一种PCR检测鉴定盖罩大蜗牛的方法技术

本发明专利技术公开了一种PCR检测鉴定盖罩大蜗牛的方法，所述方法是应用特异性引物对盖罩大蜗牛的分子特征进行识别；其PCR反应的上游引物为HP-(P1)：5’-TTCGTTGAGAGTTAGG-3’，下游引物为HP-(P2)：5’-ATAGTAATAGCACCAGC-3’。PCR反应体系总体积为25μL，其中2×TaqPCRMasterMix12.5μL，上、下游引物各0.5μL，DNA模板2μL，余下用灭菌ddH2O补足；PCR反应程序为：5℃预变性5min；95℃30s，45℃30s，72℃1min，30个循环；72℃延伸10min，结束反应。本发明专利技术方法能够快速、准确地检测鉴定盖罩大蜗牛。本发明专利技术为《中华人民共和国进境植物检疫性有害生物名录》中盖罩大蜗牛的检测鉴定提供了新的技术手段，对于防止盖罩大蜗牛的传播和扩散具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学检测鉴定领域，具体涉及一种PCR检测鉴定盖罩大蜗牛的方法。
技术介绍
盖罩大蜗牛(Linnaeus, 1758)是我国2007年颁布的《中华人民共和国进境植物检疫性有害生物名录》中的成员，其贝壳与同属的散大蜗牛Helix aspersa(Miiller)、亮大蜗牛lucorum (Linnaeus, 1758)等极为相似,往往难以区分,且只有资深的陆生软体动物分类专家才能鉴别，卵粒和幼螺的鉴定则更为困难。由于历史的原因，目前国境口岸的植物检疫员绝大多数为植物保护专业，对陆生软体动物的分类知之甚少，这种局面给我国的实际检疫工作造成了被动，也是世界各国检验检疫部门共同面临的技术难题。最近二十多年来，分子系统学飞速发展，即由基因序列的比较可以厘清物种的分类学 与系统学地位。因此可以将形态和分子特征结合起来，对盖罩大蜗牛及其近似种的分类学进行更为深入而详尽的研究，为盖罩大蜗牛的快速准确鉴定提供新的技术手段。而PCR技术在国境口岸检疫部门已经相当普及，如果能设计出特异性引物用PCR扩增方法进行初筛或鉴定，这个难题就迎刃而解。本专利技术建立了一种PCR方法检测鉴定盖罩大本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种PCR检测鉴定盖罩大蜗牛的方法，其特征在于：所述方法是应用特异性引物对盖罩大蜗牛的分子特征进行识别，所述特异性引物为：上游引物为HP?(P1)：5’??TTCGTTGAGAGTTAGG??3’，下游引物为HP?(P2)：5’??ATAGTAATAGCACCAGC??3’。

【技术特征摘要】
1.一种PCR检测鉴定盖罩大蜗牛的方法，其特征在于所述方法是应用特异性引物对盖罩大蜗牛的分子特征进行识别，所述特异性引物为上游引物为 HP-(Pl) :5’ - TTCGTTGAGAGTTAGG -3’，下游引物为 HP-(P2) :5’ - ATAGTAATAGCACCAGC -3’。2.根据权利要求1所述的一种PCR检测鉴定盖罩大蜗牛的方法，其特征在于利用权利要求I所述的特异性引物进行PCR反应，P...

【专利技术属性】
技术研发人员：周卫川，王沛，林阳武，肖琼，
申请(专利权)人：福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：