用于递送活性化合物的胶态系统的制备方法技术方案

本发明专利技术涉及用于制备胶态系统例如纳米胶囊和纳米粒子的方法，所述方法包含用于减小粒子尺寸的均质化步骤。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及用于制备胶态系统例如纳米胶囊和纳米粒子的方法，所述方法包含用于减小粒子尺寸的均质化步骤。
技术介绍
取决于给药途径和分子的物理化学和形态特征两者，用于治疗目的的生物活性分子的给药存在大量困难。由于人类和动物身体中上皮屏障的通透性有限，一些药物，包括肽、蛋白质和多糖在内，不能通过粘膜表面有效吸收。已证实，将大分子掺入到纳米尺寸系统中使它们更容易穿透上皮屏障，并保护它们免于降解。因此，提出了能够与所述屏障相互作用的纳米颗粒系统作为有希望的策略，以便实现活性成分通过粘膜的穿透。在这种意义上，已进行了重要的研究工作，其目的在于开发具有正的净电荷的胶态系统，从而允许所述系统通过具有阳离子特征的生物环境被吸收和/或粘附于生物膜(粘膜和皮肤)。因此，已描述了大量基于由亲脂核构成并用脱乙酰壳多糖包被的纳米乳液和纳米胶囊，用于通过不同途径给药活性成分的系统[WO96/37232；Calvo等，Colloid.Polym.Sci.，1997，275，46-53；El-Shabouri，Intern.J.Pharmac，2002，249，101-8；Filipovic-Grcic，J.Microencap.，2001，18(1)，3-12]。亲水性脱乙酰壳多糖聚合物掺入到水性相中为所述系统提供了正的净电荷。然而，这些纳米胶囊系统的使用产生了一些不稳定性问题，因为在超过一个月的储存期中，它们的组成导致活性成分从亲脂相逐渐释放。文献EP 1834635A1描述了纳米胶囊系统，所述系统包含磷脂和油的亲脂核以及脱乙酰壳多糖的亲水相，其除了具有结合活性亲脂分子并将它们在适合的生物环境中释放的极大能力之外，在其储存和运输期间还具有明显提高的稳定性。在所述纳米胶囊系统的制备中使用的所有方法都基于溶剂驱替方法(solvent-displacing process)，在该方法中，在亲脂相与含脱乙酰壳多糖的水性相混合后，自发形成纳米胶囊。然而，源于这种溶剂驱替方法的一个缺点是亲脂相的有机溶剂向水性相扩散，冲走了活性成分。因此，在随后的溶剂蒸发阶段和水性相浓缩中，活性成分沉淀形成晶体。因此，所使用的有机溶剂极为依赖于它在水性相中扩散的能力。例如，当包封环孢素时，由于优选的混合物乙醇/甲醇向水性相快速扩散，因此需要使用丙酮，尽管它有毒性。此外，能够掺入到亲脂相中的油的量相当有限，因为大量使用导致形成独立的球滴，其倾向于在乳液表面中形成聚集体而不被脱乙酰壳多糖覆盖。这种特点相当大地限制了掺入到纳米胶囊中的活性成分的量，因为所述油构成了所述活性成分溶解于其中的介质。这种方法的另一个缺点是在混合亲脂相和水性相后形成的悬液被高度稀释，并且在纳米胶囊一经形成后，必须在随后的步骤中蒸发掉大量有机溶剂和水。这使得所述方法从工业角度来看没有生命力，因为蒸发过程非常耗时。此外，为了避免制剂的去稳定化、游离油的存在以及搅拌-蒸发过程后脱乙酰壳多糖聚集体的形成，需要大量水。脱乙酰壳多糖在纳米颗粒的配制中也被用作天然和生物相容的聚合物(WO01/32751、WO99/47130)。它也与带负电荷的聚合物例如糖胺聚糖(WO2004/112758、WO2007/135164)或阴离子多糖例如硫酸软骨素(WO2007/031812)组合使用。用于制备脱乙酰壳多糖纳米粒子的方法基于亲离子凝胶化方法(ionotropic gelification process)，在该方法中，在将含脱乙酰壳多糖的水性溶液与含有带负电荷聚合物和交联剂的另一种水性溶液混合后，纳米粒子通过脱乙酰壳多糖与带负电荷分子之间的静电相互作用自发形成。然而，这种方法与脱乙酰壳多糖浓度直接相关，因为溶液越浓，纳米粒子的尺寸越大。因此，为了获得在纳米范围内的粒子，需要低的脱乙酰壳多糖浓度，其对方法的得率有不利影响。