声膜色谱法分离黄芪多糖和黄芪皂甙制造技术

本发明专利技术公开了一种黄芪多糖和黄芪皂甙的分离方法，其特征是采用了超声膜分离器分离和过反相制备柱色谱分离相结合的工艺，整个工艺过程简单、快速、处理量大，同时纯化黄芪多糖和黄芪皂甙两种有效成分，得到的产品纯度高。本发明专利技术具有过程简单、自动化控制程度高、易于工业化应用的优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于中药材黄芪的两种有效成分黄芪多糖和黄芪皂甙的提取分离方法，属 于药用植物有效成分的提取分离

技术介绍
黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪 的干燥根.黄芪味甘，性微温，具有补气固表、 利尿排毒、排脓、敛疮生肌等功效.近代药理研究表明，黄芪多糖和黄芪皂甙是药用黄芪中 的主要有效成分，黄芪多糖具有促进免疫器官功能和抗体的生成、抗菌抗病毒和抗肿瘤、防 衰老及抗辐射、双向调节血糖等作用，黄芪皂甙也具有抗炎、降压、镇痛、镇静的作用，能促 进正常机体的抗体生成，提高巨噬细胞的吞噬率。目前，黄芪多糖和黄芪皂甙的提取分离方 法主要有水提醇沉法，水提液醇沉后沉淀主要含黄芪多糖，上清液主要含黄芪皂甙，单一的 水提醇沉收率都不高，如葛朝亮，夏泉，刘钢等(正交设计优化黄芪多糖的水提取工艺研究 [J1.中国药师，2007(6) :21)得到的最佳提取条件为加水量12 1，提取时间0.5小时， 提取次数2次，提取液浓缩后加无水乙醇沉淀，黄芪多糖收率2. 7% ；在醇提或水提时，也可 通过用CaO或NaCO3调节pH值至碱性的碱水法，如李红民，黄仁泉，王亚洲(提高黄芪多糖 提取收率的工艺研究J西北大学学报自然科学版，2000，30 (6) =335-337)或加入辅助方 法，如超声波或微波，如王莉等(黄芪多糖的微波提取及含量测定J，中国医药报，2001， 29(6) :35-37)运用微波技术提高提取速度，有效提高了收率，多糖含量为6. 55%。中国专 利申请号200510042836. 9 ；公开号CN1709916A，公开日:2005. 12. 21公开了甘肃祁连 山生物科技开发有限责任公司专利技术的黄芪多糖及黄芪皂甙提取方法，该专利技术采用了将黄芪 粉碎至颗粒状，采用6倍量混合溶剂回流提取，然后采用超滤-柱层析-溶剂重结晶两重纯 化，超滤-醇沉-溶剂洗涤两重纯化方法，分别得到了高纯度黄芪多糖和黄芪皂甙产品。
技术实现思路
针对目前从黄芪中提取分离黄芪多糖和黄芪皂甙时，步骤繁复，工艺时间长，效率 低的问题，提出本专利技术。本专利技术的目的在于提供一种简单、快速，处理量大，又同时能纯化两种有效成分的 工艺方法，采用超声膜处理器处理醇水提取液，通过膜分离可直接实现大分子黄芪多糖和 小分子黄芪皂甙以及黄酮等小分子物的分离，超声可保证膜通量没有较大的衰减，满足了 操作简单、处理量大、快速省时的生产化要求，得到的黄芪多糖纯度达到80%以上。透过超 滤膜的黄芪皂甙以及黄酮等小分子物经浓缩、干燥后，用70%甲醇溶解，上反相制备柱，可 将不同组分分开，得到的黄芪皂甙纯度可达90%以上。本专利技术的具体步骤如下1)将黄芪根粉碎至颗粒状，以液料质量比12 1的比例，用90%乙醇溶液和水溶 液交替提取各2次，乙醇提取温度70°C，水提温度100°C，最后合并全部上清液A ；2)将合并后的上清液A经过超声膜分离器进行分离，超滤膜截留分子量为 6000-10000道尔顿，得浓缩液B和滤过液C ；3)浓缩液B经醇沉、干燥后，得到黄芪多糖粉；4)滤过液C经浓缩、干燥，用70%甲醇液溶解后，上反相制备柱进行色谱法分离， 收集不同组分，经浓缩、干燥得黄芪皂甙。其中，步骤2)中的超声膜分离器，膜材料为聚砜，可耐受PH值2-13，操作环境 0-60°C，超声频率40KHZ士0. 5KHZ，单次处理过程中膜衰减不超过10%。 步骤4)中的反相制备柱为内径5-25厘米直管柱，配大流量高压泵和可调波长紫 外检测器，反相填料指的是粒径18微米的球形十八烷基硅胶填料。