饲用果胶酶DNS检测法制造技术

本发明专利技术设计酶活检测领域，具体地涉及饲用果胶酶DNS检测法。根据本发明专利技术的饲用果胶酶DNS检测法，其酶活定义为：1g酶粉或1mL酶液在pH3.5、37℃下，每分钟从浓度为2.25mg/mL的底物（Sigma?P9135）溶液中分解释放1μmol还原物质（表述为半乳糖醛酸）所需要的酶量为一个酶活单位U。本发明专利技术的检测果胶酶活性的DNS检测法确定了反应体系：包括反应温度、反应pH值、底物浓度、酶液与底物比例、反应总体系等各种参数；确保该方法操作简便，且重复性好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术设计酶活检测领域，具体地涉及饲用果胶酶DNS检测法。
技术介绍
果胶酶是指能分解果胶物质的多种酶的总称，它在破解植物细胞壁、促进内源酶分泌及消除抗营养因子方面发挥了不可替代的作用，在饲料工业中越来越受到重视。但果胶酶是包含多种组分的复合酶，按作用方式分类可分为(I)解聚酶①聚甲基半乳糖醒酸酶 Polymethlgalacturonase PMG ②聚半乳糖醒酸酶 PolygalaturonasePG ③聚甲基半乳糖醒酸裂解酶Polymethlgalacturonatelyse PMGL④聚半乳糖醒酸裂解酶Polygalaturonatelyse PGL ; (2)果胶酯酶 Pectinesterase PE。按底物不同分类可分为果胶酯酶，果胶酶，原果胶酶。但是目前国内采用的果胶酶检测方法是次亚碘酸法(QB1502-92)，它存在以下问题1、底物无法完全溶解，配制出的底物批次间差异较大，且硫代硫酸钠标准溶液和碳酸钠溶液的稳定性较差，从而导致该方法的重复性很差，有时甚至会出现同一个样品今天能检测出酶活，明天却检测不出酶活的情况，对质量控制造成极大的困难。2、操作繁琐，所需试剂本文档来自技高网...

【技术保护点】
饲用果胶酶DNS检测法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：（1）吸取果胶粉溶液，加入DNS试剂并振荡，在37℃水浴锅中保温30min，再加入稀释的酶液，混匀，沸水浴煮沸，测定在540nm处测定吸光度AB；（2）吸取果胶粉溶液，加入与步骤（1）稀释同样倍数的酶液混匀，在37℃水浴中精确保温30min，加入DNS试剂，混匀，沸水浴煮沸，测定在540nm处测定吸光度AS；（3）酶活计算酶活X=[(AS?AB)×K+CO]×1000×Df/30/m/MX：酶样中果胶酶活力，U/mL；AS：待测酶反应液的吸光度；AB：待测酶空白样的吸光度；K：标准曲线的斜率；CO：标准曲线的截距；Df：待测酶样品的稀释...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王冠，詹志春，徐丽，周樱，丁皓，付大波，周金敏，王晓亮，张庆丽，
申请(专利权)人：武汉新华扬生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：