本发明专利技术涉及一种以栀子为原料生产纯度大于95%的藏红花素的方法，本发明专利技术采用常温水渗漉提取，可以有效减少果胶和蛋白等杂质的提出，避免给后续分离纯化带来困难。提取前粉碎栀子果实时避免种子破碎，减少油脂的提出。水提液微滤可除去水提液中的固体颗粒和果胶等杂质，并滤除细菌等微生物，微滤后的水提液可以直接上大孔树脂柱连续吸附。同时采用精细大孔树脂代替常规的粗粒径大孔树脂进行吸附层析，将常压技术升级到加压技术，用连续循环层析方法取代传统的线性层析方法，提高了柱效和层析效率，配合C18柱精制，可以直接得到藏红花素纯品。整个工艺流程简单，节省溶剂，成本低，高效环保，适合工业化生产纯度大于95%的藏红花素产品。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种以桅子为原料生产纯度大于95%的藏红花素的方法，属于天然产物提取分离纯化领域。
技术介绍
桅子成熟果实中含有约0. 5%的藏红花素，又名α -藏红花素、西红花苷-1，是水溶性类胡萝卜素化合物，具有很强清除自由基、抗氧化和抗癌活性。藏红花素纯品的制备有一定难度，即使从Sigma公司购买的标准品纯度也低于95%。目前实验室提取藏红花素常采用水或含水乙醇浸提，经大孔吸附树脂柱和硅胶柱反复层析、梯度洗脱，再通过重结晶得到藏红花素纯品。现有技术难以实现工业化生产，直接影响到藏红花素这一活性物质的应用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种以桅子为原料生产纯度大于95%的藏红花素的方法， 适合工业化生产纯度95%以上的藏红花素产品。本专利技术通过如下技术方案实现包括水渗漉提取、微滤、高效大孔树脂柱层析、C18 柱精制和柱的活化再生；其制备方法包括以下步骤(1)提取将桅子干果原料粉碎至10-40目，室温下用8-15倍量纯水浸泡0.8-1. 2小时，然后共用25-35倍原料量的纯水渗漉提取，4-8小时渗漉提取完全，得到提取液A ；(2)微滤提取液A过0.2-1微米的陶瓷膜，得到澄清滤液B ；(3)大孔树脂柱层析上样吸附使用5节ZT-02大孔树脂吸附柱，将澄清滤液B先上第一节柱吸附，至流出液为微红色时，在第一节柱的尾端接上第二节柱，继续吸附至第二节柱流出液为微红色时，在第二节柱尾端串上柱C，至柱C流出液微红色，取下柱C ；重新在第二节柱尾端，接上柱D，同柱C处理方法一样，以此类推，直到完成柱E ；然后，第一、二节柱用乙醇和水再生，乙醇液回收溶剂，并入提取液A，重复上样吸附过程；整个上样过程控制在压力3Mpa内，流速控制在10-20分钟一个柱体积。(4)分离纯化分别将柱C、D和E的尾端接上一节ZT-03大孔树脂柱，用4_8倍柱体积15-25%乙醇循环洗脱除去杂质，最后用2-3倍柱体积80%乙醇洗脱色素，洗脱液浓缩和烘干，得藏红花素粗品F，其中藏红花素含量在60-70% ；整个分离过程控制在压力3Mpa 内，流速控制在5-10分钟一个柱体积；(5) C18柱精制将得到的藏红花素粗品F用3倍量60-90%乙醇热溶，再加水稀释 8-10倍，上第一节C18柱吸附，待吸附饱和，下面接第二节C18柱，用30-60%乙醇将第一节 C18柱中的红色带全部洗脱至第二节柱内；然后取下第一节柱，接在第二节柱下面，继续用 30-60%乙醇洗脱，至流出液颜色微红；取下位于下面的第一节C18柱，用60-90%乙醇将红色带洗出，洗脱液于4° C冰箱中静置即有红色粉末析出；滤出红色粉末，低温真空烘干，将烘干所得物粉碎至200-300目，得到鲜红色粉末，为纯度大于95%的藏红花素产品G ；(6)柱的活化再生当柱的分离能力下降十分之一时，分别用2-4%氢氧化钠水溶液， 2-4%盐酸水溶液，水，95%乙醇，水依次在线清洗、活化再生，每种溶液用量为2-4倍柱体积， 整个清洗过程控制在压力3Mpa内，流速控制在5-10分钟一个柱体积；所述的百分数为质量百分数。 本专利技术采用常温水渗漉提取，可以有效减少果胶和蛋白等杂质的提出，避免给后续分离纯化带来困难。提取前粉碎桅子果实时避免种子破碎，减少油脂的提出。水提液微滤可除去水提液中的固体颗粒和果胶等杂质，并滤除细菌等微生物，微滤后的水提液可以直接上大孔树脂柱连续吸附。