本发明专利技术提供了一种越橘发酵法制备的紫红参及其在医药中的用途，采用越橘发酵液发酵制备的紫红参，不仅含有人参稀有皂苷组分还含有花色苷类物，可用于制备治疗胃癌、肺癌、肝癌药物和治疗因抗生素类药物造成的心肌损伤及其提高机体耐缺氧能力。本发明专利技术发酵工艺操作方便简单，发酵过程中加入了保加利亚菌，大大缩短了发酵液制备的时间，提高发酵效率，稀有皂苷Rg5含量较高，适用于大批量的工业生产。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种紫红参制作工艺的改进，具体的说是提供了一种越橘发酵法制备的紫红参，同时还公开了紫红参在抗肿瘤、心肌保护和因缺氧而引起的疾病等方面的医用用途，属于中医药学
技术介绍
紫红参也称黑参是人参更深层次加工产品，其稀有皂苷成分人参皂苷他2，人参皂苷Rg3含量较红参更高，且紫红参中含有丰富人参皂苷Wd，人参皂苷Rg5，这些成分在红参和白参中几乎不存在，药理学研究发现，人参皂苷Rg5比人参皂苷Rg3抗肿瘤活性更强。目前出现在韩国专利上的黑参加工方法主要是九蒸九曝法。由于九蒸九曝法在反复高温蒸炙下可能生成致癌物质苯并芘类化合物，且时间较长，工艺繁琐。Yoon-Jung Hwan等人使用日本杏发酵液进行制备黑参，此法很少产生致癌物质苯并芘类化合物，但是发酵制备时间较长(1-6个月)，且该专利中没有说明稀有人参皂苷Rg5的含量增加。越橘果是杜鹃花科(五rica⑶從)越橘属(Vaccinium. spp)植物越橘的成熟果实， 东北地区产量可占全国的90%，年产量在十万吨至百万吨左右。越橘果实中含有丰富的花色苷类物质，这类物质具有显著的抗癌、抗氧化、抗衰老等多种功效。目前对采用发酵法制备紫红参的加工工艺及其医疗活性研究较少，因此本专利技术公开了一种采用越橘发酵液制备紫红参的加工工艺及其提取物在抗肿瘤、心肌保护和耐缺氧上的应用。
技术实现思路
本专利技术公开了一种越橘发酵法制备的紫红参，不仅含有大量人参稀有皂苷组分还含有少量的花色苷类物质。本专利技术还公开了上述紫红参的制备工艺，发酵制备时间大大缩短，并含有较高的人参稀有皂苷Rg5。本专利技术进一步公开了紫红参的医用用途。本专利技术公开的越橘发酵法制备的紫红参，是通过以下方法制备的1)越橘发酵液将越橘清洗、捣碎、灭菌处理后，按体积比将越橘白砂糖保加利亚菌=(1 10) :1 (0. 2^0. 5)混合，其中，保加利亚菌菌液浓度为6X IO8个/ml，发酵罐中搅拌密封发酵，温度为20°C 30°C，发酵时间为5-6天，发酵原液制备好后加广10倍体积的水，调配成越橘发酵液；2)发酵熟化将清洗干净的人参放入步骤1)的发酵液中，投放比例为发酵液/人参=(Γ10)L / kg, 发酵罐中30°C 70°C的条件下发酵时间为M 108h ；3)蒸熟熟化发酵熟化后，通入热风温度105°C，每次15min，搅拌，保持湿度30飞0%，熟化时间为 24 湖h ；4)低温熟化保持温度在2(T50°C，进行低温熟化M 108h ；即得干燥的发酵紫红参。本专利技术所述的紫红参在制备治疗胃癌、肺癌、肝癌药物中的应用。本专利技术所述的紫红参在制备治疗因阿霉素类药物造成的心肌损伤药物中的应用。本专利技术所述的紫红参在制备治疗因缺氧而引起的疾病药物中的应用。本专利技术与现有紫红参制备工艺相比其积极效果在于采用越橘发酵液发酵制备的紫红参，不仅含有人参稀有皂苷组分还含有花色苷类物， 可用于制备治疗胃癌、肺癌、肝癌药物和治疗因抗生素类药物造成的心肌损伤及其提高机体耐缺氧能力。本专利技术发酵工艺操作方便简单，发酵过程中加入了保加利亚菌，大大缩短了发酵液制备的时间，提高发酵效率，稀有皂苷Rg5含量较高，适用于大批量的工业生产。为了进一步说明本专利技术工艺所制备的紫红参中含有大量稀有人参皂苷及花色苷， 以下采用高效液相法对紫红参进行质量评定实验例1本专利技术工艺制备紫红参中人参皂苷的分析 1.1实验材料和方法 1.1.1实验材料紫红参本专利技术工艺制作；色谱甲醇和色谱乙腈美国Tedia ；其他常规化学试剂(分析纯)北京化工厂。1.1. 2实验方法1. 1. 2. 1 HPLC-MS 分析条件仪器设备Agilent 1100 series, LC/MS，G1946D ；干燥气流速度12L/min ；雾化气压力:50psi ；锥孔电压=IV ；毛细管电压:3KV ；流速1. Oml/min，分流:08+0. 