研究DNA与蛋白质相互作用的方法技术

本发明专利技术公开了研究DNA与蛋白质相互作用的方法，包括毛细管柱的修饰、DNA和蛋白质的共同孵育及标记以及运用毛细管电泳激光诱导荧光(CE-LIF)检测，最终确定分离条件；本发明专利技术的优点在于：具有筛分介质浓度调节简便、荧光标记方法简单、分离效果好、电泳过程试剂消耗量小、电泳时间短，可在30min内完成、检测效率高、分离效果好等优点，具有一定的实际应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及DNA与蛋白质的相互作用，具体地说是一种研究DNA与蛋白质相互作用的方法，属于分子生物学方法学领域。
技术介绍
在细胞的生命活动过程中，DNA的复制与重组、RNA的转录与修饰，以及病毒的感染与增殖等等，都是涉及到特定的DNA区段与特殊蛋白质结合因子之间的相互作用。因此， 长期以来人们就一直关注DNA结合蛋白的研究。蛋白质与DNA的相互作用也是分子生物学研究的中心问题之一。核酸-蛋白的互作在生命活动中发挥着广泛而重要的作用，二者的协作是各种生命现象的基础。将细胞或细胞器中的蛋白质、核酸等生物大分子的相互作用联系起来，是综合研究一个完整的生物学途径的核心内容。常规的研究DNA与蛋白质相互作用的方法主要包括凝胶阻滞试验 (gelretardation assay)、DNaseI 足迹试验(DNaseI footFIrinting assay)、甲基化干扰试验、酵母单杂交技术和噬菌体展示技术等等。凝胶阻滞试验(gel retardation assay)是用于研究DNA或RNA与蛋白质相互作用的重要实验技术之一。在凝胶实验中，传统的方法是用放射性同位素或其他生物素标记待检测的本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．研究ＤＮＡ与蛋白质相互作用的方法，其特征在于包括以下步骤：（１）毛细管柱的修饰取适当长度的石英毛细管，用氢氧化钠（ＮａＯＨ）清洗，再分别用水、甲醇、空气冲洗；然后用γ－甲基丙烯酰基－三（甲氧基）硅烷（ＭＡＰＳ）－甲醇冲洗毛细管，２０～２８℃反应８～１６ｈ后，用甲醇、水、空气各冲洗毛细管，再用丙烯酰胺单体溶液冲洗毛细管，２０～２８℃反应３～５ｈ后，用水冲洗，即可使用；以上反应均在２０～２８℃下进行；（２）ＤＮＡ和蛋白质的共同孵育及标记取ＤＮＡ　Ｍａｒｋｅｒ和宽分子量蛋白Ｍａｒｋｅｒ，加入三羟甲基氨基甲烷共同孵育，孵育结束后加核酸染料标记，然后取标记混合物进行ＣＥ－ＬＩＦ检测；以上反应在２５～...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王荣，张爱梅，谢华，贾正平，孙坤，
申请(专利权)人：王荣，
类型：发明
国别省市：62