本发明专利技术涉及一种双向性固体发酵白耙齿菌菌质提取物及制备方法及其用途,属于药用真菌领域。白耙齿菌以母种进行液体培养得到对数生长期的种子，将该种子在无菌条件下接种到有大麦培养基的种子瓶中，进行种子瓶发酵培养、发酵瓶发酵生产培养以及提取。本发明专利技术具有治疗肾小球肾炎的代谢物，同时通过白耙齿菌的生长和代谢，改变大麦原有的性能。
【技术实现步骤摘要】
双向性固体发酵白耙齿菌菌质提取物及制备方法及其用途
本专利技术属于药用真菌领域，尤其是指一种白耙齿菌菌质提取物及制备方法及其用途。
技术介绍
白祀齿菌ZrjDejr Iacteus Fr.属担子菌纲多孔菌目齿菌科祀齿菌属的一种真菌，别名白囊孔。该菌种保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号是CGMCC No. 1016。其子实体生于阔叶树的枯立木和枯倒木上。形态特征担子果(子实体)平伏，扩展，白色，软革质；有时倒生，呈复瓦状叠生，扇形，有狭小的基部；盖面乳白色， 有短绒毛，絹丝样光泽，有环纹，边缘薄，下弯，波状至浅裂。菌肉白色。刺呈耙齿状，短，不整齐，白色至黄白色，孢子椭圆形，平滑，无色，囊状体棒形或纺锤形，有时披有结晶，主要分布于长白山林区和黑龙江、河北、山西、甘肃、江西、福建、云南和西藏等省区。白耙齿菌的药用在历史上仅限于民间采集野生子实体，其子实体生于阔叶树的枯立木和枯倒木上。比较难采集到，因此子实体比较稀缺，无法大量收集。慢性肾小球肾炎是由多种原发性肾小球病理损害导致的，以蛋白尿、血尿、水肿、 高血压为常见的临床表现的一类疾病。是肾科常见病与多发病。其中绝大多数患者具有不同程度的肾功能损害，且呈进行性加重，渐进性的转为肾功能衰竭。因而，及时有效地治疗慢性肾小球肾炎是科研工作者的重要课题。80年代-90年代，长春中医学院宋启印教授首次研究开发应用白耙齿菌液体发酵的方法生产白耙齿菌多糖治疗慢性肾小球肾炎，即目前市场上的中成药“益肾康”胶囊。益肾康胶囊，主要成份是耙齿菌多糖的粗提物。内容物为褐色至深褐色的粉末；味微酸涩。具有清利湿热之功效。用于慢性肾小球肾炎属下焦湿热证者。但患者服用偶见胃脘不适，口干，纳差，恶心。目前药用真菌的生产一般有液体发酵和固体发酵两种形式。国内外较多应用液体发酵生产是借鉴抗生素的生产工艺，应用发酵罐优点是有较高的机械化与自动化，生产规模大。但因药用真菌自身一般不产生抗生素，或产生的抗生素抑菌作用较弱，不能对细菌等其他微生物产生很好的拮抗作用，因此在发酵过程中易污染杂菌而倒灌，造成重大损失。其生产设备投资巨大，耗能也较多，生产成本较高。药用真菌的固体发酵最早见于2000年前中药“六神曲”和“半夏曲”的生产，是利用自然界的霉菌进行发酵，其作用是产生消食和胃的功能。其工艺一直沿用至今，但“六神曲”和“半夏曲”的发酵不是纯种发酵，工艺不好控制。近几年来随着生物技术的发展，采用纯种接种，建立科学可控的质量监控体系，其发酵过程的稳定性得到了很好地解决。南京中医药大学庄毅教授于上世纪80年代研究以药用真菌“槐耳robiniophila Murr. 为发酵菌种，在以农副产品为营养基质上进行固体发酵，其药用菌质称”槐耳菌质”。开发出具有抗肿瘤功效的新药“槐耳冲剂”，同时提出药用真菌新型双向性固体发酵工程理论。药用真菌新型双向性固体发酵工程(以下简称“双向发酵”)其原理为选定特定的发酵菌种，用3特定的中药材作为药性基质，再用农副产品作为营养基质(合称全性基质)，双方共构成一个发酵组合，在特定条件下进行双向发酵，发酵产品成为药性菌质，它是生物技术的一个新起点。它可以改变原药的性能、增强药效及扩大适应症。发酵后的产物比进行发酵的两种物质单独使用的药效大，即“1+1 > 2”。卞寒iiHordeum vulgare)为禾本科一年生草本植物的种子,既是食品又是药品， 《本草纲目》记载“大麦味甘、性平、有去食疗胀、消积进食、平胃止渴、消暑除热、益气调中、 宽胸大气、补虚劣、壮血脉、益颜色、实五脏、化谷食之功”。现代研究证明，大麦茶含有人体所需的17种微量元素，19种以上氨基酸，富含多种维生素及不饱和脂肪酸、蛋白质和膳食纤维。用以治食积不化，脘闷腹胀，泄泻等脾胃虚弱之症。
技术实现思路
