吲哚-3-丙酸、其盐和酯制备药物的用途制造技术

通过使细胞与有效量的吲哚－３－丙酸或其盐或酯接触，防止淀粉样β蛋白对细胞的细胞毒作用。另外，通过给人类患者给药防止或逆转原纤维形成有效量的吲哚－３－丙酸或其盐或酯，治疗人类患者的原纤维形成病。通过使生物样品与有效量的吲哚－３－丙酸或其盐或酯接触，降低生物样品中的氧化。另外，可以通过给药有效量的吲哚－３－丙酸或其盐或酯，治疗游离基和／或氧化胁迫发生作用的疾病或其它病症。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本申请要求1998年2月23日申请的序列号为No.60/075,555的美国临时专利申请和1998年12月16日申请的序列号为No.60/112,565的美国临时专利申请的优先权。本申请通篇参考了多种出版物，很多在括号中。在本申请各部分的末尾提供了这些出版物的完整出处。因此，这些出版物的全文内容引入本文作为参考。专利
本专利技术涉及吲哚-3-丙酸的应用，更具体地说，涉及吲哚-3-丙酸用于预防淀粉样β蛋白的细胞毒作用，治疗原纤维生成病，降低生物样品中的氧化，以及治疗游离基和/或氧化胁迫(oxidative stress)发挥作用的疾病或其它病状。专利技术背景据估计10％的65岁以上老年人患有轻度到重度痴呆症。阿耳茨海默氏病(“AD”)是慢性痴呆症的最常见病因，在美国约有二百万人患有这种疾病。虽然该病曾经被认为是中年病状，但目前已经知道患有痴呆症的老年人脑中也发现阿耳茨海默氏病的组织病理损伤(即，神经淀粉样斑、神经原纤维变性、和颗粒空泡神经元变性)。这些损伤的数量与智力衰退的程度相关。这种高发病率，以及老年人群比例的上涨速率，使痴呆症(特别是AD)成为当前最重要的公共健康问题之一。脑淀粉样蛋白的沉积是阿耳茨海默氏病的一个主要神经病理学标志。淀粉样蛋白是一种由40-42个氨基酸组成的肽，被称为淀粉样β蛋白(“Aβ”)(Glenner和Wong，1984)。发现AD中的淀粉样蛋白沉积物主要作为老年斑以及脑和脑膜血管壁的组成成分(Robakis和Pangalos，1994)。分子克隆表明Aβ含有较大淀粉样蛋白前体蛋白(“APP”)的一个较小区域(Robakis等，1987；Weidemann等，1989)。简单地说，它是一种I型完整细胞膜糖蛋白，具有较大的细胞质外部分，较小的细胞质内区域，和一个单一的跨膜区。在APP的N-末端部分分泌之前(Sambamurti等，1992；Robakis和Pangalos，1994)，APP接受大量的翻译后修饰(Pappolla和Robakis，1995；Robakis和Pangalos，1994)。APP的生理加工涉及Aβ序列被一种未鉴定酶--α-分泌物酶酶切(Anderson等，1991)。少量APP分子在另两个位点被酶切，可以潜在地产生形成淀粉样蛋白的分泌型或膜结合型APP(Robakis和Pangalos，1994)。正常细胞代谢过程中也产生Aβ(Haass等，1992；Shoji等，1992)。就淀粉样蛋白是否导致AD还存在一些争议；但是，三个主要系列的证据进一步证明了淀粉样蛋白的推测。第一套证据是鉴定了APP基因中的几个点突变。这些突变在患该家族型疾病的患者亚群中有所分别，由此表明APP基因和AD之间的致病关系(Chartier-Harlin等，1991；Kennedy等，1993)。第二，淀粉样蛋白的沉积短时间超前于神经原纤维改变的发展(Pappola等，1996)，该观察也与淀粉样蛋白和神经原变性之间的关系一致。最后，还曾表明Aβ对神经元具有毒性(Yankner，等，1990；Behl等，1992；Behl等，1994；Zhang等，1994)，这也是证明上述淀粉样蛋白可能构成AD中神经元病理假设的一个发现。Aβ具有神经毒作用的发现提供了淀粉样蛋白累积和神经变性之间的可能存在联系。由于衰老和AD之间的密切相关性，以及这两种病症的神经病理学的相似性，推测氧化胁迫在AD损伤的发病机理中发挥重要作用。几位研究者证明氧游离基(“OFR”)与Aβ的细胞毒性质有关(Behl，1992；Behl，1994；Harris等，1995；Butterfield等，1994；Goodman和Mattson，1994)。这些发现很重要，因为氧化损伤的标记与AD神经病理损伤局部相关(Pappolla等，1992；Furuta等，1995；Smith等，1995；Pappolla等，1996)。基于这些观察，推测抗氧化剂可能是AD的潜在治疗药物(Mattson，1994；Hensley等1994；Pappolla等，1996)。有必要继续研究治疗AD和其它原纤维形成疾病的方法。专利技术概述本专利技术涉及防止淀粉样β蛋白质对细胞的细胞毒作用。该方法包括将细胞与有效量的吲哚-3-丙酸或其酯或盐接触。本专利技术进一步涉及治疗人类患者原纤维形成疾病的方法。该方法包括给人类患者施用抑制或逆转原纤维形成的有效量的吲哚-3-丙酸或其酯或盐。本专利技术还涉及降低生物样品中氧化作用的方法。该方法包括使生物样品与有效量的吲哚-3-丙酸或其盐或酯接触。本专利技术进一步涉及游离基和/或氧化胁迫发挥作用的疾病或其它病症的治疗方法。该方法包括给人类患者施用治疗上述疾病或病症有效量的吲哚3-丙酸或其酯或其盐。附图简述图1是利用SK-N-SH人成神经细胞瘤细胞单独接触Aβ(25-35)或者接触Aβ(25-35)和IPA或PBN的组合，说明细胞存活力(以百分比表示)的直方图。图2是利用PC12大鼠嗜铬细胞瘤细胞单独接触Aβ(25-35)或者接触Aβ(25-35)和IPA或PBN的组合，说明细胞存活力(以百分比表示)的直方图。图3是利用SK-N-SH人成神经细胞瘤细胞单独接触Aβ(25-35)或者接触Aβ(1-42)和IPA或PBN的组合，说明细胞存活力(以百分比表示)的直方图。图4是说明通过将细胞单独与淀粉样肽Aβ(1-42)或DDTC接触或分别与IPA组合接触诱导的脂类过氧化(MDA测定)程度的直方图。图5是通过IPA对DDTC抑制超氧化物歧化酶而诱导的PC12大鼠成神经细胞瘤细胞细胞死亡的抑制作用，显示IPA的抗氧化活性的直方图。图6A和6B是显示IPA对Aβ(1-40)培养24小时(图6A)和48小时(图6B)β片层形成影响的直方图。专利技术简述本专利技术基于如下发现，即天然化合物吲哚3-丙酸(“IPA”)具有组合性质，使它在防止淀粉样β蛋白质对细胞的细胞毒作用，治疗所有原纤维形成疾病、以及保护细胞免受氧化损伤方面尤其有用。因此，本专利技术的化合物是阿耳茨海默氏病和其它原纤维形成疾病的有效治疗剂，例如但不限于，蛋白感染素相关疾病。它还可以用作治疗其它游离基和/或氧化胁迫发生作用的疾病的治疗剂。这些疾病包括帕金森氏病、雷维小体痴呆、肌萎缩性脊髓侧索硬化、进行性核上麻痹、其它形式的淀粉样变、中风、动脉硬化症、肺气肿、和某些形式的癌症。另外，数据表明IPA还具有抗原纤维形成的作用。本专利技术提供了防止淀粉样β蛋白对细胞产生的细胞毒作用的方法。该方法包括使细胞与有效量的吲哚-3-丙酸或其盐或酯接触。如本文所使用的，“淀粉样β蛋白”(“Aβ”)是指形成大脑淀粉样蛋白的40-42个氨基酸的肽，它是阿耳茨海默氏病(“AD”)的主要神经病理学标志，还指能够对细胞形成细胞毒作用的Aβ片段。例如，一种这类Aβ片段是由Aβ的25-35位氨基酸残基构成的片段(对于Aβ的全长氨基酸序列，参见Glenner和Wong，1984，引入本文作为参考)。如本文所使用的，吲哚-3-丙酸意味着包括具有下列通式的化合物 其中R1、R2、R3、R4、R5、和R6独立地选自氢、取代烷基、未取代烷基、取代芳基、未取代芳基、烷氧基、取代或未取代氨基、硫醇基、烷硫基、芳硫基等。优选R5和本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种防止淀粉样β蛋白对细胞产生的细胞毒作用的方法，包括： 使细胞与有效量的吲哚－３－丙酸或其盐或酯接触。

