具有皮脂腺样结构的组织工程皮肤及其制备方法技术

一种具有皮脂腺样结构的组织工程皮肤，本发明专利技术的真皮层是由胎盘间充质干细胞分布于凝胶溶液中形成，其中凝胶溶液由无抗原细胞外基质和具有诱导形成皮脂腺结构作用的蛋白组成，具有诱导生成皮脂腺结构的作用；表皮层是由角质化诱导后的羊膜上皮细胞与未经诱导的羊膜上皮细胞构成；在表皮层与真皮层之间的皮脂腺样结构由皮脂腺方向诱导后的羊膜上皮细胞团构建。本发明专利技术的组织工程皮肤有皮脂腺样结构，具有抗菌和滋润皮肤、降低移植后感染风险的应用前景。经动物试验证实，本发明专利技术的组织工程皮肤显著提高了移植创面的愈合率和成功率；并且细胞来源广泛、增殖能力强、传代次数多，有利于种子细胞的规模生产，降低产业化成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于组织工程学医用生物材料
，具体涉及构建具有皮脂腺样结构的组织工程皮肤及其制备方法。
技术介绍
大量的临床实验证明，组织工程方法制备的皮肤替代物能够用于创面的修复重建，国内外已有成熟的组织工程全层皮肤产品上市。随着技术的不断进步及人类生活质量的提高，对于组织工程皮肤产品的治疗效果也提出了更高的要求，即组织工程皮肤应具有更完善的功能和更逼真的结构。正常的皮肤含有毛囊、皮脂腺、汗腺等附属器结构。皮脂腺(sebaceousgland)是皮肤中的重要附属器结构，大多位于毛囊和立毛肌之间，为泡状腺，由一个或几个囊状的腺泡与一个共同的短导管构成；导管为复层扁平上皮，多开口于毛囊上段，也有些直接开口在皮肤表面。皮脂腺的发育和分泌受性激素的调节，青春期分泌活跃；皮脂腺的分泌物即为皮脂，是几种脂类的混合物，具有滋润皮肤和杀菌作用。现有的组织工程皮肤不具有皮脂腺附属器，皮脂腺是皮肤中分泌皮脂的功能单位，具有杀菌和滋润皮肤的作用。烧伤形成的创面在移植异体或人工皮肤后，轻微的创面感染都会导致治疗的失败，如果能够给病人移植具有杀菌作用的人工皮肤，将会大大降低术后风险。由于具有皮脂腺样结构的本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种具有皮脂腺样结构的组织工程皮肤，包括真皮层和表皮层双层结构，其特征在于，所述的真皮层是由胎盘间充质干细胞均匀分布于凝胶溶液中形成，其中凝胶溶液由无抗原细胞外基质和具有诱导形成皮脂腺结构作用的蛋白组成，该凝胶溶液具有诱导生成皮脂腺结构的作用；所述的表皮层是由角质化诱导后的羊膜上皮细胞与未经诱导的羊膜上皮细胞构成；在表皮层与真皮层之间为皮脂腺样结构，该皮脂腺样结构由经皮脂腺方向诱导后的羊膜上皮细胞团构建。

【技术特征摘要】
1.一种具有皮脂腺样结构的组织工程皮肤，包括真皮层和表皮层双层结构，其特征在于，所述的真皮层是由胎盘间充质干细胞均匀分布于凝胶溶液中形成，其中凝胶溶液由无抗原细胞外基质和具有诱导形成皮脂腺结构作用的蛋白组成，该凝胶溶液具有诱导生成皮脂腺结构的作用；所述的表皮层是由角质化诱导后的羊膜上皮细胞与未经诱导的羊膜上皮细胞构成；在表皮层与真皮层之间为皮脂腺样结构，该皮脂腺样结构由经皮脂腺方向诱导后的羊膜上皮细胞团构建。2.制备权利要求1所述的具有皮脂腺样结构组织工程皮肤的方法，其特征在于，具体步骤包括：步骤一.凝胶溶液、培养液和细胞的准备制备凝胶溶液：在无菌条件下，将无抗原细胞外基质溶解于体积浓度为0.1％的乙酸溶液中，使浓度为5～12mg/ml，将该溶液在冰浴下紫外灯照射；按体积比向该溶液分别加入10％的胎牛血清和10％的DMEM培养基，调pH至7.2，再分别加入DKK1蛋白30～150ng/ml，角蛋白6a 100～300ng/ml，丙酸睾酮2×10-9～3×10-7mol/L，得到具有皮脂腺结构诱导作用的凝胶溶液；配制培养液A：其组分按500ml体积计包括，商用培养基α-MEM 450ml、胎牛血清50ml、维生素C 50～150ug/ml、转铁蛋白5～10ug/ml、成纤维细胞生长因子10～20ng/ml；配制培养液B：其组分按500ml体积计包括，商用培养基DMEM 360ml、商用培养基F12 90ml、胎牛血清50ml、腺嘌呤180～260mM、胰岛素2～10mg/ml、转铁蛋白5～10ug/ml、表皮生长因子5～15ng/ml、氢化可的松0.2～0.5mg/ml；配制培养液C：其组分按500ml体积计包括，商用培养基α-MEM 450ml、胎牛血清50ml、丙酸睾酮2×10-9～5×10-8mol/L、转铁蛋白5～10ug/ml、成纤维细胞生长因子10～20ng/ml、DKK1蛋白20～100ng/ml、角蛋白6a 50～100ng/ml；配制培养液D：其组分按500ml...

【专利技术属性】
技术研发人员：金岩，杨鹭，张勇杰，
申请(专利权)人：中国人民解放军第四军医大学，西安组织工程工程技术研究中心，
类型：发明
国别省市：87