一种烧伤动物模型的制作方法技术

本发明专利技术涉及一种用混合燃料制造烧伤动物模型方法，其特征在于混合燃料由20％～60％石油炼油残料，40％～80％汽油组成，配制方法是将石油炼油残料溶于汽油中，混匀，-20℃冷冻，取出，搅拌，反复冷冻搅拌3～7次至均匀胶状；将混合燃料均匀涂于大鼠、小鼠、豚鼠、家兔、猪和狗等动物脱毛预烧皮肤表面，点火，持续燃烧15～30秒；伤后立即补液复苏，分笼饲养，自由饮食；采用创面组织病理切片光镜下观测并确定烧伤分级；本模型具有操作简便，重现性好，成功率高，烧伤程度易于控制等优点，可用于人类烧伤的病理机制、治疗药物的筛选和评价等研究。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种利用石油炼油残料制作烧伤动物模型的方法，用于人类烧伤的病理机制、药物的筛选和治疗作用的研究。本专利技术属于医学及生命科学试验研究领域。
技术介绍
烧伤是物理、化学、放射线、激光等诸多因素作用于机体而造成的一种极其复杂的外伤性疾病，尽管人类努力预防烧伤的发生，但急诊室每年接收的烧伤病人数量仍然很大。 据统计，美国每年的烧伤病例可达50万之多。由于临床积累经验的局限性和烧伤发生发展的复杂性使烧伤的病理机理、治疗药物的研究仍然是医药学研究的重点方向之一。受道义上和方法学上的种种限制，许多实验不能也不应该以病人作为试验对象，导致深入探讨疾病的发病机理及药物等治疗效果观察等极大困难。动物模型可克服上述不足，在生物医学研究中发挥着独特的作用。故建立烧伤动物模型是现代烧伤研究领域基础与应用研究中的一个极为重要的实验方法和手段。一个理想的烧伤模型将有助于更科学、更准确地认识烧伤后机体各系统及局部创面的发展演变规律，探索针对性的防治措施。55°C以上的温度作用于动物表面组织一定时间后，即可引起实验性烧伤。因此，有关烧伤动物模型的制作方式种类较多，主要是火焰烧伤、电光源法、热烫伤等。实验性热烫伤分点状温热烫伤法、直接热水烫伤法和热蒸汽烫伤法三类。点状温热烫伤法由kvitt于 1949年创建。模型动物不麻醉，背部固定于烫板下，用点状烫伤器底端借助烫伤器自重，紧贴于实验动物拟烫伤区实施烫伤。该法具有烫伤面积和深度较易控制，重复性高，大小动物均适用等优点，被认为是标准的烫伤模型制作方法；直接热水烫伤法将实验动物拟烫伤区直接置于恒温热水中致伤，致伤深度易于控制，重复性好，但烫伤面积较难控制；热蒸汽烫伤法多用于建立动物吸入性损伤模型。总体而言，烫伤的温度容易控制，作用均勻，面积较易掌握，一般比其它烧伤模型稳定、准确、重复性好。现实生活中或军事战争中由燃料等化学物质导致的火焰烧伤较热烫伤更为常见，对这些原因引起的烧伤进行相关研究实属必要。火焰烧伤主要包括凝固汽油复制烧伤模型和混合燃料复制烧伤模型。但目前常用的烧伤模型燃料均难以购买，且大多没有确切用量及烧伤时间，烧伤程度不易控制。因此稳定、 准确、重复性好的火焰烧伤动物模型的建立十分重要。实验性烧伤的损害程度取决于致伤温度的高低、致伤时间的长短、烧伤组织的伤前情况以及实验动物的机体反应性。为保持致伤条件恒定一致，复制出损害程度一致的模型，以便于进行重复和对比，应针对致伤时间、致伤温度和致伤后各种可能的影响因素，采取相应的措施，最大限度地减少各种因素的影响。使用本法制造模型时可用软刷均勻涂布混合燃料于动物皮肤表面，严格控制烧伤时间，达到一次同时灭火，即可复制出所需的烧伤面积与深度，模拟人类烧伤的症状和体征，并避免烧伤创面深度不一致，能满足进一步实验的要求。本模型具有造模简单，取材方便，且模型稳定，成功率高，重现性好，烧伤程度易于控制等特点。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种以石油炼油残料和汽油为混合燃料制作动物烧伤模型的方法，该方法具有造模简单、取材方便、模型稳定、成功率高、重现性好、烧伤程度易于控制等特点，可用于人类烧伤的病理机制、治疗药物的筛选和评价等研究的动物模型。混合燃料配方按重量百分比计为20 60%石油炼油残料即常压渣油，40 80%汽油。模型制作方法将石油炼油残料溶于汽油中，混勻，-20°C冷冻，取出，搅拌，反复冷冻搅拌3 7次至均勻胶状；将此混合燃料涂于动物皮肤表面，点火，持续燃烧15 30秒， 造成不同程度的烧伤。伤后立即补液复苏，分笼饲养，自由饮食；采用创面组织病理切片，光镜下病理诊断并确定烧伤等级。