【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及油菜小孢子培养方法,尤其涉及,属植物新品种培育新方法。
技术介绍
甘蓝型油菜是我国主要油料作物,其遗传育种、基因组学研究、代谢组学研究、种质资源创新、细胞遗传学研究和分子遗传学研究十分活跃。油菜小孢子离体培养在上述领域有着十分广泛的应用。Lichter于1982年利用甘蓝型油菜游离小孢子培养获得再生植株,随后各国学者对影响油菜小孢子培养及其成苗的诸多因素进行了广泛的研究,使得油菜小孢子培养技术更为简化、效率更高、便于操作。我国学者根据我国温室栽培条件不足、取材主要来自大田的实际情况,研究了大田油菜小孢子培养的制约因素及相关技术,形成了一套有别于国外的甘蓝型油菜小孢子培养技术体系。但是,尽管如此,甘蓝型油菜小孢子培养技术仍然繁琐,效率低下,存在进一步简化和提高效率的要求和余地。目前甘蓝型油菜小孢子培养技术主要来自Lichter的方法,主要包括初花期从主花序和上部一次分枝花序上摘取处于单核晚期的花蕾16个,用75%的酒精进行Imin的表面消毒,再在0. 的升汞中消毒lOmin。用无菌水洗涤3次,在含13%蔗糖的B5液体培养基(含B5大量元素、微量元素、 ...
【技术保护点】
1.甘蓝型油菜小孢子简化高效培养方法,包括取样、培养基提取小孢子、小孢子培养、胚状体的长途无菌运输及胚状体培养,其特征在于,对各环节进行了改进,具体如下:在甘蓝型油菜现蕾期、气温20℃时,H155×Qva选取每个单株上所有2.8mm~3.5mm单核靠边期的花蕾30-50个,放入装有碎冰的离心管中;去掉碎冰,将84消毒液倒入离心管中,灭菌,其间反复上下摇晃;将灭过菌的花蕾,用4℃的无菌水洗涤;倒掉无菌水,在离心管中滴入4℃的无菌13%蔗糖溶液,快速研磨成匀浆,用尼龙网过滤小孢子至另一无菌离心管中,加4℃的无菌13%的蔗糖溶液,密封,离心,弃上清液,加含16%蔗糖的NLN液体培 ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:文雁成,张书芬,王建平,朱家成,赵磊,
申请(专利权)人:河南省农业科学院经济作物研究所,
类型:发明
国别省市:41
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