一株苯酚降解真菌及其应用制造技术

技术编号:7244666 阅读:369 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及一株苯酚降解真菌,该真菌菌株为黄曲霉(Aspergillusflavus)真菌菌株PHDE-4,已于2011年8月31号保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCCNo.5189;本发明专利技术的苯酚降解真菌株PHDE-4,具有较强的环境耐受力,可以在宽的温度、pH及较为苛刻的环境条件下,以苯酚为唯一碳源和能源生长繁殖,具有较好地清除环境中苯酚污染的能力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于环境微生物领域,具体的是涉及一株苯酚降解真菌,该菌株可在 PH5. 0-8. 0,温度10°C -40°C的条件下,对苯酚进行生物降解。
技术介绍
苯酚做为防腐剂在油漆、皮革和纺织品工业中广泛地使用,同时也用在酚树脂、消毒剂、药物,己内酰胺和双酚A的生产中(Rana Kidak et al. Ultrasonics Sonochemistry. 2006, 13:195-199)。水环境中存在的苯酚能对水生生物造成重大危害, 5 to 25 mgL-1的低浓度苯酚至对鱼来说,都是致死的(P. R. Gogate, et al. Environ. Res. 8 (2004) 501 - 551. ) ;Kumar等报道,苯酚对人类具有致癌作用,所以,含苯酚的废水必须处理才能排放。同理化处理方法相比,生物法处理苯酚因其成本低,无二次污染而更具优势,苯酚生物降解是由细菌、真菌、放线菌等微生物活动的结果。目前的研究多集中于细菌,而真菌对苯酚的生物降解报道的较少,已发现能降解苯酚的真菌有镰孢霉属 Fusarium floccieferum (Anselmo et al. Water Sci Technol 1992,25161 - 168),烟曲霉Aspergillus fumigatus (Jones et al. Arch Microbiol 1995,163:176 - 181),粘束孢属 Graphium sp. (Santos et al. J Basic Microbiol. 2003,43:238 - 248),皮肤毛孢子菌 trichosporon cutaneumhave (Gaal A et al. Arch Microbiol. 1981, 130 54 - 58 and Godjevargova T et al. Process Biochem . 2003, 38:915 - 20),青霉属Penicillium sp. (Leitao. Int J Environ Res Public Health .2009, 6:1393 - 1417. Sumaya Ferreira Guedes et al. Biodegradation. 2011,22:409 - 419),多变拟青霉 Paecilomyces variotii (Wang et al. J Hazard Mater. 2010, 183:366 - 371),热带酵母 Candida tropicalis(Jiang Y et al. Biochem Eng J. 2005, 24:243 - 247),丝状真菌filamentous fungi (Santos V L & Linardi V R. Process Biochem. 2004,39:1001—1006),白腐菌 white rot fungi (Sanin S. et al. Bull Environ. Contam Toxicol. 2005, 75:466 - 473),这些真菌已被证实具有苯酚降解的潜力。真菌较细菌具有更强的环境耐受力,可以在更宽的温度、PH及更为苛刻的条件下生长繁殖,因而受到越来越多的关注。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对上述现有技术而筛选一株苯酚降解真菌,并提供该苯酚降解真菌在苯酚生物降解中的应用。本专利技术解决上述技术问题所采用的技术方案是一株苯酚降解真菌,其特征在于该真菌菌株为黄曲霉(Aspergillus真菌菌株PHDE-4,已于2011年8月31号保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No. 5189 ;其生物学特性真菌株PHDE-4在普通PDA培养基生长的菌落为凸起呈圆形、黄绿色,菌落大、质地紧密, 表面干而粗糙,边缘清晰,在以苯酚为唯一碳源的筛选培养基中生长的菌落为成片凸起,呈浅咖啡色,菌落较小、薄而疏松,表面干而粗糙,边缘清晰;菌株PHDE-4的显微结构如下分生孢子呈圆形,黄绿色,带有双层小梗的分生孢子头,分生孢子梗单生,直立,无横隔,淡褐色;菌株PHDE-4在PDA培养基和筛选培养基上的显微结构有差异,在筛选培养基上由于苯酚的抑制作用,孢子和孢子头明显变小,菌丝变细。按上述方案,所述的苯酚降解真菌,其rDNA的ITS全序列含608bp,具有SEQ ID NO :1所示的核苷酸序列。本专利技术的另外一个目的是提供苯酚降解真菌在有氧降解苯酚中的应用。按上述方案,在pH5. 0-8. 0条件下对苯酚进行有氧降解。按上述方案,在温度15_40°C条件下对苯酚进行有氧降解。本专利技术的优点是本专利技术的苯酚降解真菌株PHDE-4,具有较强的环境耐受力,可以在宽的温度、PH及较为苛刻的环境条件下,以苯酚为唯一碳源和能源生长繁殖,具有较好地清除环境中苯酚污染的能力。附图说明图1为本专利技术的PHDE-4菌株的ITS序列;图2为本专利技术的PHDE-4菌株的基因组DNA,其中泳道3: PHDE-4 ; 图3为本专利技术的PHDE-4菌株的r DNA的ITS扩增序列,其中泳道1、2: PHDE-4 ; 图4为本专利技术的PHDE-4菌株的系统发育树;图5本专利技术的PHDE-4菌株在PDA培养基和以苯酚为唯一碳源的培养基上的生长状况, 其中左以苯酚为唯一碳源的培养基;右PDA培养基;图6为本专利技术的PHDE-4菌株在PDA培养基中的1000X显微结构; 图7本专利技术的PHDE-4菌株在以苯酚为唯一碳源和能源的培养基中的1000X显微结构;图8本专利技术的PHDE-4菌株对不同起始浓度苯酚的生物降解; 图9为pH对本专利技术的PHDE-4菌株降解苯酚的影响; 图10为温度对本专利技术的PHDE-4菌株的降解苯酚的影响。具体实施例方式下面结合附图对本专利技术做进一步详细的说明。一株苯酚降解真菌,该真菌菌株为黄曲霉(Aspergillus fIavus)真菌菌株 PHDE-4,已于2011年8月31号保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No. 5189 ;其生物学特性真菌株PHDE-4在普通PDA培养基生长的菌落为凸起呈圆形、黄绿色,菌落大、质地紧密,表面干而粗糙,边缘清晰,在以苯酚为唯一碳源的筛选培养基中生长的菌落为成片凸起,呈浅咖啡色,菌落较小、薄而疏松,表面干而粗糙,边缘清晰(见图5所示);菌株PHDE-4的显微结构如下分生孢子呈圆形,黄绿色,带有双层小梗的分生孢子头,分生孢子梗单生,直立,无横隔,淡褐色(见图6所示);菌株PHDE-4在PDA培养基和筛选培养基上的显微结构有差异,在筛选培养基上由于苯酚的抑制作用,孢子和孢子头明显变小,菌丝变细(见图7所示)。所述的苯酚降解真菌,其rDNA的ITS全序列含608bp,具有SEQ ID NO :1所示的核苷酸序列。分别与从GenBank获取的20个相似序列后经DNAMAN软件进行比对分析)并构建系统发育树(见图4所示),结合PHDE-4形态学特征,初步鉴定为As/^rpVAAs fIavus0本专利技术的真菌株PHDE-4在有氧降解苯酚中的应用,真菌株PHDE-4在模拟废水中苯酚含量小于1200 mg/L时,10天后苯酚降解率均能本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:程波户业丽
申请(专利权)人:武汉工程大学
类型:发明
国别省市:

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