hGH和rhIGF-1组合的制剂制造技术

本发明专利技术涉及药物组合物。更具体地，本发明专利技术涉及生长激素(GH)和胰岛素样生长因子(IGF-1)组合组合物的制剂，其在所希望的pH值下提供稳定的药物组合物而不形成聚集，本发明专利技术还涉及其制备方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】hGH和rhlGF-1组合的制剂本专利技术涉及药物组合物。更具体地，本专利技术涉及生长激素(GH)和胰岛素样生长因子(IGF-I)组合组合物的制剂。这些组合组合物在所希望的pH值下提供稳定的液体药物组合物而不形成可见的不溶性聚集物。本专利技术进一歩提供了胰岛素样生长因子I(IGF-I)和生长激素(GH)的制剂，其中蛋白质可以一起配制成可注射形式，或者分别配制并且在施用之前混合成单位剂量的可注射形式。 胰岛素样生长激素属于称为生长调节素的多肽家族 ，并且是ー种天然存在于人体体液中的多肽。大多数组织并且特别是肝脏产生IGF-I与特异性IGF-结合蛋白。IGF-I刺激多种细胞类型的生长和分裂，特别是在发育过程中，因此，例如骨骼生长和细胞复制的过程均受IGF-I水平的影响。这些分子均受控于生长激素(GH)。IGF-I是介导GH对骨的生长促进作用的主要蛋白质激素。IGF-1是响应于GH而产生的，然后诱导随后的细胞响应，包括骨中的细胞响应。IGF-I是由70个氨基酸组成的单链，具有3个分子内ニ硫键。IGF-I的分子量为7649道尔顿，并且主要由肝脏作为ー种内分泌激素产生，并且在靶组织中以旁分泌/自分泌方式产生。IGF-I已经利用酵母和大肠杆菌(E. coli)大規模重组生产(rhIGF-1)。生长激素或人生长激素(hGH)是由191个氨基酸组成的单链多肽。ニ硫键链接在第53位和第165位以及第182位和第189位。人GH是ー种强效的合成代谢剂(anabolicagent)。其中在垂体机能減退(GH缺乏)的个体中最引人注目的作用在于加速导致身高增长的骨生长板软骨的线性增长。国际专利申请W09118621描述了两种蛋白质的组合的优点和协同作用。将IGF-1和GH共施用给哺乳动物导致生长增长超过单独使用IGF-I或GH实现的生长。增长等于当施用IGF-I时所观察到的生长和当施用GH时所观察到的生长的总和。国际专利申请WO 2006/130769中还公开了提高生长速度的方法和组合物。该研究主要涉及治疗方法和集中于患者反应的結果。描述了药物组合物，并且特别是在甘露醇、甘氨酸和/或在pH 7. 4磷酸盐中配制的IGF-I和GH的混合物。如果要储存混合物，将其配制在缓冲液中，例如PH值为约6的含有在该pH值下增加GH溶解度的表面活性剂例如聚山梨酯20或泊洛沙姆188的柠檬酸盐。它还描述了添加无机盐和稳定剂的可行性。WO2006/130769中公开的制剂中没有使用非聚集剂。当将两种蛋白质合并在溶液中时经常出现的问题是由于蛋白质-蛋白质相互作用形成复合物。这种复合物的形成特别受含蛋白质的溶液中浓度、温度、PH值和缓冲液的变化的影响。然后，该蛋白复合物可以形成引起蛋白质效カ和活性损失的不溶性聚集物。此外，在药物制剂中，治疗性蛋白质的剂量是重要的，并且必须在可控范围内长期保存。往往需要使用增溶剂来获得并維持溶液中蛋白质的适合浓度，并且特别是溶解大量的蛋白质。美国专利6，767，892公开了含增溶化合物例如精氨酸、N-こ酰基精氨酸或盐酸胍IGF-I的IGF-I及其类似物的药物组合物。对组合物进行了测试，比较数据表明IGF-I在大于5. O的pH值下并且在冷藏温度下的溶解度増加。然而，该文献没有公开包含IGF-I与进ー步的治疗性蛋白质组合的组合物。本专利技术的ー个目的是制备包含IGF-I和生长激素(GH)的液体制剂，其在4°C下稳定至少30天，通过溶液的视觉澄清度证明没有显著的聚集。本专利技术的进ー步的目的是用于制备包含IGF-I和GH的液体制剂的方法。附图说明图I :显示通过分析性超速离心IGF-I溶液、GH溶液和这两种溶液的I: I混合物获得的重叠沉降速度曲线。第一组曲线(图I)是利用在PH 6时配制在25mM柠檬酸盐缓冲液中的蛋白质获得的，并且显示蛋白质之间的实质性关联的证据。图2 :显示包含IOOmM精氨酸离子(精氨酸)的溶液的沉降曲线。该曲线显示精氨酸的存在产生指示溶液中高分子量聚集物的量减少的变化。 阐明下述定义以举例说明和定义用来描述本专利技术各术语的含义和范围。根据本专利技术，术语“非聚集剂”涉及当将蛋白质置于溶液中时防止或減少不溶性蛋白质聚集物形成的化合物。术语“IGF-1”指胰岛素样生长因子-1，其来自任何物种，包括但不仅限于牛科动物、羊、猪科动物、鸟类并且优选人的天然序列或变体形式以及来自天然合成或重组的任何来源。优选地，IGF-I是如例如US 6，331，414所述重组产生的。更优选地，IGF-I是市售产品INCRELEX 中的活性药物成分。术语“rhIGF-Ι ” 指重组人 IGF-1。术语“GH”指生长激素，其来自任何物种，包括但不仅限于牛科动物、羊、猪科动物、鸟类并且优选人的天然序列或变体形式以及来自天然合成或重组的任何来源。