产酸菌的检测制造技术

本发明专利技术提供可用于检测样品中的产酸菌的装置和方法。所述装置包含营养培养基和pH指示剂以检测和区分产酸微生物如乳酸菌。使用方法包括对产酸微生物进行检测或计数。所述方法还提供对产气产酸菌的检测。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】产酸菌的检测相关专利串请的交叉引用本专利申请要求于2009年6月15日提交的第61/187，107号美国临时专利申请和于2010年3月15日提交的第61/314，140号美国临时专利申请的权益，将这两个临时专利申请以引用的方式全文并入本文。
技术介绍
产酸菌包括相对多样的一组具有共同代谢和生理特征的革兰氏阳性微生物。该细菌群组产生酸，作为碳水化物发酵的主要终产物。该群组分为两个代谢亚群-纯乳酸发酵菌，其基本上将碳水化合物转化成酸；和杂乳酸发酵菌，其除了产生酸以外，还将碳水化合物转化为其他代谢产物，包括例如乙醇和二氧化碳。虽然一些产酸菌如产乳酸细菌(LAB)在发酵食品的生产中具有有益作用，它们也 称为食品和饮料变质的主要媒介物，特别是在真空包装肉类、肉制品和啤酒中。产酸细菌在某些食物产品中的代谢活性可导致食品或饮料的感官特性(例如气味、口味)显著劣化。传统的微生物学技术通常用于对产酸菌如LAB进行鉴别和/或计数。琼脂和肉汤培养基(例如MRS和APT培养基)被用于促进生长和/或鉴别产酸菌。将培养物在微需氧环境中温育以改善产酸菌如LAB的生长。典型的方法包括在选择性琼脂板上培养和分离假定的产酸菌菌落，然后在含有发酵管的肉汤培养基中进行次代培养以检测杂乳酸发酵性物种引起的气体产生。这些方法可能耗费多至四天来检测或鉴别产酸菌。在一些情况下，这些方法可能耗费7-10天来鉴别产酸菌。对用来检测样品中的产酸菌如LAB的简单制品和方法存在着需求。
技术实现思路
根据用来检测和/或鉴别产酸菌的当前的一般方法(其通常需要特定的培养基、长的温育周期、特定的温育条件和/或次培养程序)，本专利技术包括用于检测和/或鉴别产酸菌的简单制品和方法。在一些实施例中，本专利技术方法提供了对产酸菌的区分。另外，或作为另一种选择，某些实施例提供了对产酸菌的计数。在一些实施例中，本专利技术方法提供了对产酸菌的自动化检测和/或计数。因此，在一个方面，本专利技术提供了检测产酸菌的方法。检测产酸菌的方法可包括提供薄膜培养装置、支持酸性细菌的生长的培养基、变色域在PH 7.0以下延伸的pH指示剂、可被产酸菌发酵的碳水化合物以及样品。薄膜培养装置可包含冷水可溶性胶凝剂。该方法还可包括在所述培养装置中将预定体积的所述样品、所述培养基、所述PH指示剂和所述可发酵的碳水化合物合并。该方法还可包括将所述培养装置在低于7的pH下温育一段时间并检测产酸微生物的存在与否。在另一方面，提供了检测产酸菌的方法，该方法包括提供薄膜培养装置，其包含冷水可溶性胶凝剂，支持产酸菌生长的培养基，变色域在pH 7. 0下延伸的pH指示剂，可被产酸菌发酵的碳水化合物以及怀疑含有产酸菌的样品。本方法还可包括将预定体积的样品与所述培养基合并以形成第一混合物；在所述培养装置中将所述第一混合物与所述pH指示剂和所述可发酵的碳水化合物合并；将所述培养装置温育一段时间；以及检测微生物的存在与否。在任何上述实施例中，所述培养基装置可包含所述培养基和/或所述pH指示剂。在所述方法的一些实施例中，所述培养装置还可包含选择剂。在本方法的一些实施例中，温育所述培养装置可包括在好氧条件下和/或在厌氧条件下温育所述装置。在任何上述实施例中，检测微生物的存在与否可包括区分微生物。在一些实施例中，区分微生物可包括检测PH指示剂反应或检测与所述微生物相关的气泡。在任何上述实施例中，该方法还可包括将所述样品与能中和化学消毒剂的稀释剂合并。在任何上述实施例中，可将所述培养基的pH调节至pH低于6. 5，其中检测微生物的存在与否包括检测产酸微生物的存在与否。在任何上述实施例中，该方法可还包括提供抗真菌剂。