同时采用精细大孔树脂代替常规的粗粒径大孔树脂进行吸附层析，将常压技术升级到加压技术，用连续循环层析方法取代传统的线性层析方法，提高了柱效和层析效率，配合C18柱精制，可以直接得到藏红花素纯品。整个工艺流程简单，节省溶剂，成本低，高效环保，适合工业化生产纯度大于95%的藏红花素产品。具体实施方式本专利技术通过下面的实施例可以对本专利技术作进一步的描述，然而，本专利技术的范围并不限于下述实施例。本专利技术藏红花素(α - Crocin, α -藏红花素，西红花苷-1)的分子结构本专利技术R= β -D-gentiobiosyl (龙胆二糖)的分子结构权利要求1.一种以桅子为原料生产纯度大于95%的藏红花素的方法，它包括水渗漉提取、微滤、 大孔树脂柱层析、C18柱精制和柱的活化再生，其特征在于其制备方法中水渗漉提取的工艺为将桅子干果原料粉碎至10-40目，室温下用8-15倍量纯水浸泡0. 8-1. 2小时，然后用 25-35倍原料量的纯水渗漉提取，4-8小时渗漉提取完全，得到水渗漉提取液，再将水渗漉提取液进入下一道工艺。2.根据权利要求1所述的一种以桅子为原料生产纯度大于95%的藏红花素的方法，其特征在于其制备方法中微滤的工艺为水渗漉提取液过0. 2-1微米的陶瓷膜，得到微滤澄清滤液，再将微滤澄清滤液进入下一道工艺。3.根据权利要求1所述的一种以桅子为原料生产纯度大于95%的藏红花素的方法，其特征在于其制备方法中大孔树脂柱层析上样吸附的工艺为将三节ZT-02大孔吸附树脂柱串联上样吸附，将第三节柱进一步分离纯化。4.根据权利要求3所述的一种以桅子为原料生产纯度大于95%的藏红花素的方法，其特征在于其制备方法中大孔树脂柱层析上样吸附的工艺为使用5节ZT-02大孔树脂吸附柱，将微滤澄清滤液先上第一节柱吸附，至流出液为微红色时，在第一节柱的尾端接上第二节柱，继续吸附至第二节柱流出液为微红色时，在第二节柱尾端串上柱C，至柱C流出液微红色，取下柱C ；重新在第二节柱尾端，接上柱D，同柱C处理方法一样，以此类推，直到完成柱E ；然后，第一、二节柱用乙醇和水再生，乙醇液回收溶剂，并入水渗漉提取液，重复上样吸附过程；整个上样过程控制在压力3Mpa内，流速控制在10-20分钟一个柱体积。5.根据权利要求4所述的一种以桅子为原料生产纯度大于95%的藏红花素的方法，其特征在于其制备方法中分离纯化的工艺为分别将柱C、D和E的尾端接上一节ZT-03大孔树脂柱，用4-8倍柱体积15-25%乙醇循环洗脱除去杂质，最后用2-3倍柱体积80%乙醇洗脱色素，洗脱液浓缩和烘干，得藏红花素粗品，其中藏红花素含量在60-70% ；整个分离过程控制在压力3Mpa内，流速控制在5-10分钟一个柱体积；所述的百分数为质量百分数。6.根据权利要求1所述的一种以桅子为原料生产纯度大于95%的藏红花素的方法，其特征在于其制备方法中C18柱精制的工艺为将得到的藏红花素粗品用3倍量60-90%乙醇热溶，再加水稀释8-10倍，上第一节C18柱吸附，待吸附饱和，下面接第二节C18柱，用 30-60%乙醇将第一节C18柱中的红色带全部洗脱至第二节柱内；然后取下第一节柱，接在第二节柱下面，继续用30-60%乙醇洗脱，至流出液颜色微红；取下位于下面的第一节C18 柱，用60-90%乙醇将红色带洗出，洗脱液于4° C冰箱中静置即有红色粉末析出；滤出红色粉末，低温真空烘干，将烘干所得物粉碎至200-300目，得到鲜红色粉末，为纯度大于95%的藏红花素产品G ；所述的百分数为质量百分数。7.根据权利要求1所述的一种以桅子为原料生产纯度大于95%的藏红花素的方法，其特征在于其制备方法包括以下步骤(1)提取将桅子干果原料粉碎至10-40目，室温下用8-15倍量纯水浸泡0.8-1. 2小时，然后共用25-35倍原料量的纯水渗漉提取，4-8本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：袁晓，王国艳，叶巍，周东斌，林顺权，杨威，曹健，林志芬，林立克，杨毅融，
申请(专利权)人：江西中天农业生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：
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