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快速检测烟粉虱携带番茄黄化曲叶病毒的dot-ELISA方法及其应用技术

技术编号:8347601 阅读:232 留言:0更新日期:2013-02-21 00:10
本发明专利技术公开了一种快速检测烟粉虱携带番茄黄化曲叶病毒的dot-ELISA方法及其应用。田间烟粉虱的采集、预处理及研磨后,利用番茄黄化曲叶病毒的单克隆抗体,建立检测传毒介体烟粉虱的dot-ELISA方法,并研发快速检测试剂盒,对田间烟粉虱携带番茄黄化曲叶病毒的情况进行检测。利用该发明专利技术可对田间烟粉虱的带毒率进行大规模调查,预测田间番茄黄化曲叶病的流行爆发趋势。该检测方法快速高效、灵敏特异、高通量又操作简便,为番茄黄化曲叶病毒病的快速诊断、预测预报及科学防控提供技术支撑。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术所属的领域为生物
,尤其是涉及一种携带番茄黄化曲叶病毒的烟粉虱的快速检测方法及应用。
技术介绍
番爺黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus, TYLCV)属于双生病毒科(feOTifliririt/ae)菜豆金色花叶病毒属Uiegomovirus、,该属病毒在自然条件下只能由烟粉IS,(.Bemisia iaAaci)以持久方式传播,因而又被称为粉風传双生病毒。番爺黄化曲叶病害的大规模流行往往伴随着传毒介体烟粉虱的爆发。在我国,番茄黄化曲叶病最初仅分布在海南、云南、广东和广西等省,自2006年上海和浙江先后在番茄上发现番茄黄化曲叶病毒以来,该病害在华东地区迅速蔓延开来,已在我国北京、上海、山东、新疆等18个省份的番茄上流行爆发。番茄黄化曲叶病导致番茄叶片上卷或下卷、叶片黄化、叶脉外突、植株矮化,严重时致番茄绝收。近年来,由于全球气候变暖和农业发展格局的变化,烟粉虱在我国北方地区也呈爆发趋势,使得番茄黄化曲叶病害在我国自南向北迅速扩散和蔓延开来,对番茄生产构成巨大威胁。番茄黄化曲叶病毒不能机械传播,不经卵传播,只由烟粉虱成虫以持久性方本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速检测烟粉虱携带番茄黄化曲叶病毒的dot?ELISA方法,其特征在于包括如下步骤:1)田间烟粉虱的采集、预处理及研磨;2)硝酸纤维素(NC)膜准备:用铅笔在NC膜外层纸上划线,使NC膜印上方格线痕迹,每格规格1×1?cm,平整放入培养皿中央;3)点样:吸取研磨的烟粉虱研磨液2?μL,点样于NC膜的格子中央;4)封闭:点样后,将NC膜静置晾干10分钟,使用按5?g脱脂奶粉加100?mL?PBST缓冲液的比例配制得到5%的脱脂奶粉封闭,37℃静置0.5?1小时;所述的PBST缓冲液为含0.05%?Tween?20的0.01?mol/L?PBS;?5)加一抗:加入中国专利申请号为2012100...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:谢艳周雪平吴建祥矫晓阳刘欢
申请(专利权)人:浙江大学
类型:发明
国别省市:

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