本专利技术提供一种双向性固体发酵白耙齿菌菌质提取物及制备方法及其用途，以解决白耙齿菌液体培养提取物使患者产生胃脘不适、口干、纳差、恶心等副作用的问题。本专利技术采取的技术方案是双向性固体发酵白耙齿菌菌质提取物的制备方法是(1)白耙齿菌以母种进行液体培养得到对数生长期的种子，将该种子在无菌条件下接种到有大麦培养基的种子瓶中；(2)种子瓶发酵培养在温度22°C-26°C，空气湿度65%-70%环境下发酵7-9天；(3)发酵瓶发酵生产培养在温度22°C-26°C，空气湿度65%-70%环境下发酵18-21 天，得到白耙齿菌的菌质；(4)该菌质以80°C 90°C热水提取2 3次，第一次3小时，第二次2小时，第三次I小时，合并滤液，浓缩成60°C时测相对密度I. 05^1. 10的清膏，50°C 55°C减压干燥，粉碎成细粉。本专利技术所述的大麦培养基是将重量比为95%-97%的大麦粒浸泡，使含水量达到 50-55%，加入重量比1%-2%的石膏粉，重量比2%-3%的蔗糖。通过双向性固体发酵白耙齿菌菌质提取物的制备方法得到的白耙齿菌菌质提取物在制备治疗慢性肾小球肾炎属下焦湿热证者的药物中应用。本专利技术利用大麦作为药性基质兼营养基质(称全性基质)，接种具有治疗肾小球肾炎作用的白耙齿菌，双方共构成一个发酵组合，在特定条件下进行双向发酵，发酵产品成为药性菌质。大麦可以提供白耙齿菌生长的营养成分，使白耙齿菌菌丝生长繁殖，得到具有治疗肾小球肾炎的代谢物，同时通过白耙齿菌的生长和代谢，改变大麦原有的性能、增强健脾消食的功能，缓和白耙齿菌代谢物所致胃脘不适，口干，纳差，恶心等副作用。具体实施方式本专利技术所述白祀齿菌ZrjDeJT Iacteus Fr,该菌种保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号是=CGMCC No. 1016。白耙齿菌以母种进行液体培养得到对数生长期的种子的方法如下(I)一级斜面菌种培养基:葡萄糖 2-3%,马铃薯 20-25%,琼脂 2. 2%，MgSO4 O. 2%, KH2PO4O. 3%, VB1 O. 05% ； 斜面菌种培养温度25-27°C，120小时菌丝长满斜面，放置冷藏柜2-4°C存备用；4(2) 二级摇瓶菌种培养基:葡萄糖 2%，酵母浸膏 O. 5%, KH2PO4 O. 2%, NaH2SO4 O. 15%,蛋白胨 O. 2%, VB1 O. 01%, ρΗ6· 5 ；取菌丝粗壮茂密的斜面菌种，在无菌条件下按I :4接种量接种，于26土1°C摇床培养 4飞天；结果菌液澄明，黄色，有浓水果香味，菌球呈放射状；镜检美兰单染色菌丝着色深，粗壮，分枝多，锁状联合明显可见；此时期正是菌丝发育的旺盛期(对数生长期)，又无杂菌污染，可转为固体培养。实施例I本专利技术胶囊剂的制备(O白耙齿菌以母种进行液体培养得到对数生长期的种子，将该种子在无菌条件下接种到有大麦培养基的种子瓶中；所述的大麦培养基是将重量比为95%的大麦粒浸泡，使含水量达到50%，加入重量比1%的石膏粉，重量比2%的蔗糖；(2)种子瓶发酵培养在温度26°C，空气湿度70%环境下发酵7天；(3)发酵瓶发酵生产培养在温度26°C，空气湿度70%环境下发酵18天，得到白耙齿菌的菌质；(4)该菌质以90°C热水提取3次，第一次3小时，第二次2小时，第三次I小时，合并滤液，浓缩成60°C时测相对密度I. 10的清膏，55°C减压干燥，粉碎本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种双向性固体发酵白耙齿菌菌质提取物，其特征在于它是由下列方法得到的：（1）白耙齿菌以母种进行液体培养得到对数生长期的种子，将该种子在无菌条件下接种到有大麦培养基的种子瓶中；（2）种子瓶发酵培养：在温度22℃？26℃，空气湿度65%？70%？环境下发酵7？9天；（3）发酵瓶发酵生产培养：在温度22℃？26℃，空气湿度65%？70%？环境下发酵18？21天，得到白耙齿菌的菌质；（4）该菌质以80℃~90℃热水提取2~3次，第一次3小时，第二次2小时，第三次1小时，合并滤液，浓缩成60℃时测相对密度1.05~1.10的清膏，50℃~55℃减压干燥，粉碎成细粉。
【技术特征摘要】
1.一种双向性固体发酵白耙齿菌菌质提取物，其特征在于它是由下列方法得到的(1)白耙齿菌以母种进行液体培养得到对数生长期的种子，将该种子在无菌条件下接种到有大麦培养基的种子瓶中；(2)种子瓶发酵培养在温度22°C-26°C，空气湿度65%-70%环境下发酵7-9天；(3)发酵瓶发酵生产培养在温度22°C-26°C，空气湿度65%-70%环境下发酵18-21 天，得到白耙齿菌的菌质；(4)该菌质以80°C 90°C热水提取2 3次，第一次3小时，第二次2小时，第三次I小时，合并滤液，浓缩成60°C时测相对密度I. 05^1. 10的清膏，50°C 55°C减压干燥，粉碎成细粉。2.根据权利要求I所述的双向性固体发酵白耙齿菌菌质提取物，其特征在于所述的大麦培养基是将重量比为95%-97%的大麦粒浸泡，使含水量达到50-55%，加入重量比 1%_2%的石骨粉，重量比2%_3%的鹿糖。3.如权利要求I所述的双向性固体发酵白耙齿菌菌质提取物的的制...
【专利技术属性】
技术研发人员：郭尚印，
申请(专利权)人：长春益肾康生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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