本发明专利技术涉及一种利用大豆糖蜜发酵生产果聚糖的方法，实施步骤如下：（1）孢子菌悬液的制备：将地衣芽孢杆菌TJZKBA10658接种到培养基斜面上，于30℃恒温培养2-4天，加入质量浓度为0.75%的生理盐水洗涤菌丝体，获得孢子菌悬液；（2）将上述孢子菌悬液用于接种至灭菌后的液体种子培养基中，得到液体种子；（3）上述一级液体种子用于接种至灭菌后的5L种子罐中，然后按照体积比5-12%的接种量将液体培养基接入上述冷却的发酵罐培养基中，作为二级液体种子；（4）将上述二级液体种子用于接种至灭菌后的发酵罐中，发酵时间14-30小时；（5）发酵结束后，将发酵液6000转/分钟离心15分钟除菌体，取上清液过超滤膜，截留液浓缩喷粉，得到果聚糖产量为42-138kg。其工艺简单，效果显著。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种发酵生产果聚糖的方法，特别涉及一种。
技术介绍
大豆糖蜜是生产大豆浓缩蛋白过程中得到的副产品，大豆糖蜜中含有丰富的大豆低聚糖，可作为功能性大豆低聚糖的生产原料。其中主要成分含量为总糖54. 64%(其中蔗糖32. 17 %，棉籽糖4. 27%，水苏糖17. 54%)，总类脂18. 00%,总甾甙3. 06%,总磷脂8. 79%，粗蛋白8. 71%，灰分8. 69%ο果聚糖(Ievan)是一种具有广泛用途的胞外多糖，是由果糖残基包在球状结构里组成，以β _2，6糖苷键相连的D-果糖构成的多糖，分子式为(C18H32O16)ntl许多微生物在自然环境中都能产生胞外多聚物(EPS)，果聚糖(Ievan)只不过是被发现的其中一种，这些胞外多聚物多数存在于湍急的小溪中。它们可以保护微生物避免干燥和毒性的侵蚀损害，并且可以储存碳源。果聚糖(Ievan)也可以从商品生产中的细胞碎片中被分离出来。在医药上，果聚糖(Ievan)可用作皮下注射用胆固醇，抗肿瘤、免疫调节剂、抗炎类药物和血浆的替代品。在食品上被用作双呋喃果糖、果糖、低聚果糖，还可用作乳化剂、包封剂、色素和香味剂及脂肪的替代品。Ievan早在100多年前就被发现了，由于它的性质区别于其他多糖，所以引起了人们极大的兴趣。一开始只是用在医学上并且用量很少，因为成本很高，人们致力于大规模生产果聚糖(Ievan)，实现最大经济利益。因此，提供一种工艺简单、效果显著的利用大豆糖蜜发酵生产果聚糖(Ievan)的方法，可以有效的降低成本、提高产率。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服已有技术的不足之处，提供一种高效可行并可降低果聚糖 (Ievan)生产成本，减小投资，易于生产应用的。为实现上述目的本专利技术所采用的实施方式如下一种，其特征在于实施步骤如下(1)孢子菌悬液的制备将地衣芽孢杆菌TJZKBA10658接种到培养基斜面上，于30°C恒温培养2-4天，加入质量浓度为0. 75%的生理盐水洗涤菌丝体，获得孢子菌悬液，悬液中孢子含量约为IO5-IO6个，待用；斜面培养基组成包括，单位IL 葡萄糖2g、酵母粉5g、蛋白胨 10g、琼脂15g，用蒸馏水定容至1L，pH值7. 0 ；其中所用菌种地衣芽孢杆菌TJZKBA10658 ；(2)将上述孢子菌悬液用于接种至灭菌后的液体种子培养基中，液体种子培养基组成包括，单位IL 蔗糖20-60g、酵母粉4-8g、蛋白胨5-10g，用蒸馏水定容至1L，pH值7. 