本发明专利技术涉及一种微生物培养物的新用途，具体地说是金黄色葡萄球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ｓｕｂｓｐ．ａｕｒｅｕｓ，ＣＧＭＣＣ Ｎｏ．０９１０）的代谢产物在视网膜色素变性（ＲＰ）疾病中的应用，代谢产物制备成药物的具体方法为，包括金黄色葡萄球菌的复苏、在猪心胨培养基制备种子培养液，然后经发酵制成培养菌液：以１０００ｍｌ滴眼液计，其中培养菌液８０ｍｌ～１５０ｍｌ，氯化钠５ｇ～１２ｇ，其余为注射用水，经０．２２μｍ微孔滤膜过滤，热压灭菌，制得滴眼液。本发明专利技术人研究证明，自行筛选的金黄色葡萄球菌ＣＧＭＣＣＮｏ．０９１０培养物可有效治疗与缓解视网膜色素变性且无不良反应。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种微生物培养物的新用途，具体地说是金黄色葡萄球菌金黄色亚种(Staphylococcus aureus subsp.aureus，CGMCC No.0910)的代谢产物在视网膜色素变性(RP)疾病中的应用。
技术介绍
全球约有400多万RP患者，在发达国家儿童及新生儿发病率及致盲率也很高，视网膜色素变性是一组以进行性感光细胞及色素上皮功能丧失为共同表现的遗传性视网膜变性疾病，主要临床特征为眼盲、进行性视野损害、眼底色素沉着和视网膜电图异常或无波。视网膜色素变性是一种慢性、进行性、遗传性、营养不良性视网膜色素病变。其主要包括原发性视网膜色素变性，结晶性视网膜色素变性，白点状视网膜色素变性和无色素性视网膜色素变性。该病早期只有夜盲的症状，完全不影响工作，随着病情的发展，视力悄然下降，视野缩小，最后呈管状视野而失明，被称为“不是癌症的癌症”。目前国际上尚无有效的治疗药物。有关金黄色葡萄球菌代谢产物的应用，主要有防治肿瘤、戒毒、抗艾滋病等方面，未见有在治疗眼病方面的应用报道。如沈阳协合集团有限公司申请了“从金黄色葡萄球菌代谢产物中提取治疗恶性肿瘤用药的方法”专利，CN1054190A(1023567C)，该方法的产品简称“BM8288”对恶性肿瘤细胞有直接和间接的杀伤作用，培养基主要成分采用蛋白胨、猪心浸液、羊肝浸液制备。用肉汤复苏培养菌种，用脱脂朱奶作菌株的保护剂，高压灭菌不加任何防腐剂，经热处理、冷浸出、活性炭处理、除菌过滤等方式制得注射液，具有显著的大幅度地增强机体免疫功能的作用。沈阳协合生物制药股份有限公司申请了“一种金黄色葡萄球菌代谢产物药物口服制剂及其用途”专利，CN1647801A，该药物口服制剂，其含有以金黄色葡萄球菌经培养、除菌、过滤所得的代谢产物原液。对防治肿瘤、糖尿病、乙肝、戒毒、抗艾滋病、抗病毒、提高免疫功能等有很好的疗效。沈阳协合集团有限公司申请了“用于提高机体免疫功能的口服金黄色葡萄球菌滤液制剂”专利，CN1509725A，其以肠毒素SEA、SEB、SEC、SED及TSST-1作为活性成份，经口服给药；滤液中肠毒素的含量为5～10ng/ml。口服金黄色葡萄球菌滤液制剂可升高人体内白细胞的数量，也可提高人体内白小板数量；本专利技术具有如下优点疗效确切；克服了目前口服生物制剂过少不足，毒副作用小。沈阳协合集团有限公司申请了“金黄色葡萄球菌肠毒素在制备治疗或预防艾滋病药物中的应用”专利，CN1509762A，金黄色葡萄球菌肠毒素给病人服用后，能明显提高病人的抗病毒能力。视网膜色素变性中医称“高风雀盲”或“高风内障”。此病，明·倪维德著作《原机启微》曰“人有昼视通明，夜视罔见，虽有火光月色，终为不能物者，此谓阳衰不能抗阴之病。”在临床所见本病，多为双眼，患单眼患病仅属少见，至今仅见一例，从眼底观察有无色素性、骨细胞样、白点状三种均以夜盲先见。继有视野小，终至失明，另一种椒盐状或结晶状，此病先以中心视力减退，周边视野尚可，继尔夜盲。视网膜色素变性除夜盲视野缩小及上述体征外，还有共同体征即眼底动静脉血管变细，视盘从蜡黄至苍白，另外，常见晶状体有锅巴状纹囊，混浊，有些病例伴继发性青光眼。后期患者都有夜盲及畏光等症状。继尔双目失明。骨细胞样视网膜色素变性应与脉络膜炎引起的色素堆积要做鉴别。虽然后者也有夜盲，但眼底动静脉的变细不显著。本病有数学者认为与遗传有关，但临床询问家族史，难以确认与遗传有关，由于病因至今不详治疗效果不佳。近来从基因学说眼底细胞克隆正在研究。从中医眼科来看，目前也有种种报导，经用于临床验证效果也不理想。鉴于这种情况，本专利技术人经过大量的实验研究，发现金黄色葡萄球菌的代谢产物，对光损伤诱导的视网膜色素变性具有保护作用，从而得知金黄色葡萄球菌的代谢产物制成的滴眼液在治疗与缓解视网膜色素变性疾病中具有很好的疗效。
技术实现思路
