一种竹子组培外植体获取方法技术

本发明专利技术公开了一种竹子组培外植体的获取方法，包括选择经过测定的优良竹丛分蔸种植于容器中，8～10月把当年生的母竹于距离地面1.3～1.8m处截断，定期施肥、修剪，视情况断根控制生长，每年5～11月多次从母竹上剪取半木质化枝条，剪去叶子，修剪成茎段，使用洗洁精、自来水、酒精、升汞和无菌水清洗、消毒茎段，最后再次修剪茎段，获得用于竹子组织培养的无菌外植体。本发明专利技术可获取数量多、质量好、污染率低、丛芽萌发能力强的外植体，而且操作简单、方便，生产成本低，适用于青皮竹、粉担竹和花吊丝竹的工厂化育苗，具有较好的经济效益、社会效益和生态效益。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物无性繁殖
，涉及一种竹子栽培外植体的获取方法。
技术介绍
竹类植物是我国森林资源的重要组成部分，具有生长快、成材早、产量高、用途广等特点，同时具有良好的水源涵养和水土保持功能，是经济效益和生态效益具佳的植物。竹类植物很少开花，不易结实，所以基本不用种子育苗，而是采用无性繁殖的方法繁殖小苗。种子育苗主要有扦插繁殖和组织培养等方法。但是，扦插繁殖由于母竹利用率低，对原有竹林资源破坏较大，繁殖率低等缺陷，很难大批量生产育苗；而组培繁育对繁殖材料利用率高，对母竹成长影响极小，繁殖系数高，苗木整齐，可实现工厂化育苗，能满足种子生产的需要。 目前，几种主要竹子已成功利用组织培养快繁技术进行育苗和造林，所使用的外植体种类有种胚、节芽、枝条茎段等，其中枝条茎段是利用最多的外植体材料。获取优良的外植体，是竹子组织培养成功的基础。但是，直接从现有的老竹丛中采集枝条，存在操作不便、枝条质量参差不齐、枝条利用率低、灭菌困难和诱导成功率低，阻碍了竹子工厂化育苗的步伐。而在苗圃里营建采穗圃，有针对性和目的性地管理母竹，不但操作方便，还能很好地控制母竹生长，所得枝条质量好，灭菌容易，丛芽萌发能力强。目前采用该技术方案的相关专利和文献未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有竹子组培中获取外植体的不足，提供一种污染率低、诱导率高、成本低及操作简单的竹子组培外植体的获取方法。本专利技术是这样是实现的 ，特征在于通过在苗圃营建采穗圃，目标化、精细化管理采穗母竹，控制枝条选择范围，以获取优良的竹子组培外植体，其获取方法包括母竹种植、母竹管理、枝条选择和修剪、茎段消毒和修剪等工序，其具体步骤如下(1)母竹种植于2 3月选择经过测定的优良竹丛分蔸种植于装有基质的容器中； (2)母竹管理定期施肥、修剪，视情况断根； (3)枝条选择和修剪从母竹上剪取半木质化枝条，剪去叶子，修剪成茎段； (4)茎段消毒和修剪先后使用洗洁精、自来水、酒精、升汞和无菌水清洗、消毒茎段，最后再次修剪茎段，获取组培无菌外植体。以上所述的母竹种植方法是容器规格为口径50 80cm,高50 60cm,基质成分是表土 10份、木糠3 5份、腐熟有机肥I 2份，种植株行距为0. 7 ImXO. 7 I. 3m。以上所述的母竹管理方法是8 10月把当年生的母竹于距离地面I. 3 I. Sm处截断，分别于3 4月和6 7月给每丛母竹埋施100 200g复合肥，6 8月和翌年2 3月剪除母竹上的老枝条，当新笋生长过于旺盛时，于2 3月沿容器四周松土断根I次。以上所述的枝条选择方法是每年5 11月多次剪取枝条，选择直径0. I 0.4cm、具有3 6个节的枝条；茎段修剪方法是每3个节剪作一个茎段，剪口分别距离两端节0.I 0. 3cm，剥除两端节的竹箨，保留中间节的竹箨。以上所述的茎段消毒方法是将茎段置于容器中，先用0. 2 0. 5%的洗洁精溶液浸泡10 20min，用纱布反复擦拭茎段外表，用自来水冲洗15 30min，再用75 80%酒精溶液浸泡莖段15 20min,用无菌水清洗干净,最后用0. I 0. 15%升萊溶液浸泡莖段8 15min,用无菌水清洗干净。以上所述的茎段修剪方法是在超净工作台上，先把茎段两端剪除，只保留长度为1.5 3. Ocm的中间带节芽部分，然后剥除竹箨。本专利技术相对于现有的技术具有以下优点 I.本专利技术的竹子组培外植体获取方法，将母竹种植在容器里，种植基质是半轻型基质，同时在8 10月把当年生的母竹进行截顶矮化，易于掌握水肥条件，很好地将母竹径粗控制在I 3cm,确保母竹下半部分具有节芽,方便剪取枝条。2.