丹酚酸A冻干粉针用于制备保护脑血管内皮细胞药物的用途制造技术

本发明专利技术涉及一种丹酚酸A冻干粉针用于制备保护脑血管内皮细胞药物的用途，所述丹酚酸A冻干粉针包括含丹酚酸A主份原料，填充剂和抗氧剂；其中所述冻干粉针的各成份按下列重量配比制成：含丹酚酸A主份原料10g～80g，填充剂10g～g0g，抗氧剂为制成总量的0.01％～0.2％，其中所述填充剂为甘露醇、葡萄糖、乳糖中的任意一种或几种，所述抗氧剂选自维生素C、硫脲、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠中的任意一种或几种，其中所述含丹酚酸A主份原料中丹酚酸A含量大于93％，小于100％，还包括4个其他成分：紫草酸0.1％～2％，迷迭香酸0.1％～2％，丹酚酸B0.1％～2％，丹酚酸C0.1％～2％。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种丹酚酸A冻干粉针用于制备保护脑血管内皮细胞药物的用途。
技术介绍
脑血管病又称脑卒中，是由各种病因使供应脑部血液的血管发生病变所致的一种神经系统疾病。其主要病因为脑动脉系统病损(如脑动脉硬化)等原因导致的脑动脉管腔狭窄、血管痉挛、闭塞或破裂、血 流减少或完全阻塞，脑部血液循环和功能障碍，脑组织受损而发生的一系列症状。主要包括缺血性和出血性脑血管病。其中(ICVD，又称缺血性卒中)占80 左右。缺血性脑血管病是指局部脑组织包括神经细胞、胶质细胞及联系纤维由于供血障碍发生的变性、坏死或一过性的功能丧失。血管内血栓形成、栓塞、血管狭窄导致的脑动脉阻塞是缺血性脑卒中的主要原因。缺血引起脑神经细胞损伤和死亡的作用机制多样、复杂，缺血性脑卒中(即脑缺血)后，由于脑部缺乏血液和氧气的供应，导致大脑能量代谢失衡，产生一系列病理性损伤，如氧化应激、兴奋性氨基酸毒性、钙超载、炎症反应等，从而导致神经元的大量死亡。它是临床上的常见病、多发病，死亡率及致残率很高，现已经成为世界公认的三大致死疾病之一。临床上治疗主要是溶栓、挽救缺血区域(半暗带)的濒临死亡的神经元和促进损伤后神经功能的恢复。防治缺血性脑血管疾病是目前人类迫切需要解决的医学难题。目前美国FDA仅批准了组织纤溶酶原活化因子(tPA)用于中风后的溶栓治疗，但其治疗时间窗很窄，只有在中风4.5小时内使用才有效；而且还存在出血以及缺血再灌加重脑损伤的危险性。而目前针对缺血性中风治疗的神经保护药包括钙通道阻断剂如尼莫地平、谷氨酸受体拮抗剂如地佐环平(DizocilPine)、抗氧化剂或自由基清除剂如依达拉奉、NO信号传导通路调节剂芦贝鲁哩(Lubeluzole)以及炎症抑制剂恩莫单抗(Enlimomab)等。但它们中有的治疗作用不确切或特异性不强，有的毒副作用较大、耐受性小，有的还处于临床前或临床研究阶段，很难在防治缺血性脑卒中发挥积极影响。因而，研发出快速有效、安全稳定的防治脑缺血药物迫在眉睫。在此领域中医药发挥了不可忽视的积极作用。丹酹酸A(Salvianolic acid A),又名丹酹酸甲，是唇形科植物丹参Salviamiltiorrhiza Bunge的干燥根及根莖中所含的一种水溶性酹酸类化合物,丹酹酸A对脑微血管栓塞有明显的药理作用，而且作用优于丹酚酸B (张恒艾.丹酚酸A对脑微血管栓塞大鼠的影响及机制研究[D].北京:北京协和医学院研究生院，2011〕，丹酚酸A是由丹参素和咖啡酸缩合而成，含有多个酚羟基、羟基、酯键等活泼基团，其对光和热不稳定，暴露空气易氧化成丹酚酸C和异丹酚酸C等，由于丹酚酸A的上述理化特性，制成丹酚酸A注射剂，其稳定性成为制成注射剂的关键技术。但是，有关丹酚酸A制剂特别是注射剂研究文献资料不多，并且普遍存在注射剂不稳定性的问题，无法保证丹酚酸A药理作用
技术实现思路