2 (分)千分之五；色谱柱色谱柱大连江申C18 column (150 mm X 6.0 mm, 5 μ m)；柱温30°C ；流动相乙腈和甲酸铵水溶液梯度洗脱，洗脱条件见为 0-15min 20%_40% 乙腈；15_55min 40%_80% 乙腈；55_65min 80%_100% 乙腈。1. 1.2. 2测试样品的制备将本专利技术紫红参粉碎，过200-300目筛，精确称取1. OOOg放入索氏提取器中加入50ml 分析甲醇，80°C水浴加热提取10h。完成以后将甲醇真空浓缩，用色谱甲醇定容于25ml的容量瓶中，取样0.22 um过滤待HPLC-MS测定。1. 2 HPLC-MS 分析结果紫红参提取物中35. 53 Imin化合物，-为766，推测M为767，结合文献考证推测此化合物为人参皂苷Rg5 (质谱图见附图4)。紫红参提取物中34. 65 Imin化合物，_为766，推测M为767，结合文献考证推测此化合物为人参皂苷Md。紫红参提取物中26. 945min化合物，_为784，推测M为785，结合文献考证推测此化合物为人参皂苷Rg3。紫红参提取物中25. 384min化合物，_为619，推测M为620，结合文献考证推测此化合物为人参皂苷他4。紫红参提取物中24. 388min化合物，_为619，推测M为620，结合文献考证推测此化合物为人参皂苷I k3。紫红参提取物中23. 657min化合物，_为765，推测M为766，结合文献考证推测此化合物为人参皂苷Rg4或F4。从紫红参的提取液中我们可以看出，人参皂苷Rgl、Re、Rf、Rb 1、Rb2、Rb3、Rc、Rd等几乎不能检测出来，大量稀有皂苷如1^1、Rg4、Rg5、Rh4, I k3等出现，其中以人参皂苷Rg5含量最从紫红参HPLC (见附附图说明图1)、HPLC-MS Neg (见附图2 )和HPLC-DAD谱图中(见附图 3)我们可以看到常规皂苷基本消失，大量稀有皂苷如人参皂苷Rg3、Rg5、Rh4, RkU F4, Rk3 等出现，其中含量最高的是人参皂苷Rg5，其次是人参皂苷Rg3、Rk3,他4，因此将人参加工成紫红参可以获得高活性人参加工产品。从发酵紫红参HPLC-MS TIC图谱我们可以看出人参皂苷20位糖基优先脱除，3位或6位所连接的糖基很难脱除，这就导致Rg3等生成，而很少有他2、1 1的生成，其次是20位叔羟基的脱水反应，从而得到URk3,Rh4、Rg5的生成， 最后是3位末端糖的乙酰化，如Rs4、Rs5、Rs6的生成。本实验例采用乙醇、氯仿、乙酸乙酯三种试剂结合索氏提取，所得结果经分析与甲醇相似。实验例2本专利技术工艺制备紫红参中稀有皂苷含量的检测 2. 1实验材料和方法 2. 1. 1实验材料本专利技术工艺制备紫红参； 高丽红参皇封参业有限公司提供； 色谱乙腈美国Tedia; 纯水杭州哇哈哈有限公司； 色谱甲醇美国iTedia15Rgl、Re、Rg2、Rbl、Rb2、RcU S_Rg3、R-Rg3、S_Rh2、R-Rh2、Rg5、S-PPt、S-PPd, C_K、 Rhl标准品均有是实验室自制(HPLC检测含量> 98%)。2. 1. 2实验方法2. 1. 2. 1标准品溶液的配制将 Rg 1、Re、Rg2、Rb 1、Rb2、Rd、S_Rg3、R-Rg本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．一种越橘发酵法制备紫红参的制备工艺，包括以下步骤：１）越橘发酵液将越橘清洗、捣碎、灭菌处理后，按体积比将越橘：白砂糖：保加利亚菌＝（１ ～１０）：１：（０．２～０．５）混合，其中，保加利亚菌液浓度为６×１０８个／ｍｌ，发酵罐中搅拌密封发酵，温度为２０℃～３０℃，发酵时间为５－６天，发酵原液制备好后加１～１０倍体积的水，调配成越橘发酵液；２）发酵熟化将清洗干净的人参放入步骤１）的发酵液中，投放比例为发酵液／人参＝ （１～１０）Ｌ ／ ｋｇ，发酵罐中３０℃～７０℃的条件下发酵时间为２４～１０８ｈ；３）蒸熟熟化发酵熟化后，通入热风温度１０５℃，每次１５ｍｉｎ，搅拌，保持湿度３０～６０％，熟化时间为２４～１０８ｈ；４）低温熟化保持温度在２０～５０℃，进行低温熟化２４～１０８ｈ；即得干燥的发酵紫红参。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：郑毅男，李永娟，孙晓波，刘伟杰，
申请(专利权)人：吉林省白山市皇封参业有限公司，
类型：发明
国别省市：22
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