0 ；将液体种子培养基于121°C、15分钟灭菌再冷却；然后按照体积百分比5-12%的接种量将孢子菌悬液接入上述冷却的液体种子培养基中，500ml规格的摇瓶装液量是100ml，摇瓶于30-40°C、转速为120-200rpm的摇床上培养24小时，得到液体种子；(3)上述一级液体种子用于接种至灭菌后的5L种子罐中，培养基与上述液体种子培养基相同，装液量3L ；将发酵罐培养基于121°C、15min灭菌再冷却；然后按照体积比5-12% 的接种量将液体培养基接入上述冷却的发酵罐培养基中，发酵温度30-40°C，溶氧控制在 30-40%，培养时间24h，作为二级液体种子；(4)将上述二级液体种子用于接种至灭菌后的500L发酵罐中，将大豆糖蜜稀释1-3 倍；用蒸馏水定容至300L，pH值5. 0-8. 0，将发酵罐培养基于115°C、15分钟灭菌再冷却； 然后按照体积比5-12%的接种量将液体种子接入上述冷却的发酵罐培养基中，发酵温度 30-40°C，溶氧控制在30-40%，发酵时间14-30小时；(5)发酵结束后，将发酵液6000转/分钟离心15分钟除菌体，取上清液过分子量 6000-8000道尔顿超滤膜，截留液浓缩喷粉，得到果聚糖(Ievan)的产量为42_138kg。本专利技术的有益效果是本专利技术利用大豆糖蜜发酵生产果聚糖(levan)，可以大大减少发酵成本，常见的使用蔗糖为原料发酵的成本较高，但是利用大豆糖蜜发酵，既解决大大豆糖蜜存放难、排放有污染的问题，又大大降低了发酵成本，大豆糖蜜中不被利用的杂志可通过超滤膜全部除去，可有效的提高生产利润。并且不需要复杂的设备，处理方法简单， 发酵过程简单易行，利于果聚糖(Ievan)的开发应用的推广。该方法具有很高的实际应用价值，市场优势非常明显，且适于工业化生产。具体实施例方式以下结合实施例，对依据本专利技术提供的具体实施方式详述如下 实施例1(1)孢子菌悬液的制备将地衣芽孢杆菌TJZKBA10658接种到培养基斜面上，于30°C 恒温培养2-4天，加入质量浓度为0. 75%的生理盐水洗涤菌丝体，获得孢子菌悬液，悬液中孢子含量约为IO5-IO6个，待用；斜面培养基组成包括，单位1L:葡萄糖2g，酵母粉5g，蛋白胨10g，琼脂15g，用蒸馏水定容至1L，pH值7. 0 ；其中所用菌种地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis) TJZKBA10658 ；(2)上述孢子菌悬液用于接种至灭菌后的液体种子培养基中，液体种子培养基组成包括，单位IL 蔗糖60g，酵母粉5g，蛋白胨10g，用蒸馏水定容至1L，pH值7. 0 ；将液体种子培养基于121°C、15分钟灭菌再冷却；然后按照体积百分比10%的接种量将孢子菌悬液接入上述冷却的液体种子培养基中，500ml规格的摇瓶装液量是100ml，摇瓶于35°C、转速为 160rpm的摇床上培养24小时，得到液体种子；(3)上述一级液体种子用于接种至灭菌后的5L种子罐中，培养基与上述液体种子培养基相同，装液量3L ；将发酵罐培养基于121°C、15min灭菌再冷却；然后按照体积比10%的接种量将液体培养基接入上述冷却的发酵罐培养基中，发酵温度35°C，溶氧控制在30%，培养时间24h，作为二级液体种子；(4)上述二级液体种子用于接种至灭菌后的500L发酵罐中，将100L大豆糖蜜稀释3倍至300L，pH值调为7.0，将发酵罐培养基于115°C、15分钟灭菌再冷却；然后按照体积比10% 的接种量将液体培养基接入上述冷却的发酵罐培养基中，发酵温度35°C，溶氧控制在30%， 发酵时间14小时；(5)发酵结束后，将发酵液6000转/分钟离心15分钟除菌体，取上清液过分子量8000 道尔顿超滤膜，截留液浓缩喷粉，得到果聚糖(Ievan) 42. 