为克服现有技术存在的上述缺陷，本专利技术提供一种丹酚酸A冻干粉针用于制备保护脑血管内皮细胞药物的用途，其中，所述丹酚酸A冻干粉针包括含丹酚酸A主份原料，填充剂和抗氧剂；其中所述冻干粉针的各成份按下列重量配比制成:含丹酚酸A主份原料IOg 80g，填充剂IOg 80g，抗氧剂为制成总量的0.01% 0.2%，其中所述填充剂为甘露醇、葡萄糖、乳糖中的任意一种或几种，所述抗氧剂选自维生素C、硫脲、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠中的任意一种或几种，其中所述含丹酚酸A主份原料中丹酚酸A含量大于93%，小于100%，还包括4个其他成分:紫草酸0.1 % 2%，迷迭香酸0.1 % 2%，丹酚酸B0.1% 2%，丹酚酸C0.1% 2% ；所述丹酚酸A冻干粉针采用如下制备方法获得:(I)提取:丹参用水或乙醇溶液提取得到水提取液或醇提取液；(2)转化:将步骤⑴得到的提取液，调pH至3.5 6.5，加摩尔百分比为0.1% 3.0 %的催化剂，在100 140°C加热I 6小时;(3)纯化:a.将步骤(2)得到的溶液，调pH至2.5 4.5，离心，上清液经非极性或弱极性大孔树脂柱层析分离，用水洗脱后，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液； b.将步骤a得到的洗脱液用葡聚糖凝胶LH-20或0DS-C18或聚酰胺层析柱分离，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液；c.将步骤b得到的洗脱液调pH至2.0 4.0，经有机溶剂萃取，分离有机溶剂相；d.将步骤c得到的溶液用硅胶层析柱分离，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液；(4)干燥:将步骤d得到的洗脱液，减压回收洗脱剂，再加水溶解，真空干燥、微波真空干燥或喷雾干燥，得含丹酚酸A主份原料；(5)取步骤(4)得到的含丹酚酸A主份原料IOg 80g加注射用水1500 2800ml搅拌使溶解，用碱调pH值4.0 5.0，再加入所述填充剂使其溶解，再加入所述抗氧剂，搅拌使溶解混匀，再加入活性炭0.5 2g搅拌吸附，滤过除去活性炭，加注射用水灌装成瓶，送入冻干机再进行冷冻干燥。优选的，还包括用于保护脑微血管内皮细胞损伤的用途。优选的，其中所述冻干粉针的各成份按下列重量配比制成:含丹酚酸A主份原料20g 60g，填充剂20g 60g，抗氧剂为制成总量的0.02 % 0.1 %，其中所述含丹酚酸A主份原料中:丹酚酸A94% 97%，紫草酸0.20Z0 1.5%，迷迭香酸0.20Z0 1.5%，丹酚酸B0.2% 1.5%，丹酚酸 C0.4% 2.0%。优选的，其中所述填充剂用量为20mg 40mg/2ml 3ml。优选的，其中所述冷冻干燥包括如下步骤:A、冷冻:以20°C 30 V /h速度降温至-40 V -45 V，保温冷冻10 16小时；B、升华:抽真空至0.3mbar以下，在10 14小时内将冻结的丹酚酸A丹酚酸A制剂温度上升到_23°C _27°C，维持-23°C -27°C真空干燥6 8小时；C、干燥:继续升温，以0.5°C 1.(TC /min均匀升温至40°C 45°C，维持40°C 45°C干燥2 5小时后，将样品温度降至室温，加盖，即得丹酚酸A冻干粉针。优选的，其中步骤(I)中所述的水提取方法为:取丹参药材，切成饮片或粉碎成直径约2mm颗粒，每次加3 15倍量水提取，共提取I 3次，每次提取I 4小时；提取液减压浓缩至相对密度1.10 1.25(60°C )，加入乙醇使含醇量在30% 80%，离心，上清液减压回收乙醇并浓缩至无醇味，所述水提取采用煎煮提取或45 95°C水温浸提取，同时以10 50转/分速度搅拌，得丹参提取液。优选的，其中步骤(I)中所述的醇提取方法为:取丹参药材，切成饮片或粉碎成直径约2mm颗粒，每次加3 15倍量30% 60%乙醇回流提取，每次提取I 4小时，共提取I 3次；减压回收乙醇，得丹参提取液。优选的，其中步骤(I)中的提取液中丹酚酸B浓度为lmg/ml 30mg/ml或加水稀释至 lmg/ml 30mg/ml。优选的，其中提取液中丹酹酸B浓度为5mg/ml 20mg/ml或加水稀释至5mg/ml 20mg/ml。优选的，其中步骤(2)中的催化剂是氯化铁、三氯化钌、氯化铝、氯化锌、氯化钯中的一种或几种，催化剂与丹酚酸B的摩尔百分比为0.1% 本文档来自技高网...