本专利技术的竹子组培外植体获取方法，每年修剪母竹节上老枝条2次，促进新枝生长，延长了枝条剪取时间，一年在5 11月能够多次剪取枝条，提高了枝条利用率。3.本专利技术的竹子组培外植体获取方法，每3个节作一茎段，剥去茎段两端节的竹箨，保留中间节的竹箨，即可防止消毒过程中污水和药液进入准备接种茎段的竹腔内，又能很好地保护准备接种茎段的节芽不受伤害。4.本专利技术的竹子组培外植体获取方法，在用洗洁精溶液浸泡时，用绵质纱布反复擦拭茎段外表面，可以彻底除掉茎段上的小刺毛，初步清除茎段表面的杂质和真菌。5.本专利技术的竹子组培外植体获取方法可获取数量多、质量好、污染率低、丛芽萌发能力强的外植体，而且操作简单、方便，生产成本低，适用于竹子工厂化育苗。具体实施例方式通过下面给出的具体实施例，可以进一步清楚地了解本专利技术，但它们不是对本专利技术的限定。实施例I :青皮竹组培外植体获取 于2月中旬选择经过测定的优良的青皮竹丛分蔸种植于装有基质的容器中，容器规格为口径50cm，高60cm，容器里的基质成分是表土 10份、木糠3份、腐熟有机肥I份，竹丛种植株行距为0. 7mX0. 7m。种植6个月后将母竹在距离地面I. 3nTl. 5m处截断，给每丛母竹埋施10(Tl20g复合肥，6月和翌年2月剪除母竹上的老枝条，当新笋生长过于旺盛时，在容器四周松土断根I次。每年在5 11月从母竹上多次剪取半木质化枝条，选择直径为0. ro. 3cm、具有:T6个节的枝条，剪去叶子。将每3个节剪作一个茎段，剪口分别距离两端节0. ro. 3cm，剥除两端节的竹箨，保留中间节的竹箨。将茎段置于容器中，先用0. 2%的洗洁精溶液浸泡20min，用纱布反复擦拭茎段外表，用自来水冲洗15min，再用75%酒精溶液浸泡茎段20min，用无菌水清洗干净，最后用0. 1%升汞溶液浸泡茎段15min，用无菌水清洗干净。将消毒后的茎段放在超净工作台上，先把茎段两端剪除，只保留长度为I. 5 2. Ocm的中间带节芽部分，然后剥除竹箨，最终得到了竹子组培的外植体。实施例2 :吊丝竹组培外植体获取于3月上旬选择经过测定的优良的吊丝竹丛分蔸种植于装有基质的容器中，容器规格为口径80cm，高50cm，容器里的基质成分是表土 10份、木糠5份、腐熟有机肥2份，竹丛种植株行距为I. OmX I. 3m。当年9月上旬将母竹在距离地面I. 5nTl. 8m处截断，在6月给每丛母竹埋施10(T200g复合肥，7月和翌年3月剪除母竹上的老枝条，当新笋生长过于旺盛时，在3月沿容器四周松土断根I次。每年在5 11月多次从母竹上剪取半木质化枝条，选择直径为0. 2^0. 4cm、具有4飞个节的枝条，剪去叶子。将每3个节剪作一个茎段，剪口分别距离两端节0. ro. 3cm，剥除两端节的竹箨，保留中间节的竹箨。将茎段置于容器中，先用0. 5%的洗洁精溶液浸泡l Omin，用纱布反复擦拭茎段外表，用自来水冲洗30min，再用80%酒精溶液浸泡茎段15min，用无菌水清洗干净，最后用0. 15%升汞溶液浸泡茎段8min，用无菌水清洗干净。将消毒后的茎段放在超净工作台上，先把茎段两端剪除，只保留长度为2. 0 3.Ocm的中间带节芽部分，然后剥除竹箨，最终得到了竹子组培的外植体。实施例3 :粉单竹组培外植体获取 于3月中旬选择经过测定的优良的粉单位竹丛分蔸种植于装有基质的容器中，容器规格为口径70cm，高55cm，容器里的基质成分是表土 10份、木糠4份、腐熟有机肥I份，竹丛种植株行距为0. 8mX I. Om。种植7个月后将本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种竹子组培外植体获取方法，通过在苗圃营建采穗圃，目标化、精细化管理采穗母竹，控制枝条选择范围，以获取优良的竹子组培外植体，其获取方法包括母竹种植、母竹管理、枝条选择和修剪、茎段消毒和修剪等工序，其具体步骤如下：（1）母竹种植：于2～3月选择经过测定的优良竹丛分蔸种植于装有基质的容器中；（2）母竹管理：定期施肥、修剪，视情况断根控；（3）枝条选择和修剪：从母竹上剪取半木质化枝条，剪去叶子，修剪成茎段；（4）茎段消毒和修剪：先后使用洗洁精、自来水、酒精、升汞和无菌水清洗、消毒茎段，最后再次修剪茎段，获取组培外植体。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：郝海坤，黄大勇，黄开勇，陈琴，黄志玲，李立杰，徐振国，
申请(专利权)人：广西壮族自治区林业科学研究院，
类型：发明
国别省市：