本发明专利技术涉及一种从楝中提取三唇素B、三唇素D和三唇素H的方法。其通过下列的步骤得到：1）将楝的根皮粉碎，乙醇水溶液微波提取；2）溶剂萃取；3）氧化铝作为填料，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，分段收集半成品；4）制备高效液相色谱分离；5）采用两相溶剂结晶法，将分段收集的粗品用石油醚-乙酸乙酯混合溶剂重结晶，得到纯度达98.5%以上的三唇素B、三唇素D和三唇素H。采用该方法制备三唇素B、三唇素D和三唇素H，工艺方法简单，成本低，效率高，具有较高的经济价值和学术价值。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于天然产物分离领域，特别是涉及一种从楝中提取三唇素B、三唇素D和三唇素H的方法。
技术介绍
楝azedarach L.系楝科楝属植物,其药用部位为干燥树皮及根皮,又名苦楝，常作为驱虫药被收入中国药典，且楝在我国分布较广，资源丰富。近年来，国内外有大量的楝科楝属植物的研究报道，证实楝属植物提取物具有杀虫、抑菌、抗病毒、抗肿瘤、康生于等多种药理活性，楝属植物作为植物源农药，具有对有害植物高效、对非靶标生物安全、易分解、不污染环境和不破坏生态平衡等优点。从楝的根皮中分离出的三唇素B(TrichilinB)、三唇素D ( (Trichilin D))及三唇素H (Trichilin H)属于柠檬苦素类化合物，均对有害昆虫甜菜夜蛾的幼虫有一定的拒食作用。 目前，国内尚未见三唇素B、三唇素D和三唇素H的提取纯化方法方面的专利和文献报道。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种从楝中提取三唇素B、三唇素D和三唇素H的方法，为百子莲皂苷A的制备提供一种简便易行的方法。为了解决上述技术问题，本专利技术采用以下技术方案来实现的 O将楝的根皮粉碎，用体积百分比浓度为60-75%的乙醇水溶液微波提取2次，每次O.2-0. 5h，过滤得到提取液； 2)将步骤I)所得提取液减压回收除去乙醇，得到浓缩液，先用石油醚萃取，萃取液再用二氯甲烷萃取，各萃取3-5次，每次用量均为浓缩液体积量的2-4倍，将二氯甲烷萃取液浓缩得到浸膏； 3)将步骤2)所得浸膏用甲醇溶解干法拌样后进行常压柱层析，层析柱填料为中性氧化铝，粒度为100-200目，梯度洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯，按体积比由高到低，依次按20:1-1:1进行洗脱，分段收集半成品； 4)将步骤3)所得半成品合并，加入甲醇溶解，再经制备高效液相色谱分离得到三唇素B、三唇素D和三唇素H流分； 5)将步骤4)所得三种流分分别采用两相溶剂结晶法进一步纯化，得到纯度达98.5%以上的产品。所述步骤I)中乙醇溶液的用量为原料的8-12倍(V/W)，微波功率为500-700W。所述步骤4)中色谱条件为检测波长212nm，流动相为乙腈-水，其中乙腈的体积百分比为38-55%。所述步骤5)中两相溶剂为石油醚-乙酸乙酯，体积比为4:1。本工艺采用微波提取，生产周期短，且提取均匀、快速、能耗低；采用氧化铝柱分离，石油醚-乙酸乙酯混合溶剂洗脱，操作简单易于放大生产，制备液相色谱分离，产品纯度高，制备量大。具体实施例方式 下面将结合具体实施方式进一步说明本专利技术，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施例。实施例I : 取楝的根皮粉碎，称量20kg，加11倍量的70%乙醇溶液微波提取2次，每次15min，微波功率为500W，过滤得到提取液，减压回收乙醇，得到浓缩液，先用15L石油醚萃取，萃余液再用30L 二氯甲烷萃取，各萃取3次，二氯甲烷萃取液合并浓缩，得到浸膏。将所得浸膏用 甲醇溶解干法混合拌样后进行常压柱层析，层析柱填料为中性氧化铝(100-200目)，梯度洗脱，洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯，由高到低，依次按体积比20:1-1:1进行洗脱，分段收集半成品。将分段收集的半成品合并后，加入甲醇完全溶解，再经制备高效液相色谱分离，检测波长为212nm，流动相为乙腈-水(乙腈体积百分比浓度为45%)，得到含量分别达89. 3%、90.1%和88. 7%的三唇素B、三唇素D和三唇素H。再将所得三种流分采用两相溶剂结晶法进一步纯化，结晶溶剂为石油醚-乙酸乙酯，体积比为4:1，得到纯度达98. 5%以上的产品，即三唇素B、三唇素D和三唇素H。实施例2: 取楝的根皮粉碎，称量20kg，加8倍量的60%乙醇溶液微波提取2次，每次30min，微波功率为700W，过滤得到提取液，减压回收乙醇，得到浓缩液，先用30L石油醚萃取，萃余液再用50L 二氯甲烷萃取，各萃取4次，二氯甲烷萃取液合并浓缩，得到浸膏。