另一方面，用于制备纳米颗粒系统的均质化技术在现有技术中已广泛描述[WO98/07414、WO02/051390、WO03/042251、WO01/89522、WO2005/072709、WO2007/069272、WO2007/059118]。均质化是使用动态高压均质作用降低液体药品的粒子尺寸，来制备稳定得多的活性药剂分散相以增加临床有效性的方法。然而，上面提到的文献都没有描述制备胶态系统例如包含被脱乙酰壳多糖亲水相包围的磷脂和油的亲脂核的纳米胶囊、或网状脱乙酰壳多糖的纳米粒子的均质化方法，也没有提出这种方法赋予所述胶态系统以特殊优点。考虑到这些数据，非常需要开发克服了源于现有技术状态中所描述方法的问题的、用于制备所述胶态系统的方法。专利技术简述本专利技术的作者开发了用于制备胶态系统的新方法，所述方法包含均质化步骤，其克服了源于现有技术的方法例如溶剂驱替方法和经典的亲离子凝胶化方法的许多问题。因此，与其中通过混合亲脂相和水性相而自发形成纳米胶囊的溶剂驱替方法相反，本专利技术的方法允许将以重量计至少2％并高达以重量计4％的活性成分包封到纳米胶囊中，而不在纳米系统中形成沉淀的晶体。通过本专利技术的方法，用于每种活性分子的优选溶剂甚至可能以低得多的量使用，其允许使用高浓度活性成分并便于胶态系统的制备，因为事实上免除了溶剂蒸发阶段。源于本专利技术方法的另一个优点是，与溶剂驱替方法相比，纳米胶囊的平均有效尺寸显著减小。该特点对于系统的效能并因此对于活性成分的释放真正有利，因为纳米胶囊的尺寸减小增加了亲脂相与亲水相之间的比表面，从而增加亲脂相与生物环境(皮肤和粘膜)之间的接触并使活性成分的释放更加容易。此外，本专利技术的方法还允许将更大量的油掺入到亲脂相中而不形成聚集体，这为系统提供了长期稳定性以及添加更大量亲脂性活性成分的可能性。将更大量的、甚至高达以重量计2.5％的脱乙酰壳多糖掺入水性相也是可能的，取决于待掺入的活性成分和待治疗的指征，这有时是重要的。此外，因为与溶剂驱替方法相比，初始水性溶液中的水可以减少35重量％，因此能够获得浓得多的制剂而不会使系统不稳定。事实上，本专利技术的方法允许将乳液的浓度增加12倍，因此导致蒸发过程的显著减少，这使得方法更经济也更安全、更快速和成本效益比更高。另一方面，与其中通过混合两种水性相而自发形成纳米粒子的经典亲离子凝胶化方法相比，本专利技术的方法允许即使在脱乙酰壳多糖浓度显著增加的情况下本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.06.08 EP 09382089.21.用于制备尺寸小于1μm的胶态系统的方法，所述方法包含：
a)在有机溶剂存在或不存在下提供亲脂相，该亲脂相包含：
a.1)至少磷脂组分；和
a.2)油；以及
a.3)生物活性亲脂分子；
b)提供水性相，该水性相包含：
b.1)脱乙酰壳多糖或其衍生物；以及
b.2)聚氧亚烷基化化合物；
c)将所述亲脂相和水性相混合以便形成乳液；
d)对所述乳液进行均质化处理以形成平均有效粒子尺寸小于1
μm的纳米胶囊；
或作为替代
e)提供水性溶液，其包含脱乙酰壳多糖或其衍生物以及任选的选
自葡甘露聚糖、透明质酸、聚氧亚烷基化化合物及其衍生物的聚合物，
f)提供水性溶液，其包含交联剂和生物活性分子；
g)将所述两种水性溶液混合以便形成团集物；以及
h)对所述团集物进行均质化处理以形成平均有效粒子尺寸小于1
μm的粒子。
2.权利要求1的方法，其中磷脂组分是卵磷脂。
3.权利要求1或2的方法，其中，相对于包括水的胶态系统的总
重量，油以重量计至少7％的比例添加。
4.权利要求1至3的方法，其中油是蓖麻油。
5.权利要求1至4任一项的方法，其中聚氧亚烷基化化合物是聚
环氧乙烷或环氧乙烷-环氧丙烷共聚物。
6.权利要求1至5任一项的方法，其中相对于包括水的胶态系统
的总重量，磷脂组分的比例以重量计在0.5％至20％之间。
7.权利要求6的方法，其中相对于包括水...

【专利技术属性】
技术研发人员：阿纳·贝伦·库斯塔雷盖罗，阿纳·伊萨贝尔·维拉佩纳，
申请(专利权)人：阿纳·贝伦·库斯塔雷盖罗，阿纳·伊萨贝尔·维拉佩纳，
类型：发明
国别省市：