一种丹酚酸A纯化方法技术

本发明专利技术涉及一种丹酚酸A纯化方法，将含有丹酚酸A的洗脱液或提取液；调pH至2.5～4.5，离心，上清液经非极性或弱极性大孔树脂柱层析分离，用水洗脱后，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液；将得到的洗脱液用葡聚糖凝胶LH-20或ODS-C18或聚酰胺层析柱分离，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液；将得到的洗脱液调pH至2.0～4.0，经有机溶剂萃取，分离有机溶剂相；将得到的溶液用硅胶层析柱分离，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液；将得到的洗脱液，减压回收洗脱剂，再加水溶解，微波真空干燥，得进一步纯化的丹酚酸A。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种丹酚酸A纯化方法。
技术介绍
丹参制剂是我国心脑血管疾病的基本治疗药物，因疗效确切，丹参已成为我国用量最大、销售额最高、制剂生产厂最多，临床剂型最全的中药之一。丹参有效化学成分主要有两大类脂溶性丹参酮类化合物和水溶性酚酸类化合物。研究表明丹酚酸类在抗肝脏损伤、抗动脉粥样硬化及细胞凋亡以及改善记忆功能障碍等方面有着显著的活性。其中又以丹酹酸A(SaivianolicacidA)抗氧化活性最强。丹酚酸A结构如下权利要求1.一种丹酚酸A纯化方法，其特征在于将含有丹酚酸A的洗脱液或提取液；采用如下步骤进一步纯化步骤一将所述洗脱液或提取液减压浓缩至每Iml含丹酹酸Al-1Omg,调pH至2. 5 4.5，离心，上清液经非极性或弱极性大孔树脂柱层析分离，所述丹酚酸A上样量与大孔吸附树脂比为1: (35 70)，树脂柱径高比为1: (4 30)，用水洗脱后，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液；步骤二将步骤一得到的洗脱液浓缩至每ml含1-1Omg丹酚酸A的溶液，用葡聚糖凝胶 LH-20或0DS-C18或聚酰胺层析柱分离，所述丹酚酸A上样量与层析柱比为1: (5 25)， 树脂柱径高比为1: (4 25)，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A 的洗脱液，洗脱液减压回收并浓缩成水溶液；步骤三将步骤二得到的水溶液调pH至2. O 4. 0，经有机溶剂萃取，分离有机溶剂相；步骤四将步骤三得到的溶液减压回收有机溶剂，制成每Iml含丹酚酸A500 IOOOOmg 的萃取液，用硅胶层析柱分离，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液；步骤五将步骤四得到的洗脱液，减压回收洗脱剂，再加水溶解，微波真空干燥，所述微波真空干燥温度20-100°C，回差温度1_5°C，真空度-O. 07Mpa以上，微波功率1-100KW，干燥10-200分钟，得进一步纯化的丹酚酸A。2.根据权利要求1所述的纯化方法，其中步骤一中所述大孔树脂柱为HPD-80、 HPD-100、HPD-100B、HPD-200A、HPD-300、HPD-450、HPD-722、HPD-826、ADS-5、ADS-8、ADS-21、 DlOl 或 AB-8。3.根据权利要求1所述的纯化方法，其中步骤一中所述洗脱剂分别为水及不同比例的水与乙醇,并且先用水与10 40%乙醇洗脱，除去杂质，再用20 60%乙醇洗脱。4.根据权利要求1所述的纯化方法，其中步骤二中的所述洗脱剂分别为水及不同比例的水与乙醇，并且先用水、20 60%乙醇溶液洗脱除杂，再用40 9%乙醇溶液洗脱。5.根据权利要求1所述的纯化方法，其中步骤三中所述的有机溶剂为叔丁基甲基醚、 乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丁酯或甲酸乙酯。6.根据权利要求1所述的纯化方法，其中步骤四中所述洗脱剂为石油醚、正戊烷、正庚烷、乙酸乙酯、乙酸甲酯、甲酸乙酯、叔丁基甲基醚组成的两相溶剂。7.根据权利要求1所述的纯化方法，其中步骤一中所述丹酚酸A上样量与大孔吸附树脂比为I (45 55)，树脂柱径高比为I (8 18)。8.根据权利要求7所述的纯化方法，其中步骤一中所述丹酚酸A上样量与大孔吸附树脂比为1: 50，树脂柱径高比为1: 10。9.根据权利要求1所述的纯化方法，其中步骤二中所述丹酚酸A上样量与层析柱比为 I (8 18)，树脂柱径高比为1: (6 20)。10.根据权利要求9所述的纯化方法，其中步骤二中所述丹酚酸A上样量与层析柱比为I 10，树脂柱径高比为1: 8。11.根据权利要求1所述的纯化方法，其中步骤一和步骤三中使用的PH调节剂为磷酸、 盐酸、硫酸或醋酸。全文摘要本专利技术涉及一种丹酚酸A纯化方法，将含有丹酚酸A的洗脱液或提取液；调pH至2.5～4.5，离心，上清液经非极性或弱极性大孔树脂柱层析分离，用水洗脱后，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液；将得到的洗脱液用葡聚糖凝胶LH-20或ODS-C18或聚酰胺层析柱分离，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液；将得到的洗脱液调pH至2.0～4.0，经有机溶剂萃取，分离有机溶剂相；将得到的溶液用硅胶层析柱分离，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液；将得到的洗脱液，减压回收洗脱剂，再加水溶解，微波真空干燥，得进一步纯化的丹酚酸A。文档编号C07C67/48GK102993015SQ201210487600公开日2013年3月27日 申请日期2012年11月20日 优先权日2012年11月20日专利技术者刘地发, 张功俊, 王振, 汤新乾, 刘尧奇, 廖祝元 申请人:楚健本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种丹酚酸A纯化方法，其特征在于：将含有丹酚酸A的洗脱液或提取液；采用如下步骤进一步纯化：步骤一将所述洗脱液或提取液减压浓缩至每1ml含丹酚酸A1?10mg，调pH至2.5～4.5，离心，上清液经非极性或弱极性大孔树脂柱层析分离，所述丹酚酸A上样量与大孔吸附树脂比为1∶(35～70)，树脂柱径高比为1∶(4～30)，用水洗脱后，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液；步骤二将步骤一得到的洗脱液浓缩至每ml含1?10mg丹酚酸A的溶液，用葡聚糖凝胶LH?20或ODS?C18或聚酰胺层析柱分离，所述丹酚酸A上样量与层析柱比为1∶(5～25)，树脂柱径高比为1∶(4～25)，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液，洗脱液减压回收并浓缩成水溶液；步骤三将步骤二得到的水溶液调pH至2.0～4.0，经有机溶剂萃取，分离有机溶剂相；步骤四将步骤三得到的溶液减压回收有机溶剂，制成每1ml含丹酚酸A500～10000mg的萃取液，用硅胶层析柱分离，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液；步骤五将步骤四得到的洗脱液，减压回收洗脱剂，再加水溶解，微波真空干燥，所述微波真空干燥温度：20?100℃，回差温度1?5℃，真空度?0.07Mpa以上，微波功率1?100KW，干燥10?200分钟，得进一步纯化的丹酚酸A。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘地发，张功俊，王振，汤新乾，刘尧奇，廖祝元，
申请(专利权)人：楚健，
类型：发明
国别省市：