将所得浸膏用甲醇溶解干法混合拌样后进行常压柱层析，层析柱填料为中性氧化铝(100-200目)，梯度洗脱，洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯，由高到低，依次按体积比20:1-1:1进行洗脱，分段收集半成品。将分段收集的半成品合并后，加入甲醇完全溶解，再经制备高效液相色谱分离，检测波长为212nm，流动相为乙腈-水(乙腈体积百分比浓度为38%)，得到含量分别达88. 4%,86. 5%和90. 2%的三唇素B、三唇素D和三唇素H。再将所得三种流分采用两相溶剂结晶法进一步纯化，结晶溶剂为石油醚-乙酸乙酯，体积比为4:1，得到纯度达98. 5%以上的产品，即三唇素B、三唇素D和三唇素H。实施例3: 取楝的根皮粉碎，称量50kg，加12倍量的65%乙醇溶液微波提取2次，每次25min，微波功率为500W，过滤得到提取液，减压回收乙醇，得到浓缩液，先用50L石油醚萃取，萃余液再用80L 二氯甲烷萃取，各萃取3次，二氯甲烷萃取液合并浓缩，得到浸膏。将所得浸膏用甲醇溶解干法混合拌样后进行常压柱层析，层析柱填料为中性氧化铝(100-200目)，梯度洗脱，洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯，由高到低，依次按体积比20:1-1:1进行洗脱，分段收集半成品。将分段收集的半成品合并后，加入甲醇完全溶解，再经制备高效液相色谱分离，检测波长为212nm，流动相为乙腈-水(乙腈体积百分比浓度为42%)，得到含量分别达89. 2%、87. 7%和86. 9%的三唇素B、三唇素D和三唇素H。再将所得三种流分采用两相溶剂结晶法进一步纯化，结晶溶剂为石油醚-乙酸乙酯，体积比为4:1，得到纯度达98. 5%以上的产品，即三唇素B、三唇素D和三唇素H。实施例4:取楝的根皮粉碎，称量50kg，加8倍量的75%乙醇溶液微波提取2次，每次20min，微波功率为600W，过滤得到提取液，减压回收乙醇，得到浓缩液，先用30L石油醚萃取，萃余液再用75L 二氯甲烷萃取，各萃取5次，二氯甲烷萃取液合并浓缩，得到浸膏。将所得浸膏用甲醇溶解干法混合拌样后进行常压柱层析，层析柱填料为中性氧化铝(100-200目)，梯度洗脱，洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯，由高到低，依次按体积比20:1-1:1进行洗脱，分段收集半成品。将分段收集的半成品合并后，加入甲醇完全溶解，再经制备高效液相色谱分离，检测波长为212nm，流动相为乙腈-水(乙腈体积百分比浓度为40%)，得到含量分别达87. 6%,89. 6%和90. 3%的三唇素B、三唇素D和三唇素H。再将所得三种流分采用两相溶剂结晶法进一步纯化，结晶溶剂为石油醚-乙酸乙酯，体积比为4:1，得到纯度达98. 5%以上的产品，即三唇素B、三唇素D和三唇素H。 实施例5: 取楝的根皮粉碎，称量50kg，加10倍量的65%乙醇溶液微波提取2次，每次12min，微 波功率为500W，过滤得到提取液，减压回收乙醇，得到浓缩液，先用60L石油醚萃取，萃余液再用100L 二氯甲烷萃取，各萃取4次，二氯甲烷萃取液合并浓缩，得到浸膏。将所得浸膏用甲醇溶解干法混合拌样后进行常压柱层析，层析柱填料为中性氧化铝(100-200目)，梯度洗脱，洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯，由高到低，依次按体积比20:1-1:1进行洗脱，分段收集半成品。将分段收集的半成品合并后，加入甲醇完全溶解本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种从楝中提取三唇素B、三唇素D和三唇素H的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）将楝的根皮粉碎，用体积百分比浓度为60？75%的乙醇水溶液微波提取2次，每次0.2？0.5h，过滤得到提取液；2）将步骤1）所得提取液减压回收除去乙醇，得到浓缩液，先用石油醚萃取，萃取液再用二氯甲烷萃取，各萃取3？5次，每次用量均为浓缩液体积量的2？4倍，将二氯甲烷萃取液浓缩得到浸膏；3）将步骤2）所得浸膏用甲醇溶解干法拌样后进行常压柱层析，层析柱填料为中性氧化铝，粒度为100？200目，梯度洗脱剂为石油醚？乙酸乙酯，按体积比由高到低，依次按20:1？1:1进行洗脱，分段收集半成品；4）将步骤3）所得半成品合并，加入甲醇溶解，再经制备高效液相色谱分离得到三唇素B、三唇素D和三唇素H流分；5）将步骤4）所得三种流分分别采用两相溶剂结晶法进一步纯化，得到纯度达98.5%以上的产品。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：苏刘花，
申请(专利权)人：南京泽朗农业发展有限公司，
类型：发明
国别省市：
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