一种骨肽组合物及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种骨肽组合物及其制备方法，该组合物中含有以下重量份的成分：骨肽化合物20-45重量份，氨基酸12-26重量份，核酸0-9重量份，游离脂肪酸0-0.01重量份，高分子量物质不超过2份。试验证实，本发明专利技术的骨肽组合物具有明显的抗炎活性及明显的促进骨折愈合作用，且效果优于现有技术。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及骨肽的制剂，具体涉及骨肽组合物及其制备方法。
技术介绍
骨肽注射液(Ossotide Injection)为复方制剂,其主要成分为有机|丐、磷、无机钙、无机盐、微量元素、氨基酸等。骨肽注射液有利于骨折修复。也可用于治疗增生性骨关节疾病及风湿、类风湿关节炎等。骨肽有盐水、酸水、碱水提取及酶解法去除相关杂质，如盐水热压提取、过滤，去脂、离心、醇沉、过柱CN200510076912. 8公开了一种制备骨肽注射剂的方法，将哺乳动物骨用盐水热压煮提，离心过滤，合并煮提液，低温放置1-40 小时，去除表层脂肪，温热后离心过滤，真空浓缩后加入乙醇，静置沉淀，吸出上层醇液，定容回收乙醇，得水提液，将水提液加等体积蒸馏水，一次通过弱酸性阳离子树脂柱、弱碱性阴离子树脂柱、珠状壳聚糖柱和壳聚糖改性活性炭柱，去杂纯化，得纯净稀药液。此方法中先醇沉后过柱除杂，得到的药液中可能含有树脂的降解物等污染物，且多种树脂柱的使用造成大量酸性氨基酸或碱性氨基酸的损失。酸水提取CN201110094765. 2公开一种注射用骨肽的制备工艺，其用哺乳动物四肢骨，除去剩肉，粉碎，水洗后用酸水热压2-3次，冷却，分层，然后水层用无水乙醇沉淀，过滤，用酸调PH为1. 0-2. O,过滤,去除沉淀；滤液用碱调PH值为7. 8-8. 8,过滤,去除沉淀,滤液调PH值近中性，过滤，去除沉淀，然后经超滤膜超滤，截留分子量为3000-10000道尔顿， 得到骨肽溶液。酸水解法会使色氨酸全部被破坏，丝氨酸和酪氨酸部分被破坏，并产生二次污染。另外，该专利先醇沉，后酸沉碱沉，由酸沉和碱沉产生的杂质不能很好的去除。碱溶液提取CN200610150890.X使用碱性提取、酸性提取的方法提取骨肽，取健康新鲜冷冻的哺乳动物的四肢骨，清洗，压碎，将其置夹层锅中，加入5%氢氧化钠溶液 300C 55°C水解12 48小时，取上清液，调pH值酸沉，加热，冷却静置后过滤。碱水解法使含羟基和巯基的氨基酸，全部被破坏且产生消旋，因此增加了新的杂质。酶解C N200610033055. 8公开了一种制备方法，取新鲜的动物四肢骨，清洗、消毒、粉碎、加入蒸馏水，在恒温反应罐内以蛋白酶控制水解。而多数工艺包含提取、去脂、浓缩、醇沉、调酸、调碱、超滤膜过滤，类似上述方法的相关文献很多，具体如下热压提取、冷却、去脂，浓缩，醇沉、调酸、调碱CN200610017008. 4公开了一种骨肽注射液制备工艺，该专利技术将猪四肢骨提取、去脂、浓缩，然后沉淀、浓缩，再进行酸性沉淀、 碱性沉淀，将加热后的液体冷至室温后置于冷库中，取出除去酸性蛋白，进行过滤及超滤得到骨肽原液，再加水调解、过滤、灌封、灭菌即得骨肽注射液。醇沉可以去除由酸性沉淀及碱性沉淀产生的杂质，该专利先醇沉，后酸沉碱沉，未能达到除杂的效果。热压提取、冷藏、去脂、调酸、离心、超滤CN200510051475.4公开了骨肽提取液的制备方法，取哺乳动物四肢骨，加水热压提取3次，热压温度为115-121°C，时间为1-2小时，压力为O. 15-0. 2Mpa ;合并提取液，冷藏12-48小时，除去上层浮脂，上清液调pH值 2. (Γ3. 0，放置12-24小时，滤过，滤液加热65-80°C，时间为15-20分钟，冷却后离心，离心条件为3000-4000转/分，离心时间为15-30分钟，过滤，得清液，清液用截留分子量10000以下的超滤膜超滤1-2次，超滤得到骨肽提取物。该专利技术中仅去除碱性蛋白，未除酸性蛋白。