【技术保护点】
丹酚酸A冻干粉针用于制备保护脑血管内皮细胞药物的用途，其中，所述丹酚酸A冻干粉针包括含丹酚酸A主份原料，填充剂和抗氧剂；其中所述冻干粉针的各成份按下列重量配比制成：含丹酚酸A主份原料10g～80g，填充剂10g～80g，抗氧剂为制成总量的0.01％～0.2％，其中所述填充剂为甘露醇、葡萄糖、乳糖中的任意一种或几种，所述抗氧剂选自维生素C、硫脲、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠中的任意一种或几种，其中所述含丹酚酸A主份原料中丹酚酸A含量大于93％，小于100％，还包括4个其他成分：紫草酸0.1％～2％，迷迭香酸0.1％～2％，丹酚酸B0.1％～2％，丹酚酸C0.1％～2％；所述丹酚酸A冻干粉针采用如下制备方法获得：(1)提取：丹参用水或乙醇溶液提取得到水提取液或醇提取液；(2)转化：将步骤(1)得到的提取液，调pH至3.5～6.5，加摩尔百分比为0.1％～3.0％的催化剂，在100～140℃加热1～6小时；(3)纯化：a.将步骤(2)得到的溶液，调pH至2.5～4.5，离心，上清液经非极性或弱极性大孔树脂柱层析分离，用水洗脱后，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液；b.将步骤a得到的洗脱液用葡聚糖凝胶LH?20或ODS?C18或聚酰胺层析柱分离，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液；c.将步骤b得到的洗脱液调pH至2.0～4.0，经有机溶剂萃取，分离有机溶剂相；d.将步骤c得到的溶液用硅胶层析柱分离，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液；(4)干燥：将步骤d得到的洗脱液，减压回收洗脱剂，再加水溶解，真空干燥、微波真空干燥或喷雾干燥，得含丹酚酸A主份原料；(5)取步骤(4)得到的含丹酚酸A主份原料10g～80g加注射用水1500～2800ml搅拌使溶解，用碱调pH值4.0～5.0，再加入所述填充剂使其溶解，再加入所述抗氧剂，搅拌使溶解混匀，再加入活性炭0.5～2g搅拌吸附，滤过除去活性炭，加注射用水灌装成瓶，送入冻干机再进行冷冻干燥。...

【技术特征摘要】
1.酚酸A冻干粉针用于制备保护脑血管内皮细胞药物的用途，其中，所述丹酚酸A冻干粉针包括含丹酚酸A主份原料，填充剂和抗氧剂；其中所述冻干粉针的各成份按下列重量配比制成:含丹酚酸A主份原料IOg 80g，填充剂IOg 80g，抗氧剂为制成总量的0.01% 0.2%，其中所述填充剂为甘露醇、葡萄糖、乳糖中的任意一种或几种，所述抗氧剂选自维生素C、硫脲、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠中的任意一种或几种，其中所述含丹酚酸A主份原料中丹酚酸A含量大于93%，小于100%，还包括4个其他成分:紫草酸0.1% 2%，迷迭香酸0.1 % 2%，丹酚酸Β(λ 1% 2%，丹酚酸C0.1% 2% ; 所述丹酚酸A冻干粉针采用如下制备方法获得: (1)提取:丹参用水或乙醇溶液提取得到水提取液或醇提取液； (2)转化:将步骤⑴得到的提取液，调pH至3.5 6.5，加摩尔百分比为0.1% 3.0 %的催化剂，在100 140°C加热I 6小时; (3)纯化: a.将步骤(2)得到的溶液，调pH至2.5 4.5，离心，上清液经非极性或弱极性大孔树脂柱层析分离，用水洗脱后，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液； b.将步骤a得到的洗脱液用葡聚糖凝胶LH-20或ODS-C18或聚酰胺层析柱分离，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液； c.将步骤b得到的洗脱液调pH至2.0 4.0，经有机溶剂萃取，分离有机溶剂相； d.将步骤c得到的溶液用硅胶层析柱分离，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液； (4)干燥:将步骤d得到的洗脱液，减压回收洗脱剂，再加水溶解，真空干燥、微波真空干燥或喷雾干燥，得含丹酚酸A主份原料； (5)取步骤(4)得到的含丹酚酸A主份原料IOg 80g加注射用水1500 2800ml搅拌使溶解，用碱调PH值4.0 5.0，再加入所述填充剂使其溶解，再加入所述抗氧剂，搅拌使溶解混匀，再加入活性炭0.5 2g搅拌吸附，滤过除去活性炭，加注射用水灌装成瓶，送入冻干机再进行冷冻干燥。2.根据权利要求1所述的用途，还包括用于保护脑微血管内皮细胞损伤的用途。3.根据权利要求1或2所述的用途，其中所述冻干粉针的各成份按下列重量配比制成:含丹酚酸A主份原料20g 60g，填充剂20g 60g，抗氧剂为制成总量的0.02 % 0.1 %，其中所述含丹酚酸A主份原料中:丹酚酸A94 % 97 %，紫草酸0.2 % 1.5 %，迷迭香酸0.2% 1.5%，丹酚酸 B0.2% 1.5%，丹酚酸 C0.4% 2.0%。4.根据权利要求1或2所述的用途,其中所述填充剂用量为20mg 40mg/2ml 3ml。5.根据权利要求1或2所述的用途，其中所述冷冻干燥包括如下步骤: A、冷冻:以20°C 30°C/h速度降温至-40°C -45°C，保温冷冻10 16小时； B、升华:抽真空至0.3mbar以下，在10 14小时内将冻结的丹酚酸A丹酚酸A制剂温度上升到_23°C -27°C，维持-23°C -27°C真空干燥6 8小时； C、干燥:继续升温，以0.5°C 1.(TC /min均匀升温至40°C 45°C，维持40°C 4...

【专利技术属性】
技术研发人员：廖祝元，杨小玲，程帆，刘恩位，王振，汤新乾，
申请(专利权)人：陆文萍，
类型：发明
国别省市：