可用于将宏基因组文库转移至多种细菌物种中的基于RK2的广宿主范围克隆载体制造技术

本发明专利技术涉及用于在广泛的细菌宿主范围中克隆ＤＮＡ的克隆载体，该载体为自主复制人工染色体，其包含：（ｉ）ＲＫ２复制起点ｏｒｉＶ；（ｉｉ）ＲＫ２接合转移起点ｏｒｉＴ；（ｉｉｉ）来自ＲＫ２的ｐａｒ　ＤＥ；（ｉｖ）克隆区；（ｖ）另一个复制起点，其允许该载体以不超过１或２的拷贝数进行复制；其中该载体的大小不超过１５ｋｂ，不含ＲＫ２的ｔｒｆＡ，并且能够克隆至少１２ｋｂ的插入片段，其中该载体中的ＲＫ２　ＤＮＡ含量为不超过１０％的ＲＫ２。本发明专利技术还涉及含有所述克隆载体的宿主细胞和载体系统。提供了克隆ＤＮＡ和制备文库的方法以及所述载体和ＲＫ２复制子在宏基因组克隆中的用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

【技术保护点】
用于在广宿主范围的细菌中克隆ＤＮＡ的克隆载体，所述载体为自主复制人工染色体，其包含：　（ｉ）ＲＫ２复制起点ｏｒｉＶ；　（ｉｉ）ＲＫ２接合转移起点ｏｒｉＴ；　（ｉｉｉ）来自ＲＫ２的ｐａｒ　ＤＥ；　（ｉｖ）克隆区域；　 　（ｖ）另一个复制起点，该复制起点使得所述载体以不超过１或２的拷贝数进行复制；　其中所述载体的大小不超过１５ｋｂ，不含有ＲＫ２的ｔｒｆＡ，并且能够克隆至少１２ｋｂ的插入片段，其中所述载体中的ＲＫ２ＤＮＡ含量为不超过１０％的ＲＫ２。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：特里内奥奎克，克里斯廷弗勒格斯塔达格内斯，特龙埃尔林埃林森，兰韦赫斯克雷德，斯韦恩瓦拉，
申请(专利权)人：森温特股份有限公司，
类型：发明
国别省市：NO[挪威]