热压提取、去脂、调酸、醇沉、调中性、调碱CN200710099629. 6提供了一种骨肽注射剂的制备方法，该制备方法包括以下步骤将猪或牛的四肢骨，洗净、打碎，加入1-4倍重量的纯化水，105-120°C高压提取至少2次，每次1-3小时，合并提取液，过滤，冷藏，除去上层油脂，调PH值1. 0-4. O,煮沸，冷藏；过滤，取上清液，减压浓缩，加入乙醇，使其含醇量达到60-80%，静置，过滤，回收乙醇至无醇味，用注射用水稀释，调节pH值6. 0-8. O,过滤，灭菌，冷冻，缓化后室温放置，过滤，调pH值6. 8-7. 2，脱色，调pH值6. 8-7. 2，灭菌，冷冻至结冰，取出缓化，用注射用水将缓化后的药液稀释，调节PH值6. 8-7. 5，精滤，得到骨肽注射液。该专利技术先醇沉，后去除酸性蛋白，且调节PH至弱碱性，不能有效去除酸性蛋白及其杂质。加压提取、调酸、调碱、超滤膜过滤CN200410013508.1公开了一种注射用骨肽的制备工艺，其中骨肽的制备方法为取哺乳动物的骨，加压提取Γ2次，合并提取液，调酸性 pH值为2. 0-5. O,去沉淀，调碱性pH值8. 0-9. 5，去沉淀，调中性pH值，将所述的沉淀澄清， 用超滤膜超滤，截留分子量为300(Γ10000道尔顿，制得骨肽提取液。该专利未进行醇沉，由酸性沉淀及碱性沉淀产生的大量的杂质不能得到有效去除。热压提取、去脂、醇沉、碱沉、醇沉CN200810148842. 6公开了一种骨肽提取物的制备方法将猪四肢骨破碎后加水热压提取，提取液浓缩，得浓缩液，先后进行酸沉、碱沉、醇沉，冷藏放置，分子量为10000道尔顿超滤。该专利中大量的浓缩步骤，导致活性物质失活。而上述方法中，骨肽化合物含量较低，杂质去除不完全，上市产品偶有发热、皮疹等过敏反应。专利技术人对其提取技术进行了进一步的改进，得到了本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种骨肽组合物。本专利技术提供了一种骨肽组合物，该组合物中含有以下重量份的成分骨肽化合物 20-45重量份,氨基酸12-26重量份,核酸0_9重量份,游尚脂肪酸0-0. 01重量份，闻分子量物质不超过2份。优选地，所述骨肽组合物中含有以下重量份的成分骨肽化合物26-45重量份，氨基酸17-26重量份,核酸0-5. 2重量份,游离脂肪酸 0-0. 004重量份,高分子量物质不超过 I份。进一步优选，所述骨肽组合物中含有以下重量份的成分骨肽化合物40-45重量份，氨基酸22-26重量份,核酸0-1. 23重量份,游尚脂肪酸0-0. 003重量份，闻分子量物质不超过O. 62份。上述组合物中所述的重量份可以是μ g、mg、g、kg等医药领域公知的重量单位，也可以是上述单位的倍数，如100倍、10倍、1/100倍、1/10倍。所述骨肽化合物是由胶原蛋白在适当高温高压条件下，充分水解形成较小分子量的多肽，分子量约为1000-10000道尔顿；所述氨基酸包括门冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸、组氨酸、精氨酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸、酪氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、胱氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和赖氨酸。所述核酸是由核苷酸聚合而成的生物大分子化合物；所述游离脂肪酸为中性脂肪被酵素分解的产物；所述高分子量物质为分子量高于11000道尔顿的物质。本专利技术还提供了一种制备上述骨肽组合物的方法，该方法包括以下步骤I)哺乳动物四肢骨经破碎清洗，加入四肢骨重量2倍量水，保温热压提取2次，温度为105-120°C，压力为O. 1-0. 12Mpa，每次提取1-3小时，滤过，0_7°C冷藏12-36小时；2)除去上层油脂，滤液用盐酸溶液调节pH值至1. 8-3. 0，煮沸30_60分钟，0_7°C 冷藏本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种骨肽组合物，其特征在于，该组合物中含有以下重量份的成分：骨肽化合物20?45重量份，氨基酸12?26重量份，核酸0?9重量份，游离脂肪酸0?0.01重量份，高分子量物质不超过2份。

