一种用于防治植物病害的增效型微生物复配农药及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种防治植物病害的微生物和化学农药的复配农药，同时还涉及该复配农药的制备方法，属于农业技术领域。其技术方案为：将Ｂｓ－９１６菌株移植于培养基上活化；配制含咪鲜安浓度递增的培养基，将活化后的Ｂｓ－９１６菌株移入含低浓度咪鲜安的培养基中，再逐渐移入含咪鲜安浓度递增的培养基中，直到获得Ｂｓ－９１６抗性菌株；将抗咪鲜安的Ｂｓ－９１６菌株移入ＹＰＧ培养液培养获得培养液菌剂；将获得的菌剂与咪鲜安配制成增效型微生物复配剂。实践证明，使用本发明专利技术的复配农药喷雾、灌根等，几乎对各种常见作物病害都具有良好的防治效果，对减少农药残留、保护农田生态环境具有积极意义，有利于保持农产品的优良品质，保障农产品安全。

Synergistic microorganism compound pesticide for preventing and controlling plant diseases and preparation method thereof

The invention relates to a compound pesticide for preventing and treating plant diseases, and also relates to a preparation method of the compound pesticide, which belongs to the technical field of agriculture. The technical scheme is as follows: the Bs - 916 was transplanted to medium activation; preparation of culture medium containing increasing concentrations of Prochloraz, will be activated after Bs 916 strains in culture medium containing low concentration of Prochloraz, and then gradually with increasing concentration of Prochloraz in medium, until the obtained Bs 916 resistant strains; anti prochloraz strain named Bs 916 into YPG medium culture liquid agent; will get prepared agents and prochloraz synergistic microbial compound. Practice has proved that the use of the invention of mixed pesticide spray and root irrigating, has good control effect on almost all common crop diseases, it is of positive significance to reduce pesticide residues, protect the farmland ecological environment, conducive to good quality keeping of agricultural products, agricultural products safety protection.

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种防治植物病害的复配农药，尤其是一种微生物和化学农药的复配农药，同时本专利技术还涉及该复配农药的制备方法，属于农业

