一种应用多重PCR阵列技术的核酸检测方法技术

本发明专利技术公开了一种应用多重PCR阵列技术的核酸检测方法。包括：通用标签(UT)序列，通用标签序列与特异性检测引物组成的引物对(5’-UT引物+特异检测引物-3’)，含有该通用标签序列或引物对的试剂盒，及其它们在核酸生物检测中的应用。所述UT序列满足以下条件：①上下游引物的UT序列不同、Tm值相差不超过±1℃，且大于检测引物Tm值5-10℃左右；②UT序列为随机设计的DNA片段，与待检测生物的序列间无同源性。本发明专利技术的检测方法，通过mPCR结合通用标签序列的方法，以提高核酸检测的灵敏度和特异性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种核酸检测方法，特别涉及应用多重PCR阵列技术检测核酸的方法，属于生物

技术介绍
多重PCR技术(multiplex PCR, mPCR)是自上世纪80年代PCR技术诞生以来，该
的又一大革新。传统PCR技术仅使用一对引物，通过扩增产生一个核酸片段，多用于单一目的序列的鉴定。而mPCR是在同一 PCR反应体系里应用两对以上的引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应，其反应原理，反应试剂和操作过程与经典的PCR相同。mPCR最大的特点就是提高了检测的效率，使PCR成为了一种高通量的手段(I)高效性，在同一 PCR反应管内同时检出多种待测靶物，或对有多个型别的目的基因进行分型，特别是用一个样本就可检测多种靶标；(2)系统性，mPCR很适宜于成组靶标，如肝炎病毒、肠道致病性细菌、性病、食品微生物及细菌战剂等类别中不同病原体的同时检测；(3)经济性，多种靶标在同一反应体系内同时检出，则在时间、试剂、费用开支等方面的耗费都是很大的节省。mPCR技术在生物医学领域应用广泛。比如多种病原微生物的同时检测或鉴定，某些遗传病及癌基因的分型鉴定等。针对待检对象的多型别，本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种引物对，含有通用标签序列(UT序列)，以及检测引物对，且UT序列加在每条检测引物的5’端；其中，所述UT序列由20？24个碱基组成，并满足以下条件：①上下游引物的UT序列不同、Tm值相差不超过±1℃，且大于检测引物Tm值5？10℃左右；②UT序列为随机设计的DNA片段，与待检测生物的核酸序列间无同源性。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杜蓬，张磊，邵世和，孙爱华，王黎芳，周海鸥，银国利，何方，蒋锦琴，花扣珍，覃江凤，
申请(专利权)人：浙江医学高等专科学校，
类型：发明
国别省市：