1kg。实施例2(1)孢子菌悬液的制备将地衣芽孢杆菌TJZKBA10658接种到培养基斜面上，于30°C 恒温培养2-4天，加入质量浓度为0. 75%的生理盐水洗涤菌丝体，获得孢子菌悬液，悬液中孢子含量约为IO5-IO6个，待用；斜面培养基组成包括，单位1L:葡萄糖2g，酵母粉5g，蛋白胨10g，琼脂15g，用蒸馏水定容至1L，pH值7.0 ；其中所用菌种地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis) TJZKBA10658 ；(2)上述孢子菌悬液用于接种至灭菌后的液体种子培养基中，液体种子培养基组成包括，单位IL 蔗糖40g，酵母粉4g，蛋白胨6g，用蒸馏水定容至1L，pH值7. 0 ；将液体种子培养基于121°C、15分钟灭菌再冷却；然后按照体积百分比5%的接种量将孢子菌悬液接入上述冷却的液体种子培养基中，500ml规格的摇瓶装液本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．一种利用大豆糖蜜发酵生产果聚糖的方法，其特征在于实施步骤如下：（１）孢子菌悬液的制备：将地衣芽孢杆菌ＴＪＺＫＢＡ１０６５８接种到培养基斜面上，于３０℃恒温培养２－４天，加入质量浓度为０．７５％的生理盐水洗涤菌丝体，获得孢子菌悬液，悬液中孢子含量约为１０５－１０６个，待用；斜面培养基组成包括，单位１Ｌ：葡萄糖２ｇ、酵母粉５ｇ、蛋白胨１０ｇ、琼脂１５ｇ，用蒸馏水定容至１Ｌ，ｐＨ值７．０；其中所用菌种：地衣芽孢杆菌ＴＪＺＫＢＡ１０６５８；（２）将上述孢子菌悬液用于接种至灭菌后的液体种子培养基中，液体种子培养基组成包括，单位１Ｌ：蔗糖２０－６０ｇ、酵母粉４－８ｇ、蛋白胨５－１０ｇ，用蒸馏水定容至１Ｌ，ｐＨ值７．０；将液体种子培养基于１２１℃、１５分钟灭菌再冷却；然后按照体积百分比５－１２％的接种量将孢子菌悬液接入上述冷却的液体种子培养基中，５００ｍｌ规格的摇瓶装液量是１００ｍｌ，摇瓶于３０－４０℃、转速为１２０－２００ｒｐｍ的摇床上培养２４小时，得到液体种子；（３）上述一级液体种子用于接种至灭菌后的５Ｌ种子罐中，培养基与上述液体种子培养基相同，装液量３Ｌ；将发酵罐培养基于１２１℃、１５ｍｉｎ灭菌再冷却；然后按照体积比５－１２％的接种量将液体培养基接入上述冷却的发酵罐培养基中，发酵温度３０－４０℃，溶氧控制在３０－４０％，培养时间２４ｈ，作为二级液体种子；（４）将上述二级液体种子用于接种至灭菌后的５００Ｌ发酵罐中，将大豆糖蜜稀释１－３倍；用蒸馏水定容至３００Ｌ，ｐＨ值５．０－８．０，将发酵罐培养基于１１５℃、１５分钟灭菌再冷却；然后按照体积比５－１２％的接种量将液体种子接入上述冷却的发酵罐培养基中，发酵温度３０－４０℃，溶氧控制在３０－４０％，发酵时间１４－３０小时；（５）发酵结束后，将发酵液６０００转／分钟离心１５分钟除菌体，取上清液过分子量６０００－８０００道尔顿超滤膜，截留液浓缩喷粉，得到果聚糖ｌｅｖａｎ的产量为４２－１３８ｋｇ。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：徐勇虎，李睿颖，国华，王永乐，刘云，胡娅君，王晓琼，范婷，韩慧，墨玉欣，刘晓鸥，孙溪，
申请(专利权)人：天津实发中科百奥工业生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：12
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