技术介绍
众所周知，水稻、果树和蔬菜上的病害繁多，危害严重。其中，有些病害的发生、发展严重影响了水稻、果树和蔬菜的优良品质。据申请人所知，目前作物病害的防治主要依赖化学农药。虽然化学农药的大量使用在确保农作物高产、控制病害流行方面起到了切实有效的作用，但同时也给人类的生存带来了日益严重的负面影响。一方面，化学农药在防治病害的同时，不可避免地杀灭了这些病害的天敌，从而使得田间生物群落的自然控害作用严重受到抑制，病原菌对农药的抗药性水平越来越高，农药的控害效果下降，最终导致产生用药量和施药次数不断增加，污染了农田生态环境的严重后果。另一方面，农药的大量使用严重影响了农产品的天然品质，尤其在我国加入WTO后，农药在农产品中的残留形成严重阻碍我国农产品出口的绿色壁垒。面对农产品新的需求形势和要求，有必要研究新的病害防治思路，建立以保障农产品的天然优良品质为核心，开发环境相容性好、低残留、对人畜无毒害的绿色农药，为我国农业的可持续发展的提供技术支撑。例如，水稻稻曲病(病原菌为子囊菌Ustilaginoidea virens)、梨黑斑病(病原菌为半知菌Alternaria kikuchiana Tanaka)、茄科蔬菜枯萎病(病原菌为半知菌Fusarium)和叶霉病(病原菌为半知菌Fulvia fulva)是病害，在世界各地普遍发生，是粮食、水果和蔬菜上的重要病害。其中，水稻稻曲病发病率可高达44.1％，产量损失达26.9％，已成为水稻生产的重要病害之一。尤其是稻曲病菌可产生对人畜有害的毒素，混杂于病稻谷中的稻曲病菌，对人们的健康构成直接的危害，成为水稻无公害生产的突出问题，严重影响了稻米的优质安全。梨黑斑病是梨的生育期内的主要病害，遍布全国各梨产区，该病原菌在梨挂果期均可为害，影响产量。其次，梨的挂果期长，在生育期内该病害的防治必须频繁用药，且用药量大，因此农药残留严重地影响梨子的品质，对人的健康形成了潜在的危害。枯萎病和番茄叶霉病是茄科蔬菜的主要病害，目前蔬菜上农药的使用频率和使用量是所有作物中最多的。枯萎病菌致使植株萎蔫，最后死亡，是毁灭性病害；叶霉病在我国各地均有发生，尤其以保护地番茄受害最重，严重时减产20％-30％。目前茄科蔬菜的枯萎病和番茄叶霉病的防治主要采用土壤处理、烟剂等防治，由于高频率的使用农药，污染了农田环境，同时农药的残留影响了蔬菜的品质。随着经济的快速发展和人民生活水平的提高，人们对农产品质量和产量的要求越来越高。在尽量减少由病虫害导致的产量损失的同时，减少化学农药的用量和残留，保持农产品的天然品质，已成为人们的共识。因此，研制开发新的防治药剂，尤其是生物农药极为重要和紧迫。令人可喜的是，人类发现有一种枯草芽孢杆菌微生物的细菌菌群中存有对多种真菌病害的病原菌具有拮抗作用的菌株。目前国内外均已开展用具有拮抗作用的枯草芽孢杆菌来防治作物病害的研究。国外报导主要对棉花、番茄的枯萎病(Mahaffee，W.Rosales A.M.Effects of seedfactors on Spermoshpere and rhizoshpere colonization of cotton byBacillus subtilis GB03，Phtopathology83，1120-1125)，国内研究者发表了枯草芽孢杆菌抗菌物质及对其抗菌蛋白分离的研究报告(孔建等，1992“枯草芽孢杆菌Bs-903菌株抗菌物质研究”《微生物学报》32(6))。但据申请人了解，至今未见有将枯草芽孢杆菌和某种农药复配后对包括上述四种病害在内的多种作物病害均具有良好防治效果的微生物复配农药。
技术实现思路
本专利技术的目的在于面对目前生产上大量使用化学农药防治农作物病害、严重污染农田生态环境、导致农药残留超标、影响农产品品质的状况，通过研究枯草芽孢杆菌和化学农药的复配，引进微生物菌剂，提出一种对各种常见作物病害均具有良好防治效果的增效型微生物复配农药，同时给出该复配农药的制备方法，从而实现操纵管理生态环境中微生物群的合理分布，恶化病原菌的生存环境，结合栽培管理和化学防治措施形成稳定、平衡、生物多样化的农田生态系统，有效、较持久地控制作物病害的流行，同时有效降低化学农药的使用量，改善农田生态环境，减少农药残留，以利于保持农产品的优良品质，保障农产品安全。申请人经过不断的探索摸索和反复对比实验，形成了本专利技术复配农药的技术方案，其要点是将枯草芽孢杆菌Bs-916菌株(以下简称Bs-916菌株)移植于细菌培养基上活化；配制含咪鲜安浓度递增的细菌培养基，将活化后的Bs-916菌株移入含低浓度咪鲜安的细菌培养基中，待生长良好后，再移入含咪鲜安浓度递增的细菌培养基中，依次类推，直到获得具有抗药性的Bs-916抗性菌株；将抗咪鲜安的Bs-916菌株移入细菌培养液培养获得培养液菌剂；将获得的菌剂与咪鲜安配制，即可获得本专利技术由抗咪鲜安的Bs-916菌剂与咪鲜安配制而成的增效型微生物复配剂。需要说明的是，上述枯草芽孢杆菌Bs-916菌种于二○○二年九月三十日在北京的中国典型微生物保藏中心(CGMCC)保藏，保藏编号为CGMCCNo.0808，拉丁学名为bacillus subtilis Bs-916(本文简称Bs-916)。其生物学性状记载为菌落形态单细胞形成菌落圆形，四周光滑，YPGA(酵母膏5.0g，胰蛋白胨5.0g；葡萄糖5.0g，琼脂17.0g；水1000ml)培养基平板上生长24h的菌落3-5mm，米色，表面有皱褶。鉴别性状格兰氏反应阴性，严格好气，2％NaCl不能生长，乳果糖、L-阿拉伯糖、L-乳酸、松三糖和D-苹果酸利用反应均为阴性，甘油、蔗糖、麦芽糖和纤维二糖利用反应均为阳性。较具体些说，本专利技术的增效型微生物复配农药采用以下步骤制备1、活化将枯草芽孢杆菌Bs-916菌株移植于细菌培养基上活化。2、抗药性诱导将细菌培养基配制成带咪鲜安平板，其中咪鲜安的浓度递增，例如为5ug/ml，10ug/ml，20ug/ml.......直至1000ug/ml。将活化后的Bs-916菌株移入含低浓度咪鲜安，例如5ug/ml的平板中，待生长良好后，再移入浓度递增的10ug/ml的平板中，依次类推，直到获得能在1000ug/ml上生长的Bs-916抗性菌株。3、获取培养液将抗咪鲜安的Bs-916菌株活化后，移入细菌培养液，15-38℃内振荡培养22-55小时获得培养液菌剂，菌含量为2-5×1010cfu/ml。4、复配成药将制获得的菌剂与按比例配制，获得本专利技术的增效型微生物复配剂。容易理解，以上咪鲜安为广义概念，即包括各种咪鲜安盐类(例如常用的咪鲜安锰盐等)。本专利技术微生物复配农药的有益效果如下1、依据微生态学原理，通过引进微生物菌剂，操纵管理生态环境中微生物群落的合理分布，恶化病原菌的生存环境，结合栽培管理、农业和化学防治措施，形成一个稳定的、平衡的、生物多样化的农田生态系统，从而有效地、较持久地控制多种作物病害的流行。2、微生物农药具有化学药剂所不具备的优点，其控病作用机制主要为①优势种群的竞争作用——枯草芽孢杆菌本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于防治植物病害的增效型微生物复配农药，其特征在于：由抗咪鲜安的枯草芽孢杆菌Ｂｓ－９１６（拉丁学名ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓＢｓ－９１６）菌剂与咪鲜安或咪鲜安盐配制而成。

