大肠埃希氏菌Ｋ８８、Ｋ９９、９８７Ｐ纤毛亚单位油乳剂疫苗的生产方法技术

本发明专利技术涉及一种是用于预防仔猪黄痢的大肠埃希氏菌Ｋ８８、Ｋ９９、９８７Ｐ纤毛亚单位油乳剂疫苗的生产方法，本发明专利技术是用分别生长Ｋ８８、Ｋ９９、９８７Ｐ纤毛抗原的大肠埃希氏菌，接种于适宜培养基培养，提取生长于菌体表面的纤毛抗原，与油佐剂混合乳化制成。用于预防由大肠埃希氏菌引起的新生仔猪腹泻病（即仔猪黄痢）。本发明专利技术采用新型设备和新的工艺参数，实现了三种纤毛抗原的高效、快速提取，免疫效力比普通铝胶佐剂疫苗高３～５倍。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种预防仔猪黄痢的Ｋ８８、Ｋ９９、９８７Ｐ纤毛亚单位疫苗的生产方法，其特征在于包括一下几个步骤：　１）按发酵罐容积７０％（Ｖ／Ｖ）加入改良Ｍｉｎｃａ液体培养基，同时按培养基０．１％（Ｖ／Ｖ）加入消泡剂，通入高温蒸汽灭菌３０ｍｉｎ，待培养基温度降至３５～３７℃，按３％（Ｖ／Ｖ）向发酵罐中加入种子培养物，调节培养温度至３７℃，调节融氧浓度至３５％，培养５～７ｈ分别制备含Ｋ８８纤毛抗原的大肠埃希氏菌Ｃ８３５４９菌株的菌液、含Ｋ９９纤毛抗原的大肠埃希氏菌Ｃ８３６４４菌株的菌液和含９８７Ｐ纤毛抗原的大肠埃希氏菌Ｃ８３７１０菌株的菌液；　２）各菌株发酵培养菌液经管式离心机１００００ｒ／ｍｉｎ离心３０ｍｉｎ，收获的菌泥按０．１ｇ／ｍｌ比例重新悬浮于生理盐水中。采用剪切机对在５８～６５℃对含不同纤毛抗原的大肠埃希氏菌的菌悬液按５０００～６０００ｒ／ｍｉｎ的剪切强度剪切２０～２５ｍｉｎ分别进行各纤毛抗原的提取；　３）按每１ｍｌ成品苗中，Ｋ８８纤毛抗原含量≥１００个抗原单位、Ｋ９９纤毛抗原含量≥５０个抗原单位、９８７Ｐ纤毛抗原含量≥５０个抗原单位，配制混合纤毛液；　４）按常规方法制备成油乳剂疫苗。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：郭玉广，孙健，李明义，范根成，杜元钊，胡潇，
申请(专利权)人：青岛易邦生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：95[中国|青岛]