该专利技术与现有报道技术相比，具有以下明显的优点(1)超声膜分离器设备具有处理量大，操作简单，可实现连续操作，可大幅提高劳 动效率的优点。(2)采用反相制备柱，分辨率高，目标物纯度高。(3)分离过程可控、自动化程度高，便于工业化应用。综上所述，有关黄芪中提取黄芪多糖和黄芪皂甙的提取方法中，水提醇沉、超滤技 术、微波技术等的应用，国内已有专利技术和文献报道。但本课题采用超声膜分离器和反相 制备色谱柱结合来同时提取黄芪多糖和黄芪皂甙，过程简单、处理量大，黄芪多糖纯度达到 80%以上，黄芪皂甙纯度达到90%以上，国内未见相同报道。具体实施例方式实施例1取蒙古黄芪药材5公斤，粉碎，每次12倍量的90%乙醇和水分别在70°C和100°C 下各提取两次，每次1. 5小时，合并所有提取液。合并后的滤液通过BCSM-I超声膜分离器进 行分离，当膜通量下降5%时开启超声并调至弱超声状态，膜通量持续下降可调至强超声状 态，收集含小分子的滤过液并浓缩，未通过膜的大分子多糖通过循环过滤提高纯度。收集含 大分子的循环浓缩液，醇沉，干燥得纯度为84. 2% (苯酚-硫酸法测定)的黄芪多糖431.9 克。醇沉过程上清与透过膜含小分子的滤过液混合，浓缩，干燥，并用70%的甲醇溶 解，上反相制备柱，收集黄芪皂甙组分。经HPLC检测，得纯度为91. 6%的黄芪皂甙86. 1克。权利要求1.声膜色谱法分离黄芪多糖和黄芪皂甙的特征是采用了超声膜分离器分离和过反相 制备柱色谱分离工艺，其具体步骤如下1)将黄芪根粉碎至颗粒状，用90%乙醇溶液和水溶液交替提取各2次，乙醇提取温度 70°C，水提温度100°C，最后合并全部上清液A;2)将合并后的上清液A经过超声膜分离器进行分离，超滤膜截留分子量为6000-10000 道尔顿，得浓缩液B和滤过液C ；3)浓缩液B经醇沉、干燥后，得到黄芪多糖粉；4)滤过液C经浓缩、干燥，用70%甲醇液溶解后，上反相制备柱进行色谱法分离，收集 不同组分，经浓缩、干燥得黄芪皂甙。2.根据权利要求1所述的黄芪多糖和黄芪皂甙提取方法，其特征在于黄芪根粉和提取 液液料质量比为12 1，每次提取时间为1.5小时。3.根据权利要求1所述的黄芪多糖和黄芪皂甙提取方法，其特征在于超声膜分离器为 一种以超声促进膜分离的分离装置。4.根据权利要求1所述的黄芪多糖和黄芪皂甙提取方法，其特征在于制备柱指内径 5-25厘米的直管柱，柱内反相填料指的是粒径18微米的球形十八烷基硅胶填料。全文摘要本专利技术公开了一种黄芪多糖和黄芪皂甙的分离方法，其特征是采用了超声膜分离器分离和过反相制备柱色谱分离相结合的工艺，整个工艺过程简单、快速、处理量大，同时纯化黄芪多糖和黄芪皂甙两种有效成分，得到的产品纯度高。本专利技术具有过程简单、自动化控制程度高、易于工业化应用的优点。文档编号C07J53/00GK102040666SQ20091021851公开日2011年5月4日 申请日期2009年10月23日 优先权日2009年10月23日专利技术者常建华, 赵彦鼎, 郭立安 申请人:西安交大保赛生物技术股份有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】
声膜色谱法分离黄芪多糖和黄芪皂甙的特征是采用了超声膜分离器分离和过反相制备柱色谱分离工艺，其具体步骤如下：１）将黄芪根粉碎至颗粒状，用９０％乙醇溶液和水溶液交替提取各２次，乙醇提取温度７０℃，水提温度１００℃，最后合并全部上清液Ａ；２）将合并后的上清液Ａ经过超声膜分离器进行分离，超滤膜截留分子量为６０００－１００００道尔顿，得浓缩液Ｂ和滤过液Ｃ；３）浓缩液Ｂ经醇沉、干燥后，得到黄芪多糖粉；４）滤过液Ｃ经浓缩、干燥，用７０％甲醇液溶解后，上反相制备柱进行色谱法分离，收集不同组分，经浓缩、干燥得黄芪皂甙。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：郭立安，赵彦鼎，常建华，
申请(专利权)人：西安交大保赛生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：87[中国|西安]