【技术特征摘要】
1.一种用于防治植物病害的增效型微生物复配农药，其特征在于由抗咪鲜安的枯草芽孢杆菌Bs-916(拉丁学名bacillus subtilis Bs-916)菌剂与咪鲜安或咪鲜安盐配制而成。2.根据权利要求1所述用于防治植物病害的增效型微生物复配农药，其特征在于所述抗咪鲜安Bs-916菌剂的菌含量大于2×1010cfu/ml。3.根据权利要求2所述用于防治植物病害的增效型微生物复配农药，其特征在于所述抗咪鲜安Bs-916菌剂与咪鲜安配制的重量百分比为菌剂10％-90％，咪鲜安10％-90％。4.根据权利要求2所述用于防治植物病害的增效型微生物复配农药，其特征在于所述抗咪鲜安Bs-916菌剂与咪鲜安配制的重量百分比为菌剂20％-80％，咪鲜安20％-80％。5.一种用于防治植物病害的增效型微生物复配农药制备方法，其步骤为1)、活化——将枯草芽孢杆菌Bs-916菌株移植于细菌培养基上活化；2)、抗药性诱导——配制含咪鲜安浓度递增的细菌培养基，将活化后的Bs-916菌株移入含低浓度咪鲜安的细菌培养基中，待生长良好后，再移入含咪鲜安浓度递增的细菌培养基中，依次类推，直到获得具有抗药性的Bs-916抗性菌株；3)、获取培养液——将抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈志谊，刘永锋，刘邮洲，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]