生产疫苗的方法技术

本发明专利技术涉及生产含有自体性抗体的疫苗的方法，其特征在于下列步骤：由含有自体性抗体的体液或者由自体性细胞或组织制备物制备含有抗体的液体；用固体载体处理含有抗体的液体，在固体载体上固定有与特定的抗体群结合的配体，其具有这样的规格，即作为配体不使用具有相同独特型的定向对抗肿瘤相关抗原的抗体或其片段；获得与配体结合的抗体；和加工获得的抗体以形成自身性疫苗，该疫苗含有大于１微克的免疫原性数量的抗体。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及。高等生物以免疫系统为特征，免疫系统能够保护高等生物免受具有潜在危害的物质或微生物的侵害。如果物质(抗原)侵入身体，该物质被识别为“外源的”并在免疫系统的帮助下被清除。此外“退化的”内源性细胞通常也由免疫系统识别并从运转中清除。人的适应性免疫系统由两个基本的成分组成，即体液和细胞免疫。适应性免疫应答基于B和T淋巴细胞的克隆选择，并原则上允许任何一种抗原的识别以及免疫记忆的建立。这些适应性免疫系统的特征一般在接种中有益地呈现出来。每个B细胞产生一种具有确定的结合特异性的抗体。这些抗体作为特异性受体也存在于产生它的B细胞的膜中。对抗被识别为外源的抗原的体液免疫应答基于那些产生抗体的B细胞的选择性活化，这样的抗体能够与各自抗原的表位结合。对于抗体的多样性，在B细胞分化期间的DNA重排起着决定性的作用。在人的血清中，大量地存在着具有极大不同特异性、同型和亚类的抗体。血清中所有免疫球蛋白的总浓度为15-20mg/ml；这就是说，大约100g具有极大不同特异性的免疫球蛋白在血液中持续循环。不可能指出具有不同特异性的所有抗体的准确数量，一个人中不同B细胞克隆的全部存量为大约109。一般地，尽管具有不同的亲和性和亲和力，某个确定的抗体能够结合多种彼此类似的抗原。在内源性调节机制的帮助下，免疫系统必须保持这些不同的特异性的分布和比重的动态平衡。对此一种基本的机制为“独特型网络”(Ann.Immunol.125C373-89(1974))。针对每个决定其结合特异性的抗体独特型，存在有抗独特型抗体，这些抗体因此与第一个抗体的独特型如同识别抗原般地结合。根据该解释模型，淋巴细胞上独特型-特异性受体之间的相互作用是免疫系统调节的原因。事实上显然发生了这些相互作用，因为显示出在免疫应答的过程中也出现了对抗由免疫应答最初诱导的抗体的抗独特型抗体。由于存在对抗每个抗体的抗独特型抗体，淋巴细胞对于抗体的独特型基本上是不耐受的。存在有多种干预免疫系统的可能途径。1.被动抗体疗法用于治疗目的，可以向生物体提供抗体，该抗体对于在该生物体中满足某种功能是必需的。这种类型的应用被称为被动免疫疗法，其能够用于多种医学适应症，例如癌症的免疫疗法(Immunol.Today(2000)，21403)、中毒(Toxicon(1998)，36823；Therapie(1994)，4941)和感染(Clin.Infect.Dis.(1995)，21150)。在这些情况下，可以使用抗体，这些抗体或者来源于经适当免疫的动物，或者可以采用多种生物学或分子生物学技术(例如杂交瘤技术，噬菌体展示技术等等)通过免疫球蛋白基因的无限增殖化从细胞中获得。被动抗体施用有着不能长期持续作用的缺点，因为其效用会随着受体生物体内所施用的抗体的自然降解而减弱。2.主动免疫为了调节免疫系统，可以使用抗原进行免疫。抗原为抗体能够结合的分子、分子复合物或整个生物体。不是所有的抗原都可以诱导免疫应答，即不是所有的抗原都是免疫原。某些小分子不被免疫系统注意(半抗原)，这种较小的分子能够以合适的形式呈递给免疫系统从而将其制成了免疫原。一种这样的方法为将半抗原与免疫原性分子即所谓的载体分子偶联在一起。其他非免疫原抗原为所谓的自身抗原，即被免疫系统识别为内源性物质的结构。用这种抗原进行免疫一般不会导致特异的免疫反应。在肿瘤相关抗原的情况下，这些抗原其实是自身抗原的事实成为开发有效的疫苗中最大的困难之一。采用完整的抗原进行针对病原体如病毒或细菌的主动免疫的唯一的可能是将病原体经过减毒或杀死。对于减毒的病原体，存在发生复活的风险，即减毒的病原体再次变成有毒力的形式。这一问题的解决办法可以是使用抗独特型抗体作为替代抗原用于免疫(Int.Arch.Allergy Immunol.