一种分离腔前卵泡的方法及其专用刀技术

本发明专利技术公开了一种分离腔前卵泡的方法及其专用刀。本发明专利技术提供的用于分离腔前卵泡的刀，包括至少两个叠放的刀片，所述刀片之间设有间隙。所述刀片为双刃刀片。在所述双刃刀片的中部沿纵向设有间隔拿持部件；所述间隔拿持部件是用胶带缠绕形成的。本发明专利技术的用于分离腔前卵泡的刀可以广泛应用在体外离体分离腔前卵泡中，具有以下优点：简捷、高效、成本低、便于推广，通过本发明专利技术的刀，可以使分离出的腔前卵泡数量增多，且分离效果好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及畜牧学(动物繁殖)，尤其涉及一种分离腔前卵泡的方法及其专用刀。
技术介绍
牛卵巢上有数万个原始卵泡，在其生长成熟过程中，有相当数量的卵泡退化、闭锁，仅有极少数的卵泡发育到成熟阶段，直至排卵。在雌性生殖资源中，卵母细胞是体外受精、胚胎移植、性别控制、胚胎分割、动物克隆和转基因等胚胎生物技术研究和开发必不可少的材料，卵母细胞来源匮乏成为制约这些技术研究进展的主要因素，因此卵巢腔前卵泡的开发无疑是解决这一难题的有效途径。近年来，许多学者致力于腔前卵泡分离方法的研究，Figueiredo等用酶结合机械法分离牛腔前卵泡取得了比较好的效果，但用酶处理所需时间较长，且易对腔前卵泡造成一定的损害；而机械法由于需要专门的仪器，且造价昂贵，不能很好的推广开来。因此，建立一套简捷有效的牛腔前卵泡分离方法显的十分必要。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供一种用于分离哺乳动物腔前卵泡的刀。本专利技术提供的用于分离哺乳动物腔前卵泡的刀，包括至少两个叠放的刀片，所述刀片之间设有间隙。为了使用简单，所述刀片可为双刃刀片。为了产生间隙，在所述双刃刀片的中部沿纵向可设有间隔拿持部件；为了便于拿持，各所述双刃刀片的间隔拿持部件是一体的。为了操作简单、降低成本，所述间隔拿持部件可用胶带缠绕形成的。为了使用方便，且分离效果好，上述间隙的宽度相同或不同。为了提高分离的效果，上述间隙的宽度相同，所述间隙的宽度为0.056-0. 065cm; 实际使用时，所述间隙的宽度具体为0. 058cm。上述刀片具体可为6个。本专利技术的另一个目的是提供一种分离离体哺乳动物腔前卵泡的方法。本专利技术提供的方法，包括如下步骤用上述的刀从离体哺乳动物卵巢的皮质部划取，得到划取物，即得到腔前卵泡。所述划取的方式为依次沿横向和纵向两个方向划取；在所述划取前，还包括将所述离体哺乳动物卵巢进行去除系膜、黄体和髓质的步骤；在所述划取后，还包括如下步骤将所述划取物依次进行一次过滤、二次过滤，得到的滤液离心、取沉淀，得到腔前卵泡。所述第一次过滤采用大小为(180-220) μ m网筛，所述第一次过滤采用大小具体为200 μ m网筛；所述第二次过滤采用大小为80-120 μ m网筛，所述第二次过滤采用大小具体为 100 μ m网筛；所述离心的转速为1450-1550r/min，所述离心的转速具体为1500r/min ；所述离心的时间为4. 5-5. 5min，所述离心的时间具体为5min，所述离心的旋转半径为6. 02cm ；在每次所述过滤前还包括进行吹打分散用于过滤的混合物的步骤。所述哺乳动物为牛。本专利技术的用于分离腔前卵泡的刀可以广泛应用在体外离体分离腔前卵泡中，具有以下优点简捷、高效、成本低、便于推广。本专利技术的实验证明，通过本专利技术的刀，采用本专利技术提供的分离方法，可以使分离出的腔前卵泡数量增多，且分离效果好。附图说明图1为分离腔前卵泡的刀的结构示意图具体实施例方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。实施例1、牛腔前卵泡分离刀的制备如图1所示，本专利技术的牛腔前卵泡分离刀1，它包括6片由间隙隔开叠放的刀片2， 所述刀片之间设有间隙4。所述刀片为双刃刀片(双刃刮胡刀片)。在所述双刃刀片的中部沿纵向设有间隔拿持部件3 ；所述间隔拿持部件是用胶带缠绕形成的；各所述双刃刀片的间隔拿持部件是一体的。所述间隙的宽度相同。所述间隙的宽度为0.058cm。