术语“人生长激素”和“ hGH”涉及通过包括天然来源的提取和纯化的方法和由重组细胞培养体系所产生的人生长激素，例如科学出版物“Direct expression in Escherichiacoli of a DNA sequence coding forhuman growth hormone (编码人生长激素的DNA序列在大肠杆菌中的直接表达)”Goeddel&al，Nature第281卷，1979年10月中公开的。hGH的序列在例如 Hormone Drugs, Gueriguian 等人，USP convention, Rockville, MD (1982)中已阐明。该术语还包括生物活性的人激素等价物，例如包括整个序列中ー个或多个不同的氨基酸。此外，本申请中所用的术语g在包括替换、删除和插入hGH的氨基酸变体，即经翻译后修饰的ー种或多种hGH的类似物和/或同系物。通常使用的两个物种是191个氨基酸的天然物种(生长激素)和192个氨基酸的N-末端甲硫氨酸物种，都是重组获得的。优选使用在大肠杆菌中产生的甲硫氨酰基人生长激素(met-hGH)，由Genentechj Inc. 以商标PROTUGPINW出售，并且除了存在N-末端甲硫氨酸残基之外其与天然多肽相同。还优选的是可从Genentech，Inc.获得的商标为的重组hGH。更优选的是可从Genentech，Inc.获得的商标为NUTROP丨N AC} 的重组rhGH注射用液体。本文所用的术语“缓冲液”指pH优选为5-6. 5的可药用缓冲液。适合的缓冲液包括但不限于醋酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液、琥珀酸盐缓冲液和氨基酸缓冲液，例如组氨酸缓冲液及其所有盐。本文所用的术语“防腐剤”意指防止通过微生物生长或不期望的化学变化引起分解的可药用物质。本文所用的术语“表面活性剤”意指通过降低溶剂(例如水)的表面张カ或两种不互溶液体之间的界面张カ从而实现分散或混悬的可药用物质。适合的表面活性剂例如为非离子型表面活性剤，例如聚山梨酯或泊洛沙姆。本文所用的术语“填充剂”意指用于增加固体的量的可药用物质，并且例如蔗糖、海藻糖和甘露醇，但不限于所列举的那些。术语“张カ修饰剂”指给缓冲溶液提供重量克分子渗透浓度的等渗修饰剂或渗透压调节剂或渗透调节物质。重量克分子渗透浓度指由离子和非离子化分子提供给溶液的总、滲透活性，所述溶液包括无机盐例如氯化钠和氯本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.11.17 US 61/261,8591.药物组合物，该药物组合物包含IGF-I和GH以及 非聚集剂； 缓冲液； 表面活性剂； 任选的防腐剂；和 任选的张力修饰剂或填充剂， 其中组合物中存在的非聚集剂的浓度为至少约80mM。2.权利要求I的药物组合物，其中非聚集剂是精氨酸(精氨酸离子)或赖氨酸。3.权利要求2的药物组合物，其中非聚集剂是精氨酸，浓度范围为约80mM至约200mM、优选范围为约IOOmM至约150mM。4.前述权利要求中任ー项的药物组合物，其中缓冲液选自组氨酸、琥珀酸盐或柠檬酸盐，浓度范围为约I至50mM、优选范围为约10至20mM。5.前述权利要求中任一项的药物组合物，其中表面活性剂是非离子型表面活性剤。6.权利要求5的药物组合物，其中非离子型表面活性剂是聚山梨酯20，浓度范围为约O.I 至 O. 3%(w/w)、优选为约 O. 2%(w/w) ο7.权利要求5的药物组合物，其中非离子型表面活性剂是泊洛沙姆188，浓度范围为约O.I 至 O. 5%(w/w)、优选为约 O. 3%O8.前述权利要求中任一项的药物组合物，其中张カ修饰剂是氯化钠。9.前述权利要求中任一项的药物组合物，其中填充剂是甘露醇和/或蔗糖。10.权利要求8的药物组合物，其中张カ修饰剂是氯化钠，浓度范围为约I至约50mM。11.前述权利要求中任一项的药物组合物，其中防腐剂是苯甲醇或苯酚。12.权利要求10的防腐剤，其中防腐剂是苯甲醇，浓度范围为约O.2至约2%(w/w)、优选为约1%。13.前述权利要求中任一项的药物组合物，其中IGF-I= GH重量比(w/w)范围为约1:1至 I:9(w/w)。14.权利要求I至12中任一项的药物组合物，其中IGF-I= GH重量比(w/w)范围为约I: I (w/w)至 7:1 (w/w),并且优选值为 I. I: I (w/w) >2. 2:1 (w/w) >3. 3:1 (w/w)或6· 6:1 (w/w)。15.前述权利要求中任一项的药物组合物，其中药物组合物的pH范围为约5.O至约6.5、优选约5. 4至约6. 2并且更优选约5. 8至约6. 2。16.权利要求I至14中任一项的药物组合物，其为在预填充注...

【专利技术属性】
技术研发人员：E·戈皮纳特，S·帕克，荒川务，J·理查德，F·费斯，
申请(专利权)人：益普生制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：