快速生物发光检测系统技术方案
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】快速生物发光检测系统本专利技术涉及快速生物发光检测系统领域，特别是用于检测报道激酶活性的快速且非常灵敏的生物发光检测系统。还提供用于检测报道激酶活性的生物发光测定、装置、和试剂盒。本领域中已经记述了激酶作为报道酶的应用。例如，本专利技术人已经描述了报道激酶在用于检测分析物在样品中的存在的诊断系统中的应用(参见WO00/46357)，以及在用于验证净化过程的效力的系统中的应用(参见WO2005/093085)。这些报道激酶的活性典型地使用产生光输出信号的ATP生物发光系统(例如，萤光素-萤光素酶)进行检测。所产生的光输出使用发光计测量，并且然后将这些测量与激酶活性的量相关。与报道激酶系统相关的潜在的问题是获得输出信号所需要的时间长度。迄今为止，获得输出信号所需要的典型的时间在30分钟到数小时的范围内。因此，在本领域中存在对更快速和/或简化的报道系统的需求。通过本专利技术解决一个或多个上述问题，在第一方面中，本专利技术提供用于检测报道激酶活性的测定法，其包括：(i)将所述报道激酶添加到测定混合物中，其中所述报道激酶与ADP接触，并且在与ADP接触后不超过5分钟，所述报道...
【技术保护点】
１．用于检测报道激酶活性的测定法，其包括：（ｉ）将所述报道激酶添加到测定混合物中，其中所述报道激酶与ＡＤＰ接触，并且在与ＡＤＰ接触后不超过５分钟，所述报道激酶与生物发光试剂接触，其中，在所述报道激酶与ＡＤＰ接触之前，所述测定混合物基本上不含非报道激酶（即，除报道激酶之外的激酶）；和（ｉｉ）检测来自所述测定混合物的光输出。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】GB0900151.22009年1月7日1.用于检测外源激酶活性的测定法，其包括：(i)将所述外源激酶添加到测定混合物中，其中所述外源激酶同时与ADP接触和生物发光试剂接触，其中，在所述外源激酶与ADP接触之前，所述测定混合物基本上不含除外源激酶之外的激酶；和(ii)检测来自所述测定混合物的光输出，其中所述生物发光试剂包括荧光素和荧光素酶，其中所述外源激酶选自腺苷酸激酶或丙酮酸激酶。2.按照权利要求1所述的测定法，其中，在所述外源激酶与ADP接触之前，所述测定混合物基本上不含ATP。3.按照任一前述权利要求所述的测定法，其中，在所述外源激酶与ADP接触之前，除外源激酶之外的激酶基本上被去除或灭活。4.按照权利要求1-2任一项所述的测定法，其中，在所述外源激酶与ADP接触之前，ATP基本上被去除。5.按照权利要求1-2任一项所述的测定法，其中所述外源激酶是腺苷酸激酶。6.按照权利要求1-2任一项所述的测定法，其中所述外源激酶是三聚体或单体腺苷酸激酶。7.按照权利要求1-2任一项所述的测定法，其中所述外源激酶是热稳定激酶。8.ADP和生物发光试剂的混合物和外源激酶在制备用于确定样品中分析物的存在的试剂盒中的用途，其中：(i)将所述样品暴露于所述外源激酶，所述外源激酶偶联到对所述分析物特异性的结合剂，从而当在样品中存在所述分析物时，在所述外源激酶和所述分析物之间形成复合物；(ii)将复合的外源激酶与未复合的外源激酶分离；和(iii)使用按照权利要求1-7任一项所述的测定法，测量所述复合的外源激酶的活性。9.ADP和生物发光试剂的混合物和外源激酶在制备用于确定样品中分析物的存在的试剂盒中的用途，其中：(i)提供包含所述外源激酶的固体支持物，其中所述外源激酶通过接头附着到所述固体支持物上，所述接头包括对所述分析物特异性的结合剂；(ii)将所述样品施加到所述固体支持物上，由此当在所述样品中存在所述分析物时，所述分析物将外源激酶从所述固体支持物上置换下来；和(iii)使用按照权利要求1-7任一项所述的测定法，测量所述被置换下来的外源激酶的活性。10.ADP和生物发光试剂的混合物和外源激酶在制备用于检测样品中分析物的存在的试剂盒中的用途，其中：(i)提供固体支持物，其上附着对所述分析物特异性的第一结合剂；(ii)将所述固体支持物暴露于所述样品，从而当在所述样品中存在所述分析物时，所述分析物通过所述第一结合剂附着到所述固体支持物上；(iii)将所述固体支持物暴露于所述外源激酶，所述外源激酶偶联到对所述分析物特异性的第二结合剂，从而所述外源激酶通过所述第二结合剂和已经结合的分析物之间的相互作用附着到所述固体支持物上；(iv)将在步骤(iii)中获得的混合物施加到滤膜上，其中所述固体支持物保留在所...
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