在任何上述实施例中，所述 PH指示剂可选自例如氯酚红、溴甲酚紫、溴酚蓝和溴甲酚绿。在任何上述实施例中，该方法可还包括对微生物进行计数的步骤。在任何上述实施例中，该方法还可包括提供成像系统和获得所述培养装置的图像，其中检测微生物的存在与否包括显示、打印或分析所述培养装置的图像。在一些实施例中，所述方法还可包括提供图像分析系统，其中分析图像包括用图像分析系统分析图像。在另一方面，本专利技术提供薄膜培养装置。该培养装置可包括主体构件，该主体构件包括具有上表面和下表面的自支承式防水基材。该培养装置可还包括在所述基材的上表面上的干涂层。该干涂层可包含支持产酸菌生长的培养基；冷水可溶性胶凝剂；变色域在PH7. 0下延伸的pH指示剂；以及任选地，抗真菌剂。在一些实施例中，该培养装置还可包括覆盖片。在一些实施例中，该覆盖片还可包括涂层，该涂层包含冷水可溶性胶凝剂和/或指示齐IJ。在任何上述实施例中，该装置可还包含可被产酸菌发酵的碳水化合物。在任何上述实施例中，所述PH指示剂可选自例如氯酚红、溴甲酚紫、溴酚蓝和溴甲酚绿。在任何上述实施例中，该培养基可包含聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单油酸酯或乙酸钠。在该培养装置的任何上述实施例中，可将所述培养基的pH调节至pH低于6. 5。在又一个方面，本专利技术提供了套件。该套件可包括薄膜培养装置，该装置包括冷水可溶性胶凝剂、支持产酸菌生长的培养基、可被产酸菌发酵的碳水化合物和PH指示剂。在一些实施例中，该套件的培养基可包含抗真菌剂。在一些实施例中，该套件的培养基可包含PH指示剂或可被产酸菌发酵的碳水化合物。在一些实施例中，该套件的培养装置可包含所述培养基、所述可被产酸菌发酵的碳水化合物、所述PH指示剂或上述物质中任意两种或更多种的组合。在上述实施例中的任一者中，该套件可装有样品制备附属物，所述附属物选自样品稀释剂、缓冲剂、样品采集装置和移液管。在任何上述套件实施例中，可将培养基的PH调节至pH低于6. 5。词语“优选的”和“优选地”指在某些情况下，可以提供某些有益效果的本专利技术实施例。然而，在相同的情况或其他情况下，其他实施例也可以是优选的。此外，对一个或多个优选的实施例的表述并不暗示其他实施例是不可用的，且并非意图将其他实施例排除在本专利技术范围之外。本文所用的“一种(个)”、“所述(该)”、“至少一种(个)”以及“一种或多种(一个或多个)”可互换使用。因此，例如，怀疑含有“一种”微生物的样品可被理解为意指该样品可包含“一种或多种”微生物。术语“和/或”意指所列要素的一个或全部，或所列要素的任意两个或更多个的组口 o另外，本文通过端点表述的数值范围包括该范围内的所有数值(例如，1-5包含I、I. 5,2,2. 75,3,3. 80、4、5 等)。本专利技术的上述
技术实现思路
并非意图描述本专利技术的每一个公开的实施例或每种实施方式。以下具体实施方式更具体地举例说明了示例性实施例。在本专利申请全文的几处，通过实例列表提供指导，可以不同组合使用这些实例。在每一种情况下，所列举的列表均仅充当一个代表性的群组，而不应被理解为是排他性列表。附图说明 本专利技术将结合下面所列的附图进行进一步的阐述，其中在几个视图中相同的结构由相同的数字指代。图I是薄膜培养装置的一个实施例的顶部透视图(局部剖视)。图2是具有网格图案的自支撑基材的一个实施例的顶视图。图3是薄膜培养装置的一个实施例的顶部透视图(局部剖视)。图4是包括隔片和捕集元件的薄膜培养装置的一个实施例的顶部透视图(局部剖视)。图5是根据本专利技术的检测系统的一个实施例的框图。图6是用发射绿光的二极管照明的PET本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗伯特·F·杨，帕特里克·A·马赫，迈克尔·E·休吉斯，克里斯蒂娜·A·宾斯费尔德，贾森·W·比约克，玛拉·S·赖夫温纳，亨利·J·吕布朗特，
申请(专利权)人：三M创新有限公司，
类型：发明
国别省市：