基因型的高度杂合性，其性状遗传极为复杂。为了克服非洲菊品种的杂合状态，充分利用杂种优势，排除显隐性的干扰，提高选择的准确性，必须通过人工控制授粉，强迫自交，提高亲本的纯合性。通常情况下，要获得纯合的自交系，需进行多代(4 6代)，甚至10代以上的自交，花费6 7年甚至8 9年的时间。现有技术中通过花粉(花药)或未授粉子房(或胚珠)培养可得单倍体植株，经染色体加倍成为纯系，可缩短纯合体的选育时间。在许多植物中，花药或花粉培养往往是获得单倍体植株的主要途径。但由于非洲菊花器构造上的特殊性(异花授粉且在花发育过程中出现雄蕊败育)，导致花粉或花药取材困难，灭本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种非洲菊纯合体植株的选育方法，包括以下步骤：A、外植体的选择与预处理①选择花序直径为3～4cm，舌状花长于萼片1～1.5cm的F1代杂交种花蕾；②低温处理，剪切所述的花蕾的花梗，留花梗长为4～5cm，插入装有自来水的瓶中，放入3～6℃的冰箱中低温处理3～7天；③低温处理后的花蕾进行灭菌处理，将经灭菌处理的花蕾在解剖镜下剥取外轮舌状花的胚珠作为外植体；B、愈伤组织诱导及幼芽分化将步骤A剥取的胚珠接入下述培养基中：MS基本培养液先在温度为25℃±2℃，黑暗培养15天，再转换在光照强度为1500lx～2000lx，光照时间为10h/d～12h/d，温度为25℃±2℃的条件下，同步进行愈伤组织诱导和...

【技术特征摘要】
1.一种非洲菊纯合体植株的选育方法，包括以下步骤: A、外植体的选择与预处理 ①选择花序直径为3 4cm，舌状花长于萼片I 1.5cm的Fl代杂交种花蕾； ②低温处理，剪切所述的花蕾的花梗，留花梗长为4 5cm，插入装有自来水的瓶中，放入3 6°C的冰箱中低温处理3 7天； ③低温处理后的花蕾进行灭菌处理，将经灭菌处理的花蕾在解剖镜下剥取外轮舌状花的胚珠作为外植体； B、愈伤组织诱导及幼芽分化 将步骤A剥取的胚珠接入下述培养基中: MS基本培养液 6-苄胺基嘌呤0.3 1.0 mg/L萘乙酸0.05 0.1 mg/L 蔗糖30000mg/L琼脂6500mg/L pH5.8—6.0； 先在温度为25°C ±2°C，黑暗培养15天，再转换在光照强度为15001x 20001x，光照时间为10h/d 12h/d，温度为25°C ±2°C的条件下，同步进行愈伤组织诱导和幼芽分化培养至外植体萌发分化出Icm以上的幼芽，每个胚珠萌发的幼芽保留2个，切成苗高为.0.8cm 1.2cm的单株； C、继代培养 将步骤B的单株分株系转接在与步骤B相同的培养基中继代培养3次，光照强度为15001x 20001x，温度为25°C ±2°C，光照时间为10h/d 12h/d，继代周期为30d ； D、单倍体株系初步选择、染色体加倍和纯合体株系的初选 与步骤A①所述的花蕾直接作为外植体，用常规植物组织培养方法获得的组培增殖苗相比，选择步骤C中植株矮小、瘦弱，叶片窄的株系为初步选择的单倍体株系，并淘汰不符合株系；每个初步选择的单倍体株系留25个芽，其中留5个芽在与步骤C相同的培养基和培养条件下继代培养作为对照株系CK，其余20个芽，切成苗高为0.8cm 1.2cm的单株接种到下述培养基中进行染色体加倍培养: 1/2MS基本培养液 6-苄胺基嘌呤0.3mg/L 秋水仙碱O 2 0.5mg/L蔗糖30000mg/L琼脂6500 mg/LpH5.8 6.0;在光照强度为15001x 20001x，温度为25°C ±2°C，光照时间为10h/d 12h/d的条件下，培养5d IOd后，再次分株系转接在与步骤C相同的培养基和培养条件下继代培养3次；在每个株系中选择与加倍前的对照株系CK相比，叶片宽，叶色深的植株为初步选择的加倍体植株，同时淘汰其它植株，每个株系中初步选择的加倍体植株只保留5株进行编号，作为初选纯合体株系； E、初选纯合体株系的保种与生根培养 每个初选纯合体株系在与步骤C相同的培养基和培养条件下增殖至20个芽时，取其中5个芽在与步骤C相同的条件下保种，其余15个芽接种到下述培养基中: MS基本培养液萘乙酸0.05 0.2 mg/L吲哚丁酸0.1 0.3mg/L 蔗鼽30000mg/L琼脂6500mg /LpH5.8-6.0； 在光照强度为15001χ 20001x，温度为25°C ±2°C，光照时间为10h/d 12h/d的条件下，生根培养至基部长出4 8条根； F、纯合体株系的田间确定 ①将步骤E的生根植株移至大棚内进行常规炼苗、移栽管理至开花，用常规杂交技术进行株系内杂交； ②淘汰不能产生可散粉花药或接受花粉后不能够正常结实的株系； ③淘汰结实正常但杂交Fl代出现性状分离的株系； ④保留结实正常且杂交Fl代未出现性状分离的株系即为确定的纯合体株系；用与步骤C相同的培养基和培养条件下扩繁E步骤保种的与F步骤确定的纯合体株系有相同编号的株系，即获得非洲菊纯合体植株。2.根据权利要求1所述的非洲菊纯合体植株的选育方法，步骤A③所述的低温处理后的花蕾进行灭菌处...

【专利技术属性】
技术研发人员：单芹丽，杨春梅，李绅崇，王继华，吴丽芳，屈云慧，汪国鲜，曹桦，张婷，许凤，李金泽，阮继伟，
申请(专利权)人：云南省农业科学院花卉研究所，
类型：发明
国别省市：