本专利技术的任务是提供一种金黄色葡萄球菌的代谢产物的新用途，具体是在治疗视网膜色素变性疾病中的应用，即金黄色葡萄球菌经培养制得代谢产物，然后制备成滴眼液，该滴眼液可有效治疗视网膜色素变性。本专利技术采用的金黄色葡萄球菌系金黄色葡萄球菌金黄色亚种(Staphylococcus aureus subsp.aureus，CGMCC No.0910)是一种新菌株，在申请日前已送往中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心提供微生物样品。提供微生物样品的请求人是邹庆宇，地址杭州市上城区佑圣观路101号三幢1单元36室，保藏时间2003年03月24日，保藏号0910。本专利技术金黄色葡萄球菌金黄色亚种(Staphylococcus aureus subsp.aureus，CGMCC No.0910)的代谢产物在视网膜色素变性(RP)疾病中的应用，其滴剂的制备先将金黄色葡萄球菌金黄色亚种(CGMCCNo.0910)复苏，在猪心胨培养基制备种子培养液，然后经发酵制成培养菌液，具体方法如下(1)培养基的制备猪心培养基配方和工艺流程猪心胨培养基为猪心浸出液15ml％～25ml％、蛋白胨1g％～3g％、氯化钠0.6g％～1.2g％；按配方称取蛋白胨，氯化钠，量取猪心浸出液，加注射用水至所需配方量，加热溶解，搅拌均匀，灭菌，即得猪心胨培养基。猪心浸出液的制备取新鲜猪心，去除血块、脂肪及筋膜，用水冲洗干净，搅碎，称重，加二倍量的注射用水置4℃下保存14小时，取出，煮沸二小时趁热用八层纱布过滤，再用布氏漏斗抽滤，得澄清黄色液体备用。(2)金黄色葡萄球菌种子液的制备将金黄色葡萄球菌金黄色亚种(Staphylococcus aureus subsp.aureus，CGMCC No.0910)接种猪心胨培养基，35℃～37℃培养24小时，再将种子菌转入营养琼脂平板中，划分离培养24小时，选取典型菌落接种于猪心胨培养基，35℃～37℃培养24小时，得种子培养液；(3)发酵培养菌液的制备将上述制得的种子培养液接种于猪心胨培养基中，35℃～37℃发酵培养48-72小时，中止培养，固液分离，用0.22μm微孔滤膜除菌，0.1MPa高压下灭菌，得培养菌液。(4)利用上述代谢产物即培养菌液制备视网膜色素变性的滴眼液以1000ml滴眼液计，培养菌液80ml～150ml、氯化钠5g～12g，加注射用水至1000ml；制备方法将氯化钠溶解于注射用水中，加入所需的培养菌液中，补水至全量，充分搅拌后用0.22μm微孔滤膜过滤，热压灭菌，冷却，分装。本专利技术的金黄色葡萄球菌金黄色亚种(Staphylococcus aureus subsp.aureus，CGMCC No.0910)，此菌株自1998年在实验室被发现以来，共传代50次左右。一般情况下是4～8℃菌种斜面传代保存，两个月转移一次，但在转移的过程中要纯化菌种与活化3～4次。特殊情况时保存时间稍长些，三个月传代一次。菌种稳定性自发现此菌株以来，在4℃～8℃的条件下进行传代保存(保存期2个月左右。)在这么多次的传代、纯化复壮、活化及生产培养过程中，尚未发现有异常现象。在30℃～37℃温度培养，其菌落形态，细菌个体形态的稳定性均佳，细菌体培养分泌产物成分及有关成分的含量也较稳定。生物特性细胞球形，直径0.5μm～1.5μm。单个，成对和不规则堆状。革兰氏阳性，不运动，本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种金黄色葡萄球菌的代谢产物在治疗与缓解视网膜色素变性疾病中的应用，所述的金黄色葡萄球菌为金黄色亚种，Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓｓｕｂｓｐ．ａｕｒｅｕｓ，ＣＧＭＣＣＮｏ．０９１０。
【技术特征摘要】
1.一种金黄色葡萄球菌的代谢产物在治疗与缓解视网膜色素变性疾病中的应用，所述的金黄色葡萄球菌为金黄色亚种，Staphylococcus aureussubsp.aureus，CGMCC No.0910。。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于金黄色葡萄球菌金黄色亚种，CGMCC No.0910，在培养基中培养，然后将培养物制成滴眼液，具体方法如下(1)金黄色葡萄球菌金黄色亚种，CGMCC No.0910，接种于猪心胨培养基，35℃～37℃培养24小时，再将种子菌转入营养琼脂平板中，划分离培养24小时，选取典型菌落接种于猪心胨培养基，35℃～37℃培养24小时，得种子培养物；其中所用的猪心胨培养基，为猪...
【专利技术属性】
技术研发人员：邹庆宇，
申请(专利权)人：邹庆宇，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。