本发明专利技术涉及一种用于血液白细胞五分类计数的溶血剂及其用途。所述的溶血剂由溶血剂A与溶血剂B组成。所述的溶血剂A含有聚氧乙烯型非离子表面活性剂、有机酸、季胺盐阳离子表面活性剂助溶剂、稳定剂和渗透压调节剂；所述的溶血剂B含有碱性无机盐和渗透压调节剂。与BeckmanCoulter公司生产的标准溶血剂的测定结果比较，相关性好、准确度高。特别是当血液标本出现异常细胞时，报警的灵敏度高、特异性好，显示了最有益的效果。
【技术实现步骤摘要】
一种用于血液白细胞五分类计数的溶血剂及其用途
本专利技术属于一种血液分析
更具体地，本专利技术涉及一种用于血液白细胞五分类计数的溶血剂，还涉及所述溶血剂的用途。
技术介绍
在临床血液学检验中，对患者外周血白细胞计数与分类对许多疾病的诊断和治疗都具有非常重要的意义。使用全自动血液分析装置进行白细胞分类通常需要使用溶血剂。 溶血剂一方面可以溶解红细胞，使细胞内的血红蛋白释放，用于血红蛋白的测定。另一方面，溶血剂在破坏红细胞后可以消除红细胞以及红细胞碎片对白细胞分析的干扰，以便后续进行白细胞计数和分类。近年来，已经有一些有关溶血剂的专利申请。例如CN 03116848. 5公开了血细胞分析仪用的溶血剂的生产方法，该方法包括用高压反渗透过滤膜生产的过滤水经过离子交换树脂，使水的电阻P > IOM Ω/cm，在搅拌速度为30 50转/分下，先加入十二烷基三甲基氯化铵，溶解后，冷却至15 30°C后再加入十四烷基三甲基溴化铵，最后加入氰化钾和其他物料，杀菌消毒，过滤，灌装。CN 200610012725. 8公开了一种环保无氰型溶血剂， 它是由缓冲液和贮存液混合制成的溶血剂，缓冲液由磷酸氢二钠、柠檬酸和水组成；贮存液由十二烷基三甲基氯化铵、磷酸氢二钠和柠檬酸和水组成。CN200710051576. 0公开了一种无氰化钾溶血剂的生产方法，该方法包括(1)纯净水制备；( 缓冲液配制；C3)乙二胺四乙酸溶解；(4)十二烷基季胺盐溶解；( 定容配制；(6)过滤灌装。CN 200710073144. X公开了溶血剂、白细胞分类试剂体系及分类方法。该溶血剂可将血液中的红细胞裂解， 裂解红细胞后的血液可用于血红蛋白浓度的测定。此外，本专利技术还涉及一种白细胞分类试剂体系，包括前述溶血剂和一种抑制剂。溶血剂裂解红细胞后，加入抑制剂可以阻止溶血剂对白细胞形态和结构的破坏。CN 200710125208.6公开了一种溶血剂，所述溶血剂含有至少一种有机酸。该专利技术溶血剂中添加了血红蛋白衍生物的稳定剂，避免衍生物随反应温度的变化而发生变化，保证在仪器正常使用温度范围内均能够获得准确、稳定的测试结果。 CN200810010718. 3公开了一种测定血细胞中白细胞的溶血剂，该溶血剂含有聚氧乙烯型非离子表面活性剂、固定剂、助溶剂、缓冲液和余量的去离子水。CN 200810106893. 2公开了血细胞分析仪稀释液及溶血剂，该稀释液含有氯化钠、硫酸钠、亚硫酸铜、乙二胺四乙酸二钠、 哌啦西啉钠、硼酸盐缓冲液与水；该溶血剂含有氯化钾、十二烷基三甲基氯化铵、十八烷基三甲基溴化铵、异丙醇、碳酸盐或盐酸缓冲液与水。但是，上述这些专利申请技术生产的溶血剂由于所用的阳离子表面活性剂的剂量大，并含有较多的无机盐，渗透压高，对白细胞膜的损伤较大，可使细胞质渗出，胞膜和胞内颗粒皱缩在胞核周围形成“膜包核”颗粒。在血液分析仪检测时只能按这种颗粒的体积大小将白细胞分成大、小2个细胞群或大、中、小3 个细胞群；而不能按白细胞的大小、形态和内部结构特点进行五分类计数。因此，上述这些专利申请技术只能用于白细胞计数及对白细胞进行2或3分群计数。另外，US5618733、5840515、6632676、2002/0098589、2004/0241769 也公开了相关的溶血剂及其制备方法。例如Mkata等人(US 5618733)公开了用于白细胞四分类的测定方法。方法中采用了季胺盐类阳离子表面活性剂作为溶血剂。溶血剂对各类白细胞的损伤不同，会使各类细胞皱缩的情况产生差异，从而使各类白细胞低角度散射光强度产生差异。同时，试剂中还使用芳香族有机酸或酸性色素对各类白细胞进行染色，从而使各类白细胞的高角度散射光强度也产生差异。通过高、低角度散射光的组合，可以对白细胞进行四类细胞分类。不过化学染料的使用不仅会增加试剂的成本，而且增加了仪器和试剂的复杂性。 