以嫩茎为外植体的滇杨组织培养方法技术

以嫩茎为外植体的滇杨组织培养方法，属于植物组织培养方法。本发明专利技术采集滇杨3年生枝条水培后以嫩茎为外植体，无菌嫩茎平放入分化培养基，在愈伤上长出丛生不定芽，再分别接入增殖、生根培养基，移栽炼苗基质等。本发明专利技术取材方便快捷，各阶段的培养基和炼苗基质都分别进行筛选比较，为滇杨工厂化快速繁殖、育苗以及滇杨生理遗传性质研究提供了方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物组织培养方法。
技术介绍
滇杨iPopulus yunnanensis)是杨柳科杨属青杨派树种，尚有的少量滇杨原始野生植株仅存于部分海拔较高的山区，现存滇杨林分主要以人工林为主，且基本由雄株组成， 雌株极为少见。滇杨作为林木遗传育种中的模式植物，其组织培养包括基本培养基及外源激素选择，外植体选择、消毒、分化、增殖与生根培养及炼苗移栽等步骤。杨树外植体的选择上，与茎尖分生组织接连的腋芽、叶片、茎尖具有较强的形态发生能力，通常从优树上选取相应组织部分复幼后再取外植体。金顺玉等在“黑林1号杨(小黑杨X波兰15A)的组织培养与植株再生”(植物生理学通讯，2003, 39(6) :639)中，利用叶片作为外植体，用75% 乙醇消毒Imin附加Naao消毒^iin获得了无菌苗。“3个杨树品种叶片再生体系的建立” (沈周高，等..中国农学通报，2006，22 (11):90-92.)，对3种黑杨杂种叶片不同时长的消毒处理结果中，0. l%HgCl2溶液消毒^iin处理，叶片污染率为20%，出愈率为76%。经过诱导，外植体重新开始细胞分裂与器官分化，形成完整植株。不同杨树的生长本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．以嫩茎为外植体的滇杨组织培养方法，包括以下步骤：（１）取生长健壮、无病虫害的３年生滇杨枝条，摘除枝条上叶片，置于室温下水培一个月，待其长出嫩茎后剪下作为外植体；（２）将步骤（１）嫩茎置入烧杯中，加入２％次氯酸钠，振荡６ｍｉｎ，无菌水冲洗３遍，再加７０％酒精消毒４０ｓ，之后加０．１％ＨｇＣｌ２消毒７　ｍｉｎ，最后用无菌水冲洗５遍；（３）用ＭＳ＋６ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．０５ｍｇ／Ｌ作为滇杨嫩茎不定芽诱导的分化培养基，将步骤（２）消毒后的无菌嫩茎平放入该培养基，２０～２５天生长出愈伤组织，约３０天在愈伤上长出丛生不定芽；（４）用ＭＳ＋６ＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．０２ｍｇ／Ｌ作为滇杨增...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：辛培尧，胥辉，段安安，李根前，周军，何承忠，刘岩，
申请(专利权)人：西南林业大学，
类型：发明
国别省市：53