【技术特征摘要】
1.一种骨肽组合物，其特征在于，该组合物中含有以下重量份的成分骨肽化合物 20-45重量份,氨基酸12-26重量份,核酸0_9重量份,游尚脂肪酸0-0. 01重量份，闻分子量物质不超过2份。2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，该组合物中含有以下重量份的成分骨肽化合物26-45重量份，氨基酸17-26重量份，核酸0-5. 2重量份，游离脂肪酸0-0. 004重量份，高分子量物质不超过I份。3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，该组合物中含有以下重量份的成分骨肽化合物40-45重量份，氨基酸22-26重量份，核酸0-1. 23重量份，游离脂肪酸0-0. 003重量份，高分子量物质不超过O. 62份。4.根据权利要求1-3任一项所述的组合物，其特征在于，所述骨肽化合物是由胶原蛋白在适当高温高压条件下，充分水解形成较小分子量的多肽，分子量约为1000-10000道尔顿。5.根据权利要求1-3任一项所述的组合物，其特征在于，所述氨基酸包括门冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸、组氨酸、精氨酸、苏氨酸、丙氨酸、脯氨酸、酪氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、胱氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和赖氨酸。6.一种制备权利要求1-5任一项所述的组合物的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤1)哺乳动物四肢骨经破碎清洗，加入四肢骨重量2倍量水，保温热压提取2次，温度为 105-120°C，压力为O. 1-0. 12Mpa，每次提取1_3小时，滤过，0_7°C冷藏12-36小时；2)除去上层油脂，滤液用盐酸溶液调节pH值至1.8-3. O,煮沸30-60分钟，0_7°C冷藏 12-36小时；滤取上清液，氢氧化钠溶液调节pH值至8. 5-11. 0，煮沸30-60分钟，0_7°C冷藏 12-36小时；3)滤取上清液，减压浓缩至2.5-3. Og/ml，加入95%乙醇使含醇体积量达到60_80%， 静置12小时，经滤纸与O. 45 μ m微孔滤膜过滤，滤液加入药液体积O. 5-1. 0%的药用炭， 30-45°C保温吸附15-30分钟，经滤纸与O. 45 μ m微孔滤膜过滤，回收乙醇至无醇味；4)用注射用水稀配至1-1.5g/ml，调pH值6. 0-7. 2，经O. 22 μ m滤膜滤过，经10000超滤膜超滤，超滤液浓缩，浓缩液经O. 22 μ m滤膜滤过，经5000-8000超滤膜超滤，即得骨肽组合物。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤O猪或牛四肢骨经破碎清洗，加入四肢骨重量2倍量水，保温热压提取2次，温度为 110-120°C，压力为O. 11-0. 12Mpa，每次提取1-3小时，滤过，0_5°C冷藏18-36小时；2)除去上层油脂，滤液用盐酸溶液调节pH值至2.0-3. 0，煮沸30-60分钟，0_5°C冷藏 18-36小时；滤取上清液，40%氢...

【专利技术属性】
技术研发人员：方同华，
申请(专利权)人：黑龙江珍宝岛药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：