【技术特征摘要】
US 1998-2-23 60/075,555;US 1998-12-16 60/112,565范围内。参考文献Anderson，J.P.，等，神经科学文献(Neurosci Lett)128126-129(1991)。Behl，C.，等，生物化学和生物物理学研究通讯(Bioehem Biophys ResCommun)186944-950(1992)。Behl，C.，等，脑研究645253-264(1994)。Behl，C.，等，细胞77817-827(1994)。Burdick，D.，等，生物化学杂志(J Biol Chem)267546-554(1992)。Busciglio，J.，等，Neurobiol Aging 13609-612(1992)。Busciglio，J.，等，神经化学杂志61(4)1565-1568(1993)。Butterfield，D.A.，等，生物化学和生物物理学研究通讯200710-715(1994)。Chartier-Harlin，M.C.，等，自然353(6347)844-846(1991)。copani，A.，等，分子药理学47(5)890-897(1995)。Furuta，A.，等，美国病理学杂志(Am J Pathol)146357-367(1995)。Glenner，G.G.，和Wong，C.W.，生物化学和生物物理学研究通讯120885-890(1984)。Goodman，Y.，和Mattson，M.P.，试验神经学(Exp Neurol)1281-12(1994)。Haass，C.，等，自然359322-324(1992)。Harris，M.E.，等，试验神经学131193-202(1995)。Hensley，K.，等，美国国家科学院科学进展91(8)3270-3274(1994)。Johnson，H.E.，和Crosby，D.G.，有机化学杂志(J Org Chem)，25569ff(1969)。Kemp，D.S.，和Vellaccio，F.，编，有机化学，Worth Publishers，Inc.，pp.371-377和1258(1980)。Kennedy，A.M.等，脑116309-324(1993)。Le，W-D.，等，脑研究68649-60(1995)。Mark，R.J.，等，神经科学杂志156239-6249(1995)。Mattson，M.P.，Ann N Y Acad Sci 74750-76(1994)。Mattson，M.P.，等，神经科学趋势(Trends Neurosci)16409-414(1993)。Mattson，M.P.，等，神经科学杂志12376-389(1992)。Pappolla，M.A.等，美国病理学杂志140621-628(1992)。Pappolla，M.A.和Robakis，N.K.，行为医...

【专利技术属性】
技术研发人员：米格尔A帕波拉，布拉斯弗兰焦内，若热吉索，伯克哈特珀格勒，
申请(专利权)人：南亚拉巴马州医学科学基金会，纽约大学，
类型：发明
国别省市：US[美国]