从血液或血液级分中分离的凝血酶制造技术

本发明专利技术涉及有关生成和使用凝血酶的方法、装置和组合物。所述方法包括通过从液体中沉淀纤维蛋白原来制备包含凝血酶的溶液，所述液体包含全血或血液级分。从所述液体中除去所沉淀的纤维蛋白原，以形成沉淀后液体，所述沉淀后液体与钙、多个珠一起孵育以形成凝块。将包含凝血酶的溶液与所述凝块分离。由此制备的凝血酶可用作组织封闭剂，以及用在给对象施用组织封闭剂(包括施用自体组织封闭剂)的方法中。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及从血液或血液级分中分离凝血酶的方法，包括用这种方法产生的组合物和施用这些组合物的方法。
技术介绍
全血，如人的全血，含有多种蛋白质、细胞以及其他成分。例如，全血可分离为血液级分如富血小板血浆和贫血小板血浆。全血和血浆级分包含各种凝血因子，如凝血酶,这些凝血因子可形成凝块来愈合组织或皮肤的损伤或别的破口。凝血酶是能够活化多种凝血因子并且可活化血小板的多功能丝氨酸蛋白酶。凝 血酶可通过活化的因子X(Xa)对凝血酶原上两个位点的酶切由凝血酶原产生。因子Xa的活性可通过与活化的因子V(Va)结合而增强，其称作凝血酶原复合物。一旦形成，凝血酶介导的纤维蛋白原通过蛋白水解而消化为纤维蛋白单体，启动了可导致凝块形成的反应级联，这通常是伤口愈合的第一步。凝血酶还可作为伤口愈合所涉及细胞的化学吸引剂(chemo-attractant)发挥功能,所得纤维蛋白网络具有很多的功能,其包括作为产生胶原蛋白的成纤维细胞的支架、增加吞噬作用、促进血管发生、以及结合生长因子，其可进一步支持愈合过程提供。血小板也可从非结合模式活化为结合模式。作为促凝血物质，凝血酶在制止出血(即生理止血)中发挥重要作用本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于制备包含凝血酶的溶液的方法，所述方法包括：从包含贫血小板血浆或全血的液体中沉淀纤维蛋白原；从所述液体中除去沉淀的纤维蛋白原以形成沉淀后液体；将所述沉淀后液体与钙和多个珠一起孵育以形成凝块；和将包含凝血酶的溶液与所述凝块分离。

【技术特征摘要】
2011.05.02 US 13/099,0871.用于制备包含凝血酶的溶液的方法，所述方法包括 从包含贫血小板血浆或全血的液体中沉淀纤维蛋白原； 从所述液体中除去沉淀的纤维蛋白原以形成沉淀后液体； 将所述沉淀后液体与钙和多个珠一起孵育以形成凝块；和 将包含凝血酶的溶液与所述凝块分离。2.根据权利要求I的方法，其中所述包含贫血小板血浆或全血的液体包含贫血小板血浆。3.根据权利要求I的方法，其中所述包含贫血小板血浆或全血的液体还包含抗凝血剂。4.根据权利要求3的方法，其中所述抗凝血剂包括酸-柠檬酸盐-葡萄糖溶液。5.根据权利要求I的方法，其中所述沉淀步骤包括向所述包含贫血小板血浆或全血的液体中添加有机溶剂。6.根据权利要求5的方法，其中所述有机溶剂包括甲醇、乙醇、丙酮或其组合。7.根据权利要求I的方法，其中所述孵育步骤包括孵育约5分钟至约10分钟。8.根据权利要求I的方法，其中所述包含贫血小板血浆或全血的液体还包含螯合剂，并且钙以大于所述螯合剂可结合之量的量存在。9.根据权利要求I的方法，其中所述珠包括玻璃珠、聚苯乙烯珠或其组合。10.根据权利要求I的方法，其中将包含凝血酶的溶液与所述凝块分离包括离心所述凝块和取出作为包含凝血酶之溶液的一部分上清。11.根据权利要求I的方法，其还包括以下步骤中的至少之一向所述包含凝血酶的溶液中加入甘油、多羟基化合物或醇；向所述包含凝血酶的溶液中加入螯合剂以螯合钙；将所述包含凝血酶之溶液的PH调节到低于7 ;以及降低所述包含凝血酶之溶液的温度。12.根据权利要求I的方法，其中 从包含贫血小板血浆或全血的液体中沉淀纤维蛋白原包括向贫血小板血浆中添加乙醇； 从所述液体中除去沉淀的纤维蛋白原以形成沉淀后液体包括过滤所述液体； 将所述沉淀后液体与钙和多个珠一起孵育以形成凝块包括将所述沉淀后液体、氯化钙和珠混合；和 将包含凝血酶的溶液与所述凝块分离包括将所述凝块离心并取出作为包含凝血酶之溶液的一部分上清。13.根据权利要求I的方法，其中 从包含贫血小板血浆或全血的液体中沉淀纤维蛋白原包括将贫血小板血浆或全血抽吸到含有乙醇的注射器中，其中当所述液体包含全血时，所述注...

【专利技术属性】
技术研发人员：希拉里·奥弗霍尔泽，珍妮弗·E·沃德尔马伊，
申请(专利权)人：拜欧米特生物制剂有限责任公司，
类型：发明
国别省市：