(1994)，105211)。也提出了将使用抗独特型抗体的主动免疫用于过敏反应的治疗(Int.Arch.Allergy Immunol.(1999)，118119)。可是，对抗内源性抗原的抗体存在于每个人的血清中，其被称为“天然自身抗体”。这种天然自身抗体的抗独特型抗体参与了这些自身抗体的调节(Immunol.Reviews(1989)，110135；Eur.J.Immunol.(1993)，23783)。不足的独特型调节似乎在许多自身免疫疾病中起着作用-全身性红斑狼疮(Autoimmunity(1994)，17149)；-自身免疫甲状腺炎(Eur.J.Immunol.(1993)，232945)；-全身性血管炎(J.Autoimmunity(1993)，6221)；-吉兰-巴雷(Guillain-Barre)综合症(Clin.Immunol.Immunopathol.(1993)，67192)；-抗凝血因子VIIC自身免疫疾病(Proc.Natl.Acad.Sci.，USA(1987)，84828)。用模拟自身抗原的独特型抗体进行免疫已施用于自身免疫疾病(J.Rheumatol.(1999)，262602)。此外，也已描述了用于诱导抗独特型抗体的肽(Proc.Natl.Acad.Sci.，USA(1993)，908747；Immunology(1999)，96333)。同样地也已经提出了基于T细胞受体的自身免疫疾病中的免疫(J.Immunol.(1990)，1442167；US-PS 6,090,387；US-PS 6,007,815)。主动免疫也可用于抗毒性物质(例如细菌毒素)的保护。如果在毒素将用作疫苗的情况下，它们必须事先减毒或者失活。可是这样的失活也可能影响免疫应答的效能。已经有作为模拟毒素的疫苗的抗独特型抗体的建议(Int.J.Clin.Lab.Res.(1992)2228；Clin.Exp.Immunol.(1992)89378；Immunopharmacology(1993)26225)。也已经提出对于第一次免疫使用抗独特型抗体，以便随后可用单独使用则效能太弱的疫苗获得较高的特异性免疫效能(Virology(1984)136247)。3.从血液中抽取抗体和免疫复合物从血液中去除抗体的一种可能途径为使用灌注系统(US-PS5,122,112)，其主要应用于自身免疫疾病(The Lancet(20.10.1979)，824)。可是，这种体外免疫吸附对于患者造成巨大负担和高治疗风险，所以这种方法不适合于广泛的临床治疗。目前可以用某些抗原进行用于调节的主动免疫，这些抗原可能具有太强的毒性或者潜在的传染性或者是非免疫原。这一问题的部分解决办法为使用抗独特型抗体用于免疫。然而必需的是在细胞培养物中或体外制备这种抗体，或者也可以在某些生物体中诱导出它们，然后将它们施用于另一个生物体。因此，本专利技术的一个目的为克服现有技术的缺点，并利用患者的免疫系统来提供用于多种疾病的治疗材料和方法以供使用。尤其是形成用于自身免疫疾病、过敏反应和相似疾病的有效治疗策略。因此，本专利技术的目的为生产含有自体性抗体的疫苗的方法，其特征在于下列步骤-由含有自体性抗体的体液或者由自体性细胞或组织制备物制备含有抗体的液体；-用固体载体处理含有抗体的液体，在固体载体上固定有与特定的抗体群结合的配体，其具有这样的规格，即作为配体不使本文档来自技高网...

【技术保护点】
生产含有自体性抗体的疫苗的方法，其特征在于下列步骤：－由含有自体性抗体的体液或者由自体性细胞或组织制备物制备含有抗体的液体；－用固体载体处理含有抗体的液体，在固体载体上固定有与特定的抗体群结合的配体，其具有这样的规格，即作为 配体不使用具有相同独特型的定向对抗肿瘤相关抗原的抗体或其片段；－获得与配体结合的抗体；和－加工获得的抗体以形成自身性疫苗，该疫苗含有大于１微克的免疫原性数量的抗体。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：G赫米勒，H罗布尼尔，H艾克特，O多布赫夫迪尔，R克舍伊斯，M舒斯特，E瓦瑟尔保尔，G瓦克森科尔，
申请(专利权)人：伊格尼昂癌症治疗研发股份公司，
类型：发明
国别省市：AT[奥地利]