本专利技术的牛腔前卵泡分离刀的制备方法如下取6片剃须刀片，用透明胶条逐一缠绕刀片的中间部位，使刀片之间产生一定的缝隙(缝隙的宽度为0. 058cm)，再将用透明胶条缠绕所有刀片的中间部位用于拿持，制成如图1所示。本专利技术用于腔前卵泡分离的刀的使用方法如下1、腔前卵泡的获取将屠宰场获取的离体的牛卵巢置于60mm直径的玻璃平皿中，去除多余系膜和黄体，随后将卵巢沿着卵巢门一切为二，去除髓质，在培养基中清洗2次后，用由腔前卵泡分离的刀1按照横向和纵向两个方向从卵巢皮质部划取卵泡，将获取的卵泡和培养基用滴管吹打，然后用直径Imm的吸管吹打80 100次，经200 μ m网筛过滤，再用直径0. 5mm吸管吹打80-100次，用100 μ m网筛过滤，以1500r/min (离心半径6. 02cm)离心5min，除去上清液，沉淀即为卵泡，其沉淀加入分离液稀释悬浮，体视显微镜下镜检卵泡、计数并测量直径；2、卵泡数量统计将上述获取的卵泡进行数量统计，确定卵泡获取的效率，实验重复三次，结果取平均值。结果每个卵巢130枚。权利要求1.一种用于分离哺乳动物腔前卵泡的刀，包括至少两个叠放的刀片，所述刀片之间设有间隙。2.根据权利要求1所述的刀，其特征在于所述刀片为双刃刀片。3.根据权利要求1或2所述的刀，其特征在于在所述双刃刀片的中部沿纵向设有间隔拿持部件；各所述双刃刀片的间隔拿持部件是一体的。4.根据权利要求1-3中所述的刀，其特征在于所述间隔拿持部件是用胶带缠绕形成的。5.根据权利要求1-4中任一所述的刀，其特征在于所述间隙的宽度相同或不同。6.根据权利要求1-5中任一所述的刀，其特征在于所述间隙的宽度相同；所述间隙的宽度为0. 056-0. 065cm ；所述间隙的宽度具体为0. 058cm。7.根据权利要求1-6中任一所述的刀，其特征在于所述刀片为6个。8.一种分离离体哺乳动物腔前卵泡的方法，包括如下步骤用权利要求1-7中任一所述的刀从离体哺乳动物卵巢的皮质部划取，得到划取物，即得到腔前卵泡。9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于所述划取的方式为依次沿横向和纵向两个方向划取；在所述划取前，还包括将所述离体哺乳动物卵巢进行去除系膜、黄体和髓质的步骤；在所述划取后，还包括如下步骤将所述划取物依次进行一次过滤、二次过滤，得到的滤液离心、取沉淀，得到腔前卵泡。10.根据权利要求8或9所述的方法，其特征在于所述第一次过滤采用大小为(180-220) μ m网筛，所述第一次过滤采用大小具体为 200 μ m网筛；所述第二次过滤采用大小为80-120 μ m网筛，所述第二次过滤采用大小具体为100 μ m 网筛；所述离心的转速为1450-1550r/min，所述离心的转速具体为1500r/min ；所述离心的时间为4. 5-5. 5min，所述离心的时间具体为5min，所述离心的旋转半径为6. 02cm ；在每次所述过滤前还包括进行吹打分散用于过滤的混合物的步骤。全文摘要本专利技术公开了一种分离腔前卵泡的方法及其专用刀。本专利技术提供的用于分离腔前卵泡的刀，包括至少两个叠放的刀片，所述刀片之间设有间隙。所述刀片为双刃刀片。在所述双刃刀片的中部沿纵向设有间隔拿持部件；所述间隔拿持部件是用胶带缠绕形成的。本专利技术的用于分离腔前卵泡的刀可以广泛应用在体外离体分离腔前卵泡中，具有以下优点简捷、高效、成本低、便于推广，通过本专利技术的刀，可以使分离出的腔前卵泡数量增多，且分离效果好。文档编号A61D19/00GK102283718SQ20111019421公开日2011年12月21日 申请日期2011年7月12日 优先权日2011年7月12日专利技术者孙婧, 李冬冬, 李向东 申请人:中国农业大学本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种用于分离哺乳动物腔前卵泡的刀，包括至少两个叠放的刀片，所述刀片之间设有间隙。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李向东，李冬冬，孙婧，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：11