本模型所用的动物包括大鼠、小鼠、豚鼠、家兔、猪和狗等，可以模拟各种原因如火焰、电光、放射线、热水等导致的人类烧伤的症状和体征，为科研和临床治疗提供必须的动物烧伤疾病模型。具体实施例方式下面列举典型实施例，对本专利技术进一步说明，但不以任何形式构成对本专利技术的限制。实施例1 混合燃料致大鼠20%体表面积浅II度烧伤混合燃料的配制准确称量35g石油炼油残料即常压渣油，加入93#汽油至100g， 置磨口瓶内，充分搅拌。至冰箱内，每日充分振荡IOmin，共7天，呈均勻胶状。实验动物SD大鼠，雌雄不拘，体重200 250g，由第四军医大学实验动物研究中心提供。皮肤处理(1)祛毛3%戊巴比妥钠30mg/kg ip麻醉，将大鼠固定在板上，用电推子除去被毛，略大于拟烧伤面积。( 脱毛用硫化钠糊剂脱毛，待用。体表面积计算准确称量体重，称重前禁食16h。按以下公式计算体表面积 B= K* V^Wi ·9S =体表面积(cm2)，W =晨间体重(g)，K =常数(12. 54)。烧伤面积计算烧伤面积(cm2)=体表面积(cm2) X拟烧面积％。模型制作动物3%戊巴比妥钠30mg/kg ip麻醉，将预烧皮肤周围用湿布遮盖。用毛刷将混合燃料均勻的涂于预烧伤区，涂料面积与预烧伤面积一致，周围用耐火材料或湿纱布保护，立即点燃并以秒表计时，烧伤时间设定为15秒，到时用湿纱布灭火；燃烧需在气流稳定的环境进行。伤后立即腹腔注射乳酸林格液5ml，分笼饲养，自由饮食。确定烧伤深度烧伤创面分别于伤后Ih以内和Mh，将大小IcmX Icm的烧伤皮肤取下作组织病理学检查以确定烧伤深度，切取对照组全层皮肤，标本固定于10%的甲醛溶液中，经脱水、常规石蜡包埋，切片，HE染色。诊断结果创面红肿，出现水疱或表皮与真皮分离。组织学检查发现表皮破坏，真皮浅层损伤，诊断为浅II度烧伤。实施例2 混合燃料致大鼠20%体表面积深II度烧伤混合燃料配制、实验动物、皮肤处理等均同实施例1。模型制作动物3%戊巴比妥钠30mg/kg ip麻醉，将预烧皮肤周围用湿布遮盖。用毛刷将混合燃料均勻的涂于预烧伤区，涂料面积与预烧伤面积一致，立即点燃并以秒表计时，烧伤时间设定为25秒，到时用湿纱布灭火；燃烧需在气流稳定的环境进行。伤后立即腹腔注射乳酸林格液5ml，分笼饲养，自由饮食。确定烧伤深度同实施例1。诊断结果烫伤后创面立即变白，轻度肿胀，光泽差，肉眼可明显区分烧伤部位与正常皮区；24h后创面色泽加深，边界清晰。组织学检查表皮全部坏死脱落，真皮层胶元纤维结构不清，深层上部也有上述改变，但可见一些残存的皮肤附件存在，再下有较多的中性粒细咆浸润，血管扩张充血，诊断为深II度烧伤。实施例3 混合燃料致大鼠20%体表面积III度烧伤混合燃料配制、实验动物、皮肤处理等均同实施例1。模型制作动物3%戊巴比妥钠30mg/kg ip麻醉，将预烧皮肤周围用湿布遮盖。用毛刷将混合燃料均勻的涂于预烧伤区，涂料面积与预烧伤面积一致，立即点燃并以秒表计时，烧伤时间设定为30秒，到时用湿纱布灭火。燃烧需在气流稳定的环境进行。伤后立即腹腔注射乳酸林格液5ml，分笼饲养，自由饮食。确定烧伤深度同实施例1。诊断结果伤后皮肤面积显著缩小，颜色焦黄并有焦臭味。肉眼见烧伤皮肤凝固变薄。病理切片显示网状层下半部分以至全部或大部分被毁，毛囊及皮脂腺全部坏死，未见残余毛囊，病变符合III度烧伤创面特征。本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种用混合燃料制造动物烧伤模型，其混合燃料配方的特征在于含有重量百分比的２０％～６０％石油炼油残料即常压渣油、４０～８０％汽油。

【技术特征摘要】
1.一种用混合燃料制造动物烧伤模型，其混合燃料配方的特征在于含有重量百分比的 20% 60%石油炼油残料即常压渣油、40 80%汽油。2.按照权利要求1所述制造烧伤动物模型使用的混合燃料，其配制方法的特征在于将石油炼油残料溶于汽油中，混勻，-20°C冷冻，取出，搅拌，反复冷冻搅拌3 7次至均勻胶状，备用。3.根据权利要求1-2所述的制造动物烧伤模型采用的混合燃料配方及其配制方法，其制造动物烧伤模型的方法特征在于可选用小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、猪和狗等实验动物，将混合燃料用软刷均勻涂于...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹蔚，王四旺，谢艳华，康荣，杨倩，
申请(专利权)人：中国人民解放军第四军医大学，
类型：发明
国别省市：87