Peovost (US 5840515)公开了以皂甙为主要组分的用于白细胞四分类的试剂。分析试剂为双试剂第一个试剂为溶血剂，皂甙为其主要组分。皂甙的使用浓度恰好使红细胞全部溶解，但白细胞未受到或仅受到轻微损害。第二试剂为终止液，主要组分为鞘流液，可以终止皂甙对白细胞的进一步损害。终止反应后对细胞大小、复杂度或荧光进行分析即可将细胞分为四个亚群。但由于皂甙可以来源于多种植物，不同来源的皂甙其纯度、对细胞的破坏程度等理化性质会有很大差异。因此，选择何种来源的皂甙作为溶血剂是一个难以解决的问题。Crews等人(US663^76、2002/0098589、2004/0241769)公开了多种对白细胞进行五分类的方法。这个方法中采用了双试剂第一试剂为溶血剂，其主要成分为皂甙，溶液的PH值为2. 9 3. 2。第二试剂为抑制剂，其中含HEPES盐溶液的pH值为9. 75。反应完成后，对细胞的大小、光散射、不透明度等指标进行分析即可对白细胞进行分类。但该方法仍使用了皂甙，因此同样存在如前所述的皂甙作为溶血剂的问题。为了克服上述现有技术存在的诸多技术缺陷，本专利技术人在总结与分析现有技术的基础上，通过大量的试验和分析研究，终于完成克服了这些技术缺陷的专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种用于血液白细胞五分类计数的的溶血剂。本专利技术的另一个目的是提供所述溶血剂的用途。本专利技术是通过下述技术方案实现的。本专利技术涉及一种血液白细胞五分类计数的溶血剂。所述的血液白细胞五分类计数的溶血剂由溶血剂A和溶血剂B组成，所述的溶血剂A由以重量份计的下述组分组成聚氧乙烯型非离子表面活性剂有机酸季胺盐阳离子表面活性剂助溶剂稳定剂渗透压调节剂3.0 ~ 10.0 份; 1.0 ~ 5.0 份； 1.0 ~ 5.0 份； 1.0 ~ 5.0 份；1.0-4.0 19. 0 ；所述聚氧乙烯型非离子表面活性剂的HLB值是8. 0所述溶血剂A的pH为2 5 ；所述的溶血剂B由以重量份计的下述组分组成碱性无机盐 4. 0 10. 0份；渗透压调节剂 35. 0 80. 0份；其中，所述聚氧乙烯型非离子表面活性剂具有如下化学式权利要求1. 一种血液白细胞五分类计数的溶血剂，其特征在于它由溶血剂A和溶血剂B组成，所述的溶血剂A由以重量份计的下述组分组成聚氧乙烯型非离子表面活性剂3.0 ~ 10.0份有机酸1.0 ~ 5.0份季胺盐阳离子表面活性剂助溶剂1.0 ~ 5.0份稳、定剂1.0 ~ 5.0份渗透压调节剂1.0~4.0份；所述聚氧乙烯型非离子表面活性剂的HLB值是8. 0 19. 0 ； 所述溶血剂A的PH为2 5 ； 所述的溶血剂B由以重量份计的下述组分组成 碱性无机盐4. 0 10. 0份；渗透压调节剂 35. 0 80. 0份； 其中，所述聚氧乙烯型非离子表面活性剂具有如下化学式式中R代表碳原子数为102.根据权利要求1所述的溶血剂，其特征在于所述的溶血剂A由以重量份计的下述组分组成聚氧乙烯型非离子表面活性剂4.0 ~ 8.0份有机酸1.5 ~ 4.0份季胺盐阳离子表面活性剂助溶剂1.5 ~ 4.1份稳定剂1.6 ~ 4.2份；渗透压调节剂1.5~3.5;所述的溶血剂B由以重量份计的下述组分组成 碱性无机盐 4. 5 8. 0份； 渗透压调节剂40. 0 70. 0份。3本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．一种血液白细胞五分类计数的溶血剂，其特征在于它由溶血剂Ａ和溶血剂Ｂ组成，所述的溶血剂Ａ由以重量份计的下述组分组成：所述聚氧乙烯型非离子表面活性剂的ＨＬＢ值是８．０～１９．０；所述溶血剂Ａ的ｐＨ为２～５；所述的溶血剂Ｂ由以重量份计的下述组分组成：碱性无机盐 ４．０～１０．０份；渗透压调节剂 ３５．０～８０．０份；其中，所述聚氧乙烯型非离子表面活性剂具有如下化学式：式中：Ｒ代表碳原子数为１０～２０的烷基或链烯基；ｗ＋ｘ＋ｙ＋ｚ等于３～２０中的一个整数。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：乐家新，
申请(专利权)人：中国人民解